新型CSF1R抑制剂及其制备方法和用途

本发明属于生物，具体涉及一种新型csf1r抑制剂及其制备方法和用途。

背景技术：

0、技术背景

1、csf1r(colony stimulating factor 1receptor)是由csf1r基因编码的一种酪氨酸激酶，是csf1和il34的跨膜受体，由5个免疫球蛋白功能域、跨膜区、细胞膜内的近膜区、酪氨酸激酶结构域组成。非活化状态下，激酶活化环向后折叠至atp结合口袋，活化环上的809位酪氨酸作为假底物，阻止底物结合，并且dfg序列的796位天冬氨酸处于“dfg-out”构象。当csf1或il34与第2/3免疫球蛋白功能域特异性结合，561位酪氨酸磷酸化，导致dfg序列翻转形成“dfg-in”构象，活化环重构，使自身的抑制消除，从而引发由酪氨酸磷酸化所启动的信号传导级联反应，主要包括erk和pi3k-akt信号通路传导。因此，csf1r信号通路对巨噬、单核细胞发育和分化，以及肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophage,tam)的生理功能有重要影响。研究表明，肿瘤相关巨噬细胞和骨髓源性抑制细胞(mdsc)被认为与肿瘤内部免疫抑制微环境的形成和支持肿瘤生长的血管生成有直接关系。肿瘤相关巨噬细胞表达并依赖于通过csf1r的信号传导促进肿瘤侵袭和转移。比如，aml患者肿瘤微环境中的支持细胞高表达csf1r，其信号通路对于维持aml肿瘤细胞生存不可或缺，csf1r高表达的支持细胞分泌hgf等因子促进aml肿瘤细胞生长，aml肿瘤细胞进一步诱导骨髓中单核/巨噬细胞生长，形成促肿瘤的微环境。对aml肿瘤细胞用csf1r抑制剂，对csf1r抑制剂耐药的患者总体生存显著差于敏感的患者。因此，csf1r可作为抑制aml肿瘤微环境的新靶点。再者，csf1的细胞来源主要是间充质来源，但巨噬细胞和肿瘤也分泌csf1，csf1和csf1r的表达水平与乳腺癌、卵巢癌和前列腺癌中的肿瘤细胞侵袭性和不良临床预后相关。

2、csf1和/或csf1r也在许多炎性疾病中过度表达，大多数研究集中在类风湿性关节炎(ra)上。csf1r与单核细胞增殖和分化成滑膜细胞、巨噬细胞和破骨细胞有关，其介导关节损伤并促进类风湿性关节炎。研究表明，在克罗恩病患者也中检测到csf1和/csf1r的过表达。

3、目前仅有几个csf1r小分子抑制剂处于临床研究。比如，pexidartinib是csf1r/c-kit双靶点抑制剂，2019年fda已批准其用于治疗腱鞘巨细胞瘤；dcc-3014是选择性抑制剂，目前正处于治疗腱鞘巨细胞瘤和高级别恶性肿瘤的ii期临床试验中；edicotinib和blz945选择性抑制剂，已用于治疗csf1r依赖的恶性肿瘤。除了单药使用以外，dcc-3014和arry-382也与pd1、pd-l1抑制剂联用，通过免疫治疗抑制肿瘤进展。目前edicotinib治疗难治/复发aml的ii期临床试验正在进行。

4、因此，针对csf1r靶点，开发更有效的新型小分子抑制剂具有重要的现实意义。

技术实现思路

1、本发明要解决的技术问题为：进一步丰富csf1r靶点的抑制剂种类，为开发csf1r依赖的恶性肿瘤药物提供依据。

2、本发明解决上述技术问题的技术方案为：提供了一种新型csf1r抑制剂，其结构通式如下所示：

3、其中，r1选自氢、中的至少一种；r2选自氢、氟；r3选自氢、氟或三氟甲基；r4选自r5～r6独立地选自h、取代或未取代的c1～c8烷基、n＝0或1；r7选自取代或未取代的c1～c8烷基、取代或未取代的3～8元环烷基、取代或未取代的c2～c8烯基。

4、优选的，上述化合物中，r1选自

5、优选的，上述化合物中，r4选自

6、中的至少一种。

7、具体的，上述新型csf1r抑制剂的结构式如下所示：

8、

9、

10、

11、本发明还提供了一种上述新型csf1r抑制剂药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、异构体、酯、酸、代谢物，或其前药。

