骆驼刺中的鸟氨酸系生物碱及其提取方法和应用与流程

本发明涉及骆驼刺分离纯化，是一种骆驼刺中的鸟氨酸系生物碱及其提取方法和应用，其中，骆驼刺中的鸟氨酸系生物碱即为所述骆驼刺中的2-methylhexahydro-3h-pyrrolo[1,2-a]imidazol-3-one。

背景技术：

1、骆驼刺(alhagisparsifoliashap)为豆科(leguminosae)蝶形花亚科(papilionoideae)骆驼刺属(alhagigagneb)的半灌木，高25厘米至40厘米，茎直立，具细条纹，叶互生，卵形、倒卵形或倒圆卵形，无毛，具短柄。骆驼刺主要生长于干旱半干旱区域，分布在我国西北、土库曼斯坦、巴基斯坦等地，主产区是新疆。由于独特的生长环境使得人们对骆驼刺的功效成分研究偏少，其主要生物活性之一为生物碱类化合物，具有抗肿瘤、治疗腹泻等多种功效，临床上主要用宫颈癌、肠易激综合征等多种疾病。恶性肿瘤严重威胁着人类的生命和健康，由于许多新型抗癌药物价格昂贵，长期应用容易引起耐药性和副作用使得寻找高效低毒的抗癌药物是肿瘤治疗的关键。骆驼刺中生物碱成分具有较强的抗肿瘤活性，且价格便宜、来源广泛从而引起了众多研究者的兴趣。

2、骆驼刺的药效之一主要来源于生物碱类化合物，因此，开发和利用骆驼刺的鸟氨酸系生物碱单体化合物，进一步挖掘其潜在的药用价值，并对其单体化合物的结构和理化性质进行确定和表征，对骆驼刺的开发利用具有重要意义。

技术实现思路

1、本发明提供了一种骆驼刺中的鸟氨酸系生物碱及其提取方法和应用，克服了上述现有技术之不足，其首次公开了骆驼刺中的鸟氨酸系生物碱即骆驼刺中的2-methylhexahydro-3h-pyrrolo[1,2-a]imidazol-3-one，能够作为制备预防宫颈癌肿瘤药物和抗肿瘤药物的应用。

2、本发明的技术方案之一是通过以下措施来实现的：一种骆驼刺中的2-methylhexahydro-3h-pyrrolo[1,2-a]imidazol-3-one，即骆驼刺中的鸟氨酸系生物碱，其化学结构式为：

3、。

4、本发明的技术方案之二是通过以下措施来实现的：一种骆驼刺中的2-methylhexahydro-3h-pyrrolo[1,2-a]imidazol-3-one的提取方法，按照下述方法进行：

5、第一步，将所需量干燥骆驼刺地上部分粉碎并加入甲醇，在室温下浸泡后，加热回流提取，合并每次回流提取液并减压回收、浓缩，得到骆驼刺总浸膏；

6、第二步，将骆驼刺总浸膏用水分散成混悬液后，依次用石油醚、乙酸乙酯、二氯甲烷进行萃取，将萃取液浓缩，分别得到石油醚部位浸膏、乙酸乙酯部位浸膏、二氯甲烷部位浸膏；

7、第三步，取二氯甲烷部位浸膏用硅胶柱色谱梯度洗脱分离后得到10个馏分；

8、第四步，将得到10个馏分中的第5个馏分经高效液相色谱梯度洗脱后纯化分离，并收集洗脱物，在7.3分钟处得到骆驼刺中的2-methylhexahydro-3h-pyrrolo[1,2-a]imidazol-3-one，即骆驼刺中的鸟氨酸系生物碱。

9、下面是对上述发明技术方案之二的进一步优化或/和改进：

10、上述第一步中，每1g干燥骆驼刺地上部分加入8ml至12ml甲醇。

11、上述第一步中，浸泡时间为3小时至4小时，加热回流提取的条件为：加热温度为50℃至60℃、回流提取3次、每次提取1小时至3小时。

12、上述第三步中，硅胶柱色谱梯度洗脱液包括二氯甲烷和甲醇，二氯甲烷和甲醇的体积比依次为1:0、100:1、50:1、20:1、10:1、5:1、1:1、0:1。

13、上述第四步中，高效液相色谱洗脱液为甲醇和水的混合液，其中，甲醇和水的体积比为20:80。

14、本发明的技术方案之三是通过以下措施来实现的：一种骆驼刺中的2-methylhexahydro-3h-pyrrolo[1,2-a]imidazol-3-one作为制备预防宫颈癌肿瘤药物的应用。

