一种传统墨水结合光热治疗对PC12细胞体外作用的研究方法

本发明为pc12细胞体外作用研究方法，具体为一种传统墨水结合光热治疗对pc12细胞体外作用的研究方法。

背景技术：

1、光热治疗技术是一种新型的肿瘤微创治疗技术，采用特定波长的光作为外界的刺激源，通过纳米光热介质将刺激源的能量转换成热能，产生局部温热(43-50℃)而杀死肿瘤细胞。近年来，大量具有突出近红外光吸收特性的材料被应用于光热治疗。

2、墨主要有松烟墨和油烟墨两大类。它们都是通过墨窑燃烧原料，提取烟熏而积的黑色粉末，经捣杵提纯加皮胶调制而成。

3、pc12细胞来源于大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞瘤，因其具有神经内分泌细胞的一般特性而被广泛应用于各种神经系统疾病的体外研究，近年来，研究者们发现纳米材料结合光热治疗对肿瘤细胞具有一定的杀伤作用，并且这种方式对降低细胞的毒性具有良好的效果，与传统的癌症治疗方法相比，纳米材料结合光热治疗能够增加患者的顺应性，光热治疗在恶性肿瘤的治疗中具有良好的应用前景，但现暂未有将传统墨水与光热治疗对pc12细胞体外作用的研究方法。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种传统墨水结合光热治疗对pc12细胞体外作用的研究方法，以解决上述背景技术提出的目前市场上的问题。

2、为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

3、一种传统墨水结合光热治疗对pc12细胞体外作用的研究方法，包括如下步骤：

4、s1、对墨水进行稀释，配置不同浓度的墨水培养基，进行测定墨水纳米颗粒粒径与电位；

5、s2、培养pc12细胞；

6、s3、测试不同浓度墨水经近红外光照射的温度变化；

7、s4、通过cck-8法测定细胞毒性；

8、s5、通过墨水结合光热治疗后cck-8法测定细胞活性；

9、s6、配制钙黄绿素和碘化丙啶，随后进行细胞染色。

10、本发明一个或多个实施例中，在所述步骤s1中，所述的墨水为油烟墨，至少使用胎牛血清、青霉素、链霉素双抗溶液和二甲醚来进行配制墨水培养基。

11、本发明一个或多个实施例中，在所述步骤s2中，在37℃、5％co2恒温箱中培育pc12细胞。

12、本发明一个或多个实施例中，在所述步骤s3中，首先分三组实验例，依次为空白组、对照组和实验组。

13、本发明一个或多个实施例中，在所述步骤s3中，照射距离为5-10cm。

14、本发明一个或多个实施例中，在所述步骤s4和步骤s5中，细胞存活率的计算公式为：

15、细胞存活率＝(存活细胞数/总细胞数)×100％＝

16、[(实验组od值-空白组od值)/(对照组od值-空白组od值)]×100％。

17、与现有技术相比，本发明的有益效果是：

18、本发明采用传统墨水中的碳纳米颗粒作为光热转换的纳米材料，与有机纳米材料相比，碳纳米材料具有良好的光热性能；与其他无机纳米材料相比，碳纳米材料具有较低的密度，良好的化学稳定性，低原材料价格，低毒性和较强的细胞穿透力，成为药物载体研究热点；

19、本发明中所提出的研究方法，将不同浓度的墨水培养液在的led冷光源照射下，温度持续上升，并且浓度越大温度升高的速度越快，说明该墨水中的碳纳米颗粒是一种理想的光热转换材料。pc12细胞经不同浓度墨水培养液培养24h后，细胞的存活率没有大幅度降低，说明该材料对细胞没有毒性，是相对安全的材料。不同浓度的墨水结合光热治疗后实验组的细胞存活率与对照组的细胞存活率差异显著，说明传统墨水结合光热治疗对pc12细胞具凋亡作用。

技术特征：

1.一种传统墨水结合光热治疗对pc12细胞体外作用的研究方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的传统墨水结合光热治疗对pc12细胞体外作用的研究方法，其特征在于：在所述步骤s1中，所述的墨水为油烟墨，至少使用胎牛血清、青霉素、链霉素双抗溶液和二甲醚来进行配制墨水培养基。

3.根据权利要求1所述的传统墨水结合光热治疗对pc12细胞体外作用的研究方法，其特征在于：在所述步骤s2中，在37℃、5％co2恒温箱中培育pc12细胞。

4.根据权利要求1所述的传统墨水结合光热治疗对pc12细胞体外作用的研究方法，其特征在于：在所述步骤s3中，首先分三组实验例，依次为空白组、对照组和实验组。

5.根据权利要求1所述的传统墨水结合光热治疗对pc12细胞体外作用的研究方法，其特征在于：在所述步骤s3中，照射距离为5-10cm。

6.根据权利要求1所述的传统墨水结合光热治疗对pc12细胞体外作用的研究方法，其特征在于：在所述步骤s4和步骤s5中，细胞存活率的计算公式为：

技术总结
本发明公开了一种传统墨水结合光热治疗对PC12细胞体外作用的研究方法，包括如下步骤：S1、对墨水进行稀释，配置不同浓度的墨水培养基，进行测定墨水纳米颗粒粒径与电位；S2、培养PC12细胞；S3、测试不同浓度墨水经近红外光照射的温度变化；S4、通过CCK‑8法测定细胞毒性；S5、通过墨水结合光热治疗后CCK‑8法测定细胞活性；S6、配制钙黄绿素和碘化丙啶，随后进行细胞染色。在所述步骤S1中，所述的墨水为油烟墨，采用墨水中的碳纳米颗粒作为光热转换的纳米材料，与有机纳米材料相比，碳纳米材料具有良好的光热性能；与其他无机纳米材料相比，碳纳米材料具有较低的密度，良好的化学稳定性，低原材料价格，低毒性和较强的细胞穿透力，成为药物载体研究热点。

技术研发人员：聂国朝,韦敏,李富兰,钟曦乐,杨志涛,赵荣钰,奉黎,周琳
受保护的技术使用者：玉林师范学院
技术研发日：
技术公布日：2024/3/24