一株高产吲哚3甲醛以缓解卵清蛋白引起的呼吸道过敏的动物双歧杆菌乳亚种

本发明涉及一株高产吲哚3甲醛以缓解卵清蛋白引起的呼吸道过敏的动物双歧杆菌乳亚种，属于微生物以及医药。

背景技术：

1、支气管哮喘是一种呼吸道过敏性疾病，其病因虽然进行过许多研究，但至今尚未完全明确阐述。可概括为气道免疫-炎症机制、神经调节机制及其相互作用，其中气道炎症被认为是呼吸道过敏的本质。近年来对其病理和生理学的深入研究，发现它是贯穿上下气道的持续炎症反应，机体受到过敏原的刺激，导致呼吸道局部产生特异性免疫球蛋白(sige)，它能够与肥大细胞和嗜碱性粒细胞表面的高亲和力ige受体(fcεri)结合，机体形成致敏状态，当机体再次接触到相同的过敏原，它与肥大细胞和嗜碱性粒细胞表面的ige交联，活化致敏细胞，导致细胞脱颗粒现象，从而释放组胺和白三烯等炎性介质，进而引发一系列的炎症反应。除此之外，组胺等炎性介质的释放还可以进一步诱导细胞表达分泌更多的炎症因子，从此构成一个相互作用的复杂网络，募集和活化嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞和辅助性t细胞2型(thelper type 2，th2)等免疫细胞，进一步导致致敏细胞释放炎性介质，从而使2型促炎反应持续占优势并加重。除此之外，越来越多的研究证实cd4+辅助性t淋巴细胞17在哮喘免疫机制中起到了关键作用，th17和调节性t细胞的比例失衡是哮喘等呼吸道过敏性疾病的主要机制，正常机体体内初始t细胞向th1和th2分化，并按照一定比例维持相对平衡状态，但在哮喘患者体内，更偏向于th2和th17，大量分泌il-4、il-5、il-13和il-17等促炎因子，使气道反应性增高，气道收缩，黏性分泌增加，诱发呼吸道过敏的发生。

2、哮喘目前没有彻底治疗的方法和药物，并且过敏的反复发作，导致患者需要长期依赖药物，再加上存在一定的副作用，因此哮喘的治疗仍然是一个医学难题。在哮喘的发病的免疫机制中，肠道菌群和色氨酸代谢的作用引起了广泛关注。哮喘患者肠道中出现微生物紊乱，导致色氨酸代谢失衡。由此可见，肠源性色氨酸代谢产物与哮喘等呼吸道过敏性疾病之间存在病理联系。研究也证实，益生菌通过产生色氨酸代谢物吲哚3甲醛，从而有效缓解皮炎小鼠的过敏症状，并且该益生菌菌株改善了皮炎患者的生活质量，增加粪便中的吲哚3甲醛的含量。然而吲哚3甲醛对于哮喘的作用还未有报道，因此探究益生菌产色氨酸代谢物吲哚3甲醛的能力，对于得到有效缓解哮喘过敏症状具有重要意义。综上所述，或许可通过调节色氨酸代谢中的小分子代谢物含量，进而缓解ova诱导的支气管哮喘过敏症状。

技术实现思路

1、本发明提供动物双歧杆菌乳亚种(bifidobacterium animalis subsp.lactis)ccfm1274在改善哮喘小鼠病理特征，及缓解哮喘过敏症状方面的新用途。

2、本发明提供一种动物双歧杆菌乳亚种(bifidobacterium animalissubsp.lactis)ccfm1274在产生色氨酸代谢物吲哚3甲醛、改善支气管哮喘小鼠病理特征、缓解哮喘过敏症状的产品中的应用，所述动物双歧杆菌乳亚种(bifidobacteriumanimalis subsp.lactis)ccfm1274，于2022年09月15日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为gdmcc no：62798，保藏地址为广州市先烈中路100号大院59号楼5楼。

3、本发明提供了一种动物双歧杆菌乳亚种(bifidobacterium animalissubsp.lactis)ccfm1274和/或动物双歧杆菌乳亚种ccfm1274的发酵液在制备缓解哮喘症状的产品中的应用，所述动物双歧杆菌乳亚种ccfm1274，已于2022年09月15日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为gdmcc no：62798。