12、其中，上述新型csf1r抑制剂药学上可接受的盐，包括与酸成盐。与酸成盐是指，通过母体化合物的游离碱与无机酸或有机酸的反应而得。无机酸包括盐酸、氢溴酸、硝酸、磷酸、偏磷酸、硫酸、亚硫酸或高氯酸。有机酸包括乙酸、丙酸、丙烯酸、草酸、(d)或(l)苹果酸、富马酸、马来酸、羟基苯甲酸、γ-羟基丁酸、甲氧基苯甲酸、邻苯二甲酸、甲磺酸、乙磺酸、萘-1-磺酸、萘-2-磺酸、对甲苯磺酸、水杨酸、酒石酸、柠檬酸、乳酸、扁桃酸、琥珀酸或丙二酸。

13、本发明还提供了上述化合物药学上可接受的溶剂化物。术语“溶剂化物”是指一个或多个溶剂分子与本发明的化合物所形成的缔合物。形成溶剂化物的溶剂包括，但不限于，水、异丙醇、乙醇、甲醇、二甲基亚砜、乙酸乙酯、乙酸等。

14、本发明还提供了上述化合物药学上可接受的水合物。术语“水合物”表示进一步通过非共价分子间作用力结合化学计量或非化学计量的水的化合物。

15、本发明还提供了上述化合物药学上可接受的异构体。术语“异构体”是指化学组成相同但是原子或基团在空间排列上不同的化合物，包括非对映异构体、对映异构体、区域异构体、结构异构体、旋转异构体、互变异构体等。

16、本发明还提供了上述化合物药学上可接受的多晶型物。术语“多晶型物”表示化合物或其复合物的固体结晶形式，其可以通过物理方法，例如x射线粉末衍射图或红外光谱进行表征。

17、本发明所用的术语“药学上可接受的”是指在在合理的医学判断范围，能适于用来与人类和其他哺乳动物的组织接触，而没有不当毒性、刺激、过敏反应等，其在对受者给药时能直接或间接地提供本发明的化合物或化合物的前药。

18、本发明还提供了一种药物组合物，包括新型csf1r抑制剂或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、异构体、酯、酸、代谢物，或其前药为活性成分。

19、其中，上述药物组合物中，还包括药学上可接受的辅助性成分。

20、所述的辅助性成分如环糊精、精氨酸或葡甲胺。所述的环糊精选自α-环糊精、β-环糊精、γ-环糊精、(c1-4烷基)-α-环糊精、(c1-4烷基)-β-环糊精、(c1-4烷基)-γ-环糊精、(羟基-c1-4烷基)-α-环糊精、(羟基-c1-4烷基)-β-环糊精、(羟基-c1-4烷基)-γ-环糊精、(羧基-c1-4烷基)-α-环糊精、(羧基-c1-4烷基)-β-环糊精、(羧基-c1-4烷基)-γ-环糊精、α-环糊精的糖类醚、β-环糊精的糖类醚、γ-环糊精的糖类醚、α-环糊精的磺丁基醚、β-环糊精的磺丁基醚和γ-环糊精的磺丁基醚。

21、所述的辅助性成分还包含医学上可接受的载体、佐剂或媒剂。可用于药学上可接受的药物组合物还离子交换剂、氧化铝、硬脂酸铝、卵凝脂；缓冲物质包括磷酸盐、甘氨酸、精氨酸、山梨酸等。

22、上述药物组合物可以为液体形式或固体形式。其中，所述的液体形式可以为水溶液形式。所述的固体形式可以为粉末、颗粒、片剂或冻干粉形式。该药物组合物还含有注射用水、盐水溶液、葡萄糖水溶液、注射/输注用盐水、注射/输注用葡萄糖、格林氏溶液或含有乳酸盐的格林氏溶液。

23、进一步的，本发明还提供了下述两种新型csf1r抑制剂的制备方法。

24、其中，第一种csf1r抑制剂的制备方法，包括以下步骤：

25、a、中间体m1的制备

26、取原料sm1、2,4-二氯嘧啶和碳酸铯，加入乙腈，室温下反应2h，过滤后用乙腈淋洗滤饼收集滤液后浓缩，浓缩物打浆，过滤获得滤饼，得到中间体m1；

27、b、中间体m2的制备

28、取m1、4-(4-甲基哌嗪)苯胺，加入乙酸，在80℃反应2h，过滤后用乙醚淋洗滤饼即可得到纯净中间体m2；

29、c、中间体m3的制备

30、m2溶解于甲醇中，并分批加入浓盐酸，于65℃下反应2小时后，将反应液进行浓缩，再将浓缩液分散在水中，加入适量氢氧化钾调节ph直至ph>9，有大量固体析出时，过滤并用乙醚淋洗滤饼，得到高纯度新型csf1r抑制剂cs1。

