NO供体型香豆素曼尼希碱类化合物及其制备方法、用途

本发明属于药物化学和药物治疗学领域，特别涉及no供体型香豆素曼尼希碱类化合物及其制备方法、用途。

背景技术：

1、癌症是现今威胁人类生命和健康的重要疾病之一，尽管抗癌药物的研究已经取得了很大进展，但由于抗肿瘤药物选择性差，毒副作用大，特别是肿瘤化疗耐药性的存在，影响药物的治疗效果，亟需开发新的药物来满足肿瘤患者需要。

2、天然产物长期以来被认为是有效治疗药物的重要来源。除了从天然产物直接研究开发成有效的治疗新药物外，天然产物还是新药开发所依赖的新先导化合物取之不尽的源泉。香豆素类化合物广泛存在于自然界中，具有抗菌、抗凝、抗氧化、抗炎和抗肿瘤等多种生理活性；其分子结构独特，具有良好的热力学和光化学稳定性，易于进行结构修饰并能方便地引入各种功能基团，一直受到国内外学者的广泛关注。研究表明，一些天然的香豆素类化合物能够选择性作用于肿瘤细胞，而对正常细胞毒性低，如七叶内酯，瑞香素、东莨菪素、新生霉素等(中国中药杂志，1998,23(5):303-305；phytomedicine,2014,21:970-977)，为研发高效低毒的抗肿瘤药物提供了良好的前景。近年来，为了得到抗肿瘤作用更强的香豆素类衍生物，探索其抗肿瘤构效关系，多个研究小组着手对香豆素进行结构修饰和改造，设计并合成了许多新的香豆素衍生物。

3、no在肿瘤的发生、发展和死亡中的作用已成为肿瘤生物学研究的热点之一。大量的研究表明，高浓度的no具有抗肿瘤作用(药学学报.2019,54(3):514-521；中国药科大学学报,2021,52(1):38-43；j med chem,2014,57(22):9343–9356)。研究还发现，一些肿瘤细胞较正常细胞对no诱导的细胞凋亡更为敏感；no供体与化疗药物联用可克服肿瘤耐药性等优势。本研究小组以香豆素-3-羧酸为原料，设计、合成了系列no-供体型香豆素衍生物。体外抗肿瘤活性研究表明，所得衍生物对多种肿瘤细胞均具有一定的抗增殖活性，部分化合物的作用强于5-fu，且对正常细胞的抑制作用轻微，表现出较好的选择性(med chem res,2018)，27(2):1198–1205)。尽管这类化合物具有良好的体外抗肿瘤活性，但其水溶性差，仍然需要进一步的结构修饰和优化，以改善其不足。

技术实现思路

1、针对上述问题，本发明提供了no供体型香豆素曼尼希碱类化合物及其制备方法、用途，所述no供体型香豆素曼尼希碱类化合物以7-羟基-香豆素-3-羧酸乙酯为先导化合物，先在其8-位引入胺甲基结构，得到相应的香豆素曼尼希碱衍生物，再经3-位酯基水解、酸化后，通过不同的连接链与具有抗肿瘤作用的no供体相结合，设计合成新的no供体型香豆素曼尼希碱衍生物。

2、本发明的第一个目的在于提供no供体型香豆素曼尼希碱类化合物，所述no供体型香豆素曼尼希碱类化合物的化学结构式如式i所示：

3、

4、式i中：

5、x代表-o-或-nh-；

6、r代表-(ch2)n-，其中n＝1～6、-ch(ch3)ch2-、-ch(ch3)(ch2)2-、-(ch2)2o(ch2)2-、-ph(ch2)2-、-(ch2)2nh(ch2)2-、-ch2ch＝chch2-或-ch2c≡cch2-；

7、r1代表nr1r2；

8、r1和r2可相同或不同，并且彼此独立地代表氢原子、c1-c6烷基、苯基、苄基、苯乙基；

9、或r1和r2与其所连接的氮原子一起形成五至七元脂肪杂环或芳杂环，所述脂肪杂环或芳杂环可任意地由下述相同或不同的取代基单取代至五取代，所述取代基包括：c1-c6烷基、c1-c6烷氧基、羟基或羟基-(c1-c6)烷基。

10、进一步地，x代表-o-或-nh-；

11、r代表-(ch2)n-，其中n＝2～6、-ch(ch3)ch2-、-ch(ch3)(ch2)2-、-(ch2)2o(ch2)2-、-ph(ch2)2-、-ch2ch＝chch2-或-ch2c≡cch2-；

12、r1代表氨基、二甲胺基、二乙胺基、二丙胺基、二正丁胺基、苯胺基、苄胺基、苯乙胺基、吡咯基、哌啶基、吗啡啉基、咪唑基、哌嗪基、4-甲基哌啶基、n-甲基哌嗪基、n-乙基哌嗪基或4-羟乙基哌嗪基。