4、在本发明的一种实施方式中，所述产品中动物双歧杆菌乳亚种(bifidobacteriumanimalis subsp.lactis)ccfm1274的活菌数不低于1×106cfu/ml。

5、在本发明的一种实施方式中，所述产品为药品或饲料添加剂。

6、在本发明的一种实施方式中，所述缓解哮喘过敏症状包括，缓解鼻部过敏症状，或降低血清中特异性免疫球蛋白的含量，或减轻肺部炎症，或抑制肺泡灌洗液中促炎因子分泌。

7、在本发明的一种实施方式中，所述缓解哮喘过敏症状包括，缓解打喷嚏、鼻炎、流涕等鼻部过敏症状，或降低血清中特异性免疫球蛋白的含量，或减轻肺部炎症，或抑制肺泡灌洗液中促炎因子分泌。

8、在本发明的一种实施方式中，所述哮喘为ova导致的支气管过敏反应。在临床上，诊断哮喘的指标之一，就是：血清中总ige。

9、在本发明的一种实施方式中，所述哮喘为ova导致的支气管过敏反应。在临床上，诊断哮喘的指标之一，就是：血清中ova-sige。

10、在本发明的一种实施方式中，所述药品中含有动物双歧杆菌乳亚种ccfm1274、药物载体和/或药用辅料。

11、在本发明的一种实施方式中，所述药品的剂型包含颗粒剂、胶囊剂、片剂、丸剂或口服液。

12、在本发明的一种实施方式中，所述药用辅料包含赋形剂以及附加剂。

13、在本发明的一种实施方式中，所述药用辅料包含抗黏合剂、渗透促进剂、缓冲剂、增塑剂、表面活性剂、消泡剂、增稠剂、包合剂、吸收剂、保湿剂、溶剂、抛射剂、增溶剂、助溶剂、乳化剂、着色剂、ph值调节剂、黏合剂、崩解剂、填充剂、润滑剂、润湿剂、整合剂、渗透压调节剂、稳定剂、助流剂、矫味剂、防腐剂、发泡剂、助悬剂、包衣材料、芳香剂、稀释剂、絮凝剂与反絮凝剂、助滤剂以及释放阻滞剂。

14、在本发明的一种实施方式中，所述附加剂包含微晶纤维素、羟丙基甲基纤维素以及精制卵磷脂。

15、在本发明的一种实施方式中，所述药物载体包含微囊、微球、纳米粒以及脂质体。

16、本发明还提供了一种生产色氨酸代谢物的方法，所述方法为，采用动物双歧杆菌乳亚种ccfm1274发酵制备得到。

17、本发明还提供了上述动物双歧杆菌乳亚种ccfm1274在制备色氨酸代谢物或含有色氨酸代谢物的产品中的应用，所述动物双歧杆菌乳亚种ccfm1274，已于2022年09月15日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为gdmcc no：62798。

18、在本发明的一种实施方式中，所述产品为化学品。

19、本发明还提供了一种含有述动物双歧杆菌乳亚种ccfm1274食品。

20、在本发明的一种实施方式中，所述食品为含有动物双歧杆菌乳亚种(bifidobacterium animalis subsp.lactis)ccfm1274或其发酵代谢物的食品。

21、在本发明的一种实施方式中，所述食品是使用动物双歧杆菌乳亚种(bifidobacterium animalis subsp.lactis)ccfm1274或含动物双歧杆菌乳亚种(bifidobacterium animalis subsp.lactis)ccfm1274的发酵剂生产得到的乳制品、豆制品或果蔬制品。

22、在本发明的一种实施方式中，所述食品是含有动物双歧杆菌乳亚种(bifidobacterium animalis subsp.lactis)ccfm1274的固体饮料。