31、其中，上述新型csf1r抑制剂的制备方法中，所述sm1的结构式为

32、其中，上述新型csf1r抑制剂的制备方法中，还包括步骤d，取cs1溶解于二氯甲烷和甲醇的混合液中，加入酸酐或异氰酸酯，室温下反应0.5小时后，浓缩，浓缩液分散到乙醚中，抽滤，得到的滤饼即为新型csf1r抑制剂cs2～cs14。

33、其中，所述的酸酐或异氰酸酯包括醋酸酐、丙酸酐、异丁酸酐、环丙酸酐、环己基甲酸酐、乙基异氰酸酯、丙基异氰酸酯、异丙基异氰酸酯、正丁基异氰酸酯、叔丁基异氰酸酯、烯丙基异氰酸酯、环戊基异氰酸酯或环己基异氰酸酯中的至少一种。

34、其中，第二种csf1r抑制剂的制备方法，包括以下步骤：

35、a、中间体m4的制备

36、取原料对氨基苯酚和2-碘丙烷，加入二氯甲烷/甲醇混合物，室温下反应1h，将反应液进行浓缩，浓缩物分散在乙醚中进行打浆，然后过滤获得滤饼，得到纯净中间体m4；

37、b、中间体m5的制备

38、取m4、2,4-二氯嘧啶和碳酸铯，加入乙腈，室温下反应2h，过滤后用乙腈淋洗滤饼收集滤液后浓缩，浓缩物打浆，过滤获得滤饼，得到中间体m5；

39、c、中间体m6的制备

40、取m5、4-(4-叔丁氧羰基哌嗪)苯胺和对甲苯磺酸，加入异丙醇，在80℃反应3h，有大量固体析出，过滤后用乙醚淋洗滤饼，得到纯净中间体m6；

41、d、cs15的制备

42、将m6溶解于二氯甲烷中，并分批加入三氟乙酸，于室温下反应1小时后，将反应液进行浓缩，再将浓缩液分散在水中，加入氢氧化钾调节ph直至ph>9，有大量固体析出，过滤并用乙醚淋洗滤饼，得到高纯度的csf1r抑制剂cs15。

43、进一步的，上述第二种csf1r抑制剂的制备方法中，步骤a中的对氨基苯酚可替换成3-氟-4-氨基苯酚。

44、其中，上述第二种csf1r抑制剂的制备方法中，还包括步骤e，将cs15溶解于二氯甲烷/甲醇混合液中，加入酸酐或异氰酸酯，于室温下反应0.5小时后，将反应液进行浓缩，再将浓缩液分散在乙醚中，抽滤得到滤饼，即为csf1r抑制剂cs16-cs29。

45、进一步的，上述步骤e中所述的酸酐或异氰酸酯包括醋酸酐、丙酸酐、异丁酸酐、环丙酸酐、环己基甲酸酐、n-琥珀酰亚胺基-n-甲基氨基甲酸酯、乙基异氰酸酯、异丙基异氰酸酯、丙基异氰酸酯、叔丁基异氰酸酯、烯丙基异氰酸酯、环戊基异氰酸酯、环己基异氰酸酯或甲磺酸酐中的至少一种。

46、进一步的，上述第二种csf1r抑制剂的制备方法中，步骤c中的4-(4-叔丁氧羰基哌嗪)苯胺可以替换成4-(4-叔丁氧羰基哌啶)苯胺、tert-butyl4-(4-amino-2-trifluorophenyl)piperazine-1-carboxylate或tert-butyl4-(4-amino-2-fluorophenyl)piperazine-1-carboxylate中的至少一种。

47、进一步的，本发明还提供了一种上述新型csf1r抑制剂及其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物、异构体、酯、酸、代谢物，或其前药，药物组合物在制备药物中的用途。

48、其中，所述药物为csf1r抑制剂。

49、进一步的，所述药物为预防或治疗csf1r激酶介导的疾病的药物。

50、更进一步的，所述csf1r激酶介导的疾病包括细胞增殖疾病、多谷氨酰胺疾病、神经退行性疾病、自身免疫疾病、糖尿病、血液疾病、炎性疾病、心血管疾病、动脉粥样硬化或感染的炎性后遗症中。

51、进一步的，所述的细胞增殖疾病为癌症或银屑病；所述的多谷氨酰胺疾病为亨廷顿病；所述的神经退行性疾病为阿尔茨海默病；所述的自身免疫疾病为类风湿性关节炎。

52、本发明的有益效果：本发明提供了一系列化合物、含有这些化合物的组合物、其制备方法及其在药品中作为csf-1r抑制剂治疗csf-1r激酶介导的疾病和病症中用途。本发明为预防或治疗疗csf-1r激酶介导的疾病提供了新的药物选择。