本发明涉及植物基因工程领域,尤其涉及一种马铃薯盐胁迫响应启动子prostugt288及其载体、重组菌和应用。
背景技术:
1、马铃薯(solanum tuberosum),属于茄科(solanaceae)茄属(solanum)作物,是仅次于水稻、小麦和玉米的第四大主粮作物,在保障国家粮食安全方面发挥重要作用。马铃薯遗传资源丰富,富含多种营养物质,是日常生活中重要的菜粮兼用型作物。
2、盐胁迫是重要的环境胁迫因子之一,显著影响作物产量和品质。对于马铃薯盐胁迫响应基因启动子的研究,为土壤盐度的分子检测及抗逆马铃薯品种培育提供理论基础,对提升马铃薯产量具有重要意义。
技术实现思路
1、本发明所要解决的技术问题在于提供一种马铃薯盐胁迫响应启动子prostugt288及其载体、重组菌和应用。
2、本发明采用以下技术方案解决上述技术问题:
3、一种马铃薯盐胁迫响应启动子prostugt288,所述启动子prostugt288的核苷酸序列如seq id no.1所示。
4、作为本发明的优选方式之一,所述启动子prostugt288的克隆步骤如下:提取马铃薯总dna;设计特异性扩增引物prostugt288-f和prostugt288-r;以基因组dna为模板进行pcr扩增,获得目的启动子prostugt288;其中,特异性扩增引物prostugt288-f和prostugt288-r的核苷酸序列分别如seq id no.2、seq id no.3所示。
5、一种上述马铃薯盐胁迫响应启动子prostugt288在识别土壤盐胁迫、培育盐胁迫抗性转基因植株方面的应用。
6、一种重组载体,包括上述马铃薯盐胁迫响应启动子prostugt288。
7、作为本发明的优选方式之一,所述重组载体具体为pbi121-prostugt288-gus。
8、作为本发明的优选方式之一,所述重组载体pbi121-prostugt288-gus的构建方法如下:利用同源重组法通过双酶切将载体pbi121-35s-gus中的35s强启动子序列替换为启动子prostugt288序列。
9、作为本发明的优选方式之一,所述载体pbi121-35s-gus酶切位点是hind iii和bamh i。
10、一种重组菌,包括上述马铃薯盐胁迫响应启动子prostugt288。
11、作为本发明的优选方式之一,所述重组菌的构建方法如下:将所述马铃薯盐胁迫响应启动子prostugt288构建的重组载体pbi121-prostugt288-gus导入菌体。
12、本发明相比现有技术的优点在于:本发明提供的prostugt288启动子可以显著响应盐胁迫处理,从而有效识别植物种植土壤的盐度,并为培育盐胁迫抗性马铃薯品种提供理论依据。
1.一种马铃薯盐胁迫响应启动子prostugt288,其特征在于,所述启动子prostugt288的核苷酸序列如seq id no.1所示。
2.根据权利要求1所述的马铃薯盐胁迫响应启动子prostugt288,其特征在于,所述启动子prostugt288的克隆步骤如下:提取马铃薯总dna;设计特异性扩增引物prostugt288-f和prostugt288-r;以基因组dna为模板进行pcr扩增,获得目的启动子prostugt288;其中,特异性扩增引物prostugt288-f和prostugt288-r的核苷酸序列分别如seq id no.2、seqid no.3所示。
3.一种如权利要求1~2任一所述的马铃薯盐胁迫响应启动子prostugt288在识别土壤盐胁迫、培育盐胁迫抗性转基因植株方面的应用。
4.一种重组载体,其特征在于,包括如权利要求1~2任一所述的马铃薯盐胁迫响应启动子prostugt288。
5.根据权利要求4所述的重组载体,其特征在于,所述重组载体具体为pbi121-prostugt288-gus。
6.根据权利要求5所述的重组载体,其特征在于,所述重组载体pbi121-prostugt288-gus的构建方法如下:利用同源重组法通过双酶切将载体pbi121-35s-gus中的35s强启动子序列替换为启动子prostugt288序列。
7.根据权利要求6所述的重组载体,其特征在于,所述载体pbi121-35s-gus酶切位点是hind iii和bamh i。
8.一种重组菌,其特征在于,包括如权利要求1~2任一所述的马铃薯盐胁迫响应启动子prostugt288。
9.根据权利要求8所述的重组菌,其特征在于,所述重组菌的构建方法如下:将所述马铃薯盐胁迫响应启动子prostugt288构建的重组载体pbi121-prostugt288-gus导入菌体。