23、在本发明的一种实施方式中，所述发酵剂的制备方法为：将动物双歧杆菌乳亚种(bifidobacterium animalis subsp.lactis)ccfm1274按照占培养基总质量2～4％的接种量接种到培养基中，于37℃下培养30h，得到培养液；将培养液离心，收集菌体；将菌体用ph为7.2的磷酸盐缓冲液清洗3次后用冻干保护剂重悬，得到重悬液；将重悬液采用真空冷冻法进行冻干，得到动物双歧杆菌乳亚种(bifidobacterium animalis subsp.lactis)ccfm1274的发酵剂。

24、在本发明的一种实施方式中，所述冻干保护剂和菌体的质量比为2:1。

25、在本发明的一种实施方式中，所述冻干保护剂含有脱脂奶粉、麦芽糊精和l-谷氨酸钠；其中脱脂奶粉:麦芽糊精:l-谷氨酸钠＝8～10:8～10:1。

26、在本发明的一种实施方式中，所述培养基是由占培养基总质量10％的脱脂乳、0.5％的葡萄糖、1.5％的胰蛋白胨以及0.3％的酵母浸膏溶解于水中制得的。

27、在本发明的一种实施方式中，所述培养基的ph为6.8。

28、本发明还提供了一种生产色氨酸代谢物的方法，所述方法为，采用动物双歧杆菌乳亚种ccfm1274发酵制备得到。

29、在本发明的一种实施方式中，所述色氨酸代谢物包括不限于犬尿氨酸、吲哚乳酸、吲哚3甲醛、吲哚乙酸。

30、本发明还提供了上述动物双歧杆菌乳亚种ccfm1274在制备色氨酸代谢物或含有色氨酸代谢物的产品中的应用，所述动物双歧杆菌乳亚种ccfm1274，已于2022年09月15日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为gdmcc no：62798。

31、在本发明的一种实施方式中，所述色氨酸代谢物包括不限于犬尿氨酸、吲哚乳酸、吲哚3甲醛、吲哚乙酸。

32、在本发明的一种实施方式中，所述产品为化学品。

33、在本发明的一种实施方式中，所述产品为食品、药品或保健品。

34、有益效果

35、本发明提供一株缓解哮喘小鼠病理特征，进而缓解哮喘的动物双歧杆菌乳亚种(bifidobacterium animalis subsp.lactis)ccfm1274，采用本发明提供的动物双歧杆菌乳亚种(bifidobacterium animalis subsp.lactis)ccfm1274作用于哮喘小鼠之后，能够显著缓解小鼠的过敏症状，具体体现在(与模型组相比)：

36、(1)动物双歧杆菌乳亚种(bifidobacterium animalis subsp.lactis)ccfm1274高产吲哚3甲醛，产量为598.513ppb。

37、(2)哮喘小鼠体重降低被缓解，体重增加了16.40％。

38、(3)显著降低哮喘小鼠血清中总ige含量，降低了63.88％。

39、(4)显著降低哮喘小鼠血清中ova-sige含量，降低了24.81％；

40、(5)明显缓解哮喘小鼠肺部组织炎症损伤；

41、(6)哮喘小鼠肺泡灌洗液中il-4水平降低，减少了44.27％；

42、(7)哮喘小鼠肺泡灌洗液中il-5水平显著降低，降低了22.61％；

43、(8)哮喘小鼠肺泡灌洗液中il-13水平降低，减少了13.31％；

44、(9)哮喘小鼠肺泡灌洗液中il-17水平降低，减少了27.58％；

45、(10)哮喘小鼠肺泡灌洗液中tnf-α水平显著提升，增加了53.96％；

46、(11)哮喘小鼠粪便中色氨酸代谢物吲哚丙酸水平提高了51.86％；

47、(12)哮喘小鼠粪便中色氨酸代谢物吲哚乳酸水平提高了37.84％。

48、因此，动物双歧杆菌乳亚种(bifidobacterium animalis subsp.lactis)ccfm1274在制备预防和/或治疗哮喘等呼吸道过敏性疾病的产品中，具有巨大的应用前景。

49、生物材料保藏

50、一株动物双歧杆菌动物亚种(bifidobacterium animalis subsp.lactis)ccfm1274，分类学命名为bifidobacterium animalis subsp.lactis，已于2022年09月15日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为gdmcc no：62798，保藏地址为广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，广东省科学院微生物研究所。