一株里氏假单孢杆菌及其应用的制作方法

本发明涉及微生物，具体为一株里氏假单孢杆菌及其应用。

背景技术：

1、土壤盐碱化是土地退化的主要表现之一，现已成为世界灌溉农业可持续发展的制约因素。据统计，新疆盐碱化面积约占灌区耕地面积的1/3，土地利用率低，严重制约了当地农业发展，盐碱地的改良与防治已成为社会经济可持续发展的重要内容。

2、在盐碱地的利用上，国内外的研究者对盐碱地的治理和改良都进行了相关的研究和施行。将治理和改良方法分为物理改良、生物改良、化学改良、水利改良四大类。其中，生物改良多是植树造林，种植耐盐的树木，抗盐性强的植物，防风固沙的同时，也可以有效改善盐碱地的土壤构造、增强土壤的肥力，从而有效地防止土壤盐分在地表土中的积聚；还使用微生物菌肥，降低土壤碱性，采用菊芋、海葵新品种，建立种植带都是目前可行的措施。

3、而微生物中的植物根际促生菌(plant growth promoting rhizobacteria，pgpr)是指自由生活在土壤或附生于植物根系的一类可促进植物生长及其对矿质营养的吸收和利用，并能抑制有害生物的有益菌类。现有报道的pgpr在改善盐土、促进植物耐盐性的研究主要集中在假单胞菌属(pseudomonas sp.)、芽胞杆菌属(bacillus sp.)、黄杆菌属(flavobacteria)和固氮菌属(azotobacter)等菌株筛选上，并对它们在不同植株作物上研究较多。其中，假单胞菌属(pseudomonas sp.)目前只针对番茄的耐盐促生长上研究较多，如现有技术中公开了一株耐盐促生菌菌株b9，能在盐胁迫下显著提高番茄的耐盐促生能力，将该菌株制成的番茄耐盐促生剂，能明显增大番茄的株型，促进番茄幼苗的干物质积累，减缓了盐害现象，从而促进番茄幼苗的生长，有助于提高番茄的耐盐性。然而所述耐盐促生的菌株b9耐盐能力较弱，而假单胞菌属(pseudomonas sp.)在棉花、小麦盐渍土壤修复以及耐盐的根际促生菌的筛选上还少有研究，在盐碱地的利用和开发上，有必要研究出新的小麦耐盐的根际促生菌，为盐碱地的利用提供更多更高效的耐盐促生菌选择。

4、微生物菌肥生产中运用的菌种以细菌肥为主，细菌具有较强的自发突变性，且位于质粒上的基因不稳定，其菌株的特性在繁殖过程中很容易减弱或消失，优良基因也会消失，因此在研发和试验过程中表现好的菌肥，在推广和应用中效果往往较差。菌种效能的不稳定性和单一性使得在工厂化生产中存在菌株资源匮乏、活菌数量少、有效期短等问题。在投入生产时，对于生产环境和监管要求较高，只有极少数企业能够严格按照要求生产，这使微生物菌肥的批量化生产面临挑战。

5、微生物菌肥发挥效用与外部环境如空气温度、湿度、光照强度、土壤含水量、ph值等有关。我国幅员辽阔，不同农业种植区的外部环境不同，微生物菌肥所能发挥的效用也不尽相同。即使对同种作物来说，在不同外部环境中，施以相同的菌肥，其能发挥的效用仍然存在差异。微生物菌肥无法广泛应用于各种植物。我国物种资源丰富，每种植物都有其自身的生理生化特性。微生物菌肥往往只针对某种特定的植物有高效作用，而无法广泛应用于不同植物。不同微生物菌肥的作用机制和作用效果都不尽相同。目前市场上微生物菌肥产品种类繁多，但其针对性不强，无法解决专一性问题，在菌株的组合上不够科学、缺乏创新微生物菌肥作为高效能、低成本的肥料。

技术实现思路

1、解决的技术问题

2、针对现有技术的不足，本发明提供了一株里氏假单孢杆菌及其应用，为盐碱地的利用提供更多更高效的耐盐促生菌选择。

3、(二)技术方案

4、为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一株里氏假单孢杆菌ls-k1-3-2菌株，所述菌株于2023年2月10日保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心(cgmcc)，菌种保藏编号为cgmcc no：26538。

5、具体地，所述菌株的16s r dna的核苷酸序列如seq、id所示。

6、本发明从新疆土壤中分离得到一株里氏假单孢杆菌，制备土壤悬液后，将所得细菌培养液106稀释涂布，挑取生长良好的单菌落进行培养，在小麦“新春9号”上经过3次以上的接种实验，该耐盐菌剂能明显提高小麦的成活率和叶绿素含量，显著促进小麦的干物质积累，并对小麦的根长、表面积、根体积均有促进作用，减缓了盐害现象，从而促进小麦幼苗的生长，同时还能减少化学肥料的使用。

7、(三)有益效果

8、与现有技术相比，本发明提供了一株里氏假单孢杆菌及其应用，具备以下

9、有益效果：

10、本发明提供的一株耐盐促生的假单胞菌(pseudomonas sp.)rl-wg26菌株及耐盐菌剂，用于盐胁迫中促进小麦生长的应用。将耐盐菌剂注入小麦幼苗根围土壤中，能明显提高植株的成活率、株高、茎粗，显著减缓离子毒害现象，并对小麦幼苗的根长、根表面积、跟体积均有促进作用，减缓了盐胁迫现象；并且在非盐胁迫下，施加耐盐促生菌rl-wg26后小麦的根长和根面积都高于对照组，表明在非盐胁迫下施加耐盐促生菌rl-wg26后也能促进小麦的生长，从而促进水稻幼苗的生长，有助于提高小麦的耐盐性，减少化学肥料使用。该耐盐促生菌菌株具有广泛的应用前景，为运用pgpr来缓解作物盐害提供了理论依据和技术支撑。

技术特征：

1.一株里氏假单孢杆菌ls-k1-3-2菌株，其特征在于，所述的里氏假单孢杆菌为pseudomonas lini，于2023年02月10号保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为cgmcc no.26538。

2.小麦耐盐促生剂，其特征在于，所述的小麦耐盐促生剂由权利要求1所述的ls-k1-3-2菌株制备得到。

3.根据权利要求2所述的小麦耐盐促生剂，其特征在于，所述的小麦耐盐促生剂的制备方法如下：

4.根据权利要求1所述的里氏假单孢杆菌在小麦耐盐的应用。

5.根据权利要求2所述的小麦耐盐促生剂在小麦耐盐的应用。

技术总结
本发明涉及微生物技术领域，且公开了一株里氏假单孢杆菌及其应用，所述的里氏假单孢杆菌为Pseudomonas lini，于2023年02月10号保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.26538；用于盐胁迫中促进小麦生长的应用。将耐盐菌剂注入小麦幼苗根围土壤中，能明显提高植株的成活率、株高、茎粗，显著减缓离子毒害现象，并对小麦幼苗的根长、根表面积、跟体积均有促进作用，减缓了盐胁迫现象；并且在非盐胁迫下，施加耐盐促生菌RL‑WG26后小麦的根长和根面积都高于对照组，表明在非盐胁迫下施加耐盐促生菌RL‑WG26后也能促进小麦的生长，从而促进水稻幼苗的生长，有助于提高小麦的耐盐性，减少化学肥料使用。

技术研发人员：陈志荣,许世武,高波,焦天奇,孟凡成,易强,刘湘岩,肖帆
受保护的技术使用者：沃达农业科技股份有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/22