13、本发明的第二个目的在于提供no供体型香豆素曼尼希碱类化合物的制备方法，包括：

14、以间苯二酚为原料，在酰化剂和第一催化剂的作用下，经过vilsmeier-haack反应制备2,4-二羟基苯甲醛；

15、2,4-二羟基苯甲醛与丙二酸二乙酯经knoevenagel反应制得7-羟基-香豆素-3-甲酸乙酯；

16、7-羟基-香豆素-3-甲酸乙酯、多聚甲醛、有机胺经曼尼希反应，在7-羟基-香豆素-3-甲酸乙酯的8-位引入不同的胺甲基，得到中间体7-羟基-8-胺甲基-香豆素-3-甲酸乙酯；

17、中间体7-羟基-8-胺甲基-香豆素-3-甲酸乙酯经水解，得到7-羟基-8-胺甲基-香豆素-3-甲酸；

18、7-羟基-8-胺甲基-香豆素-3-甲酸在酯缩合试剂的作用下，与氨基呋咱/羟基呋咱反应，得no供体型香豆素曼尼希碱类化合物；

19、合成路线如下所示：

20、

21、其中，所述氨基呋咱/羟基呋咱的结构式如下所示：

22、

23、x代表-o-或-nh-；

24、r代表-(ch2)n-，其中n＝1～6、-ch(ch3)ch2-、-ch(ch3)(ch2)2-、-(ch2)2o(ch2)2-、-ph(ch2)2-、-(ch2)2nh(ch2)2-、-ch2ch＝chch2-或-ch2c≡cch2-；

25、r1代表nr1r2；

26、r1和r2可相同或不同，并且彼此独立地代表氢原子、c1-c6烷基、苯基、苄基、苯乙基；

27、或r1和r2与其所连接的氮原子一起形成五至七元脂肪杂环或芳杂环，所述脂肪杂环或芳杂环可任意地由下述相同或不同的取代基单取代至五取代，所述取代基包括：c1-c6烷基、c1-c6烷氧基、羟基或羟基-(c1-c6)烷基。

28、进一步地，所述2,4-二羟基苯甲醛的制备过程中，间苯二酚、酰化剂、的摩尔比为1:1.1-1.5；所述酰化剂为一取代甲酰胺、二取代甲酰胺中的一种，所述第一催化剂为氯化氧磷、氯化亚砜、氯化锌、碳酰氯中的一种。

29、进一步地，所述7-羟基-香豆素-3-甲酸乙酯的制备过程中，加入了第二催化剂，所述第二催化剂为六氢吡啶和冰醋酸；所述2,4-二羟基苯甲醛、丙二酸二乙酯的摩尔比为1:1-1.5。

30、进一步地，所述中间体7-羟基-8-胺甲基-香豆素-3-甲酸乙酯的制备过程中，7-羟基-香豆素-3-甲酸乙酯、多聚甲醛、有机胺的摩尔比为1:5-8:3-4。

31、进一步地，所述中间体7-羟基-8-胺甲基-香豆素-3-甲酸乙酯的水解条件为碱性条件水解。

32、进一步地，所述7-羟基-8-胺甲基-香豆素-3-甲酸在酯缩合试剂的作用下，与氨基呋咱/羟基呋咱反应过程中，所述7-羟基-8-胺甲基-香豆素-3-甲酸、氨基呋咱/羟基呋咱的摩尔比为1:1-1.5。

33、本发明的第三个目的在于提供一种药物组合物，包括如上所述的no供体型香豆素曼尼希碱类化合物或其药学上可接受的盐；

34、其药学上可接受的盐由no供体型香豆素曼尼希碱类化合物和可药用酸混合制成；

35、所述可药用酸为盐酸，氢溴酸，硫酸，磷酸，乙酸，乳酸，丙二酸，琥珀酸，戊二酸，富马酸，酒石酸，马来酸，柠檬酸，抗坏血酸，甲磺酸，樟脑酸，草酸等。

36、进一步地，所述药物组合物还包括药学上可接受的载体或辅料。

37、本发明的第四个目的在于提供上述药物组合物在制备治疗肿瘤的药物中的用途，其中肿瘤包括肝癌、乳腺癌、宫颈癌、肺癌和结肠癌。

38、本发明的有益效果：

39、本发明提供的no供体型香豆素曼尼希碱类化合物，通过在香豆素的7-羟基邻位引入胺甲基碱(对应分子结构式中的ch2r1(nr1r2))的设计，提高了所得no供体型香豆素曼尼希碱类化合物的抗肿瘤活性，改善了其水溶性，赋予其良好的成药性。

40、本发明的其它特征和优点将在随后的说明书中阐述，并且，部分地从说明书中变得显而易见，或者通过实施本发明而了解。本发明的目的和其他优点可通过在说明书、权利要求书以及附图中所指出的结构来实现和获得。