15、本发明的技术方案之四是通过以下措施来实现的：一种骆驼刺中的2-methylhexahydro-3h-pyrrolo[1,2-a]imidazol-3-one作为制备治疗宫颈癌肿瘤药物的应用。

16、本发明的技术方案之五是通过以下措施来实现的：一种骆驼刺中的2-methylhexahydro-3h-pyrrolo[1,2-a]imidazol-3-one作为制备防治宫颈癌肿瘤保健品的应用。

17、本发明首次公开了骆驼刺中的2-methylhexahydro-3h-pyrrolo[1,2-a]imidazol-3-one，其对人hela宫颈癌细胞具有一定的抑制作用，从而使骆驼刺中此类化合物作为潜在的抗宫颈癌肿瘤药物得到应用。

技术特征：

1.一种骆驼刺中的2-methylhexahydro-3h-pyrrolo[1,2-a]imidazol-3-one，即骆驼刺中的鸟氨酸系生物碱，其特征在于其化学结构式为：

2.一种根据权利要求1所述的骆驼刺中的2-methylhexahydro-3h-pyrrolo[1,2-a]imidazol-3-one的提取方法，其特征在于按照下述方法提取得到：

3.根据权利要求2所述的骆驼刺中的2-methylhexahydro-3h-pyrrolo[1,2-a]imidazol-3-one的提取方法，其特征在于第一步中，每1g干燥骆驼刺地上部分加入8ml至12ml甲醇。

4.根据权利要求2或3所述的骆驼刺中的2-methylhexahydro-3h-pyrrolo[1,2-a]imidazol-3-one的提取方法，其特征在于第一步中，浸泡时间为3小时至4小时，加热回流提取的条件为：加热温度为50℃至60℃、回流提取3次、每次提取1小时至3小时。

5.根据权利要求2或3或4所述的骆驼刺中的2-methylhexahydro-3h-pyrrolo[1,2-a]imidazol-3-one的提取方法，其特征在于第三步中，硅胶柱色谱梯度洗脱液包括二氯甲烷和甲醇，二氯甲烷和甲醇的体积比依次为1:0、100:1、50:1、20:1、10:1、5:1、1:1、0:1。

6.根据权利要求2或3或4或5所述的骆驼刺中的2-methylhexahydro-3h-pyrrolo[1,2-a]imidazol-3-one的提取方法，其特征在于第四步中，高效液相色谱洗脱液为甲醇和水的混合液，其中，甲醇和水的体积比为20:80。

7.一种根据权利要求1所述的骆驼刺中的2-methylhexahydro-3h-pyrrolo[1,2-a]imidazol-3-one作为制备预防宫颈癌肿瘤药物的应用。

8.一种根据权利要求1所述的骆驼刺中的2-methylhexahydro-3h-pyrrolo[1,2-a]imidazol-3-one作为制备治疗宫颈癌肿瘤药物的应用。

9.一种根据权利要求1所述的骆驼刺中的2-methylhexahydro-3h-pyrrolo[1,2-a]imidazol-3-one作为制备防治宫颈癌肿瘤保健品的应用。

技术总结
本发明涉及骆驼刺分离纯化技术领域，是一种骆驼刺中的鸟氨酸系生物碱及其提取方法和应用，将干燥骆驼刺地上部分粉碎并加入甲醇，加热回流提取，将得到的骆驼刺总浸膏用水分散后，用石油醚、乙酸乙酯、二氯甲烷进行萃取、浓缩，取二氯甲烷部位浸膏用硅胶柱色谱梯度洗脱分离后，将第5个馏分经高效液相色谱梯度洗脱后纯化分离，并收集洗脱物，在7.3分钟处得到骆驼刺中的鸟氨酸系生物碱。本发明首次公开了骆驼刺中的2‑methylhexahydro‑3H‑pyrrolo[1,2‑a]imidazol‑3‑one，其对人Hela宫颈癌细胞具有一定的抑制作用，从而使骆驼刺中此类化合物作为潜在的抗宫颈癌肿瘤药物得到应用。

技术研发人员：韩莉莉,玛依努尔·尼牙孜,李鹏,宋海龙,马国需,徐佩风,石磊岭,热依兰木·买赛地
受保护的技术使用者：新疆维吾尔自治区人民医院
技术研发日：
技术公布日：2024/2/1