一种三(3-羟基丙基)膦的纯化方法与流程

本发明涉及产品纯化，尤其涉及一种利用单分散聚苯乙烯微球进行三(3-羟基丙基)膦的纯化方法。

背景技术：

1、三(3-羟基丙基)膦是一种重要的精细有机磷化工产品，同时也是一种重要的分子生物学巯基还原试剂，还原性强于二硫苏糖醇(dtt)；三(3-羟基丙基)膦还可以用于固定化金属亲和色谱，而且不会还原涉及的金属。三(3-羟基丙基)膦性质活泼，遇到羟基化合物会发生氧化还原反应，导致自身变性，还可与盐酸、三氟乙酸等物质成盐，导致色谱检测器检测不出。

2、三(3-羟基丙基)膦，thpp，化学式为c9h21o3p，分子量为208.23，结构式如下所示，

3、

4、目前，三(3-羟基丙基)膦的色谱纯化方法鲜有报道，主要因为色谱纯化常用硅胶或者c18填料充当层析介质，从而导致了三(3-羟基丙基)膦与硅羟基发生氧化还原反应，导致了自身的变性，影响了纯化效果和回收率。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种三(3-羟基丙基)膦的纯化方法，采用单分散聚苯乙烯微球作为色谱柱的层析填料对三(3-羟基丙基)膦进行柱层析，柱床不会随着流动相的变化而变化，且能够有效的将三(3-羟基丙基)膦吸附在色谱柱上，并确保三(3-羟基丙基)膦不被氧化，从而达到高载量和高回收率。

2、为达到上述目的，本发明采用的技术方案是：一种三(3-羟基丙基)膦的纯化方法，包括如下步骤：

3、s1)制备单分散聚苯乙烯微球；

4、s2)将s1制备的单分散聚苯乙烯微球作为层析介质填充至色谱柱中；

5、s3)将含有三(3-羟基丙基)膦的待分离样品缓慢流过色谱柱，再用纯水淋洗色谱柱；

6、s4)将含有有机溶剂的水溶液洗脱色谱柱，得到纯化的三(3-羟基丙基)膦。

7、作为进一步的优化，s1中的单分散聚苯乙烯微球的制备方法包括如下步骤：

8、s11)将单分散聚苯乙烯种子悬浮在含有胶体保护剂的水溶液中，形成种子悬浮液；

9、s12)将苯乙烯、二乙烯基苯和烷基苯混合在含有胶体保护剂的水溶液中，形成单体悬浮液；

10、s13)将过氧化苯甲酰混合在含有胶体保护剂的水溶液中，形成引发剂悬浮液；

11、s14)将单体悬浮液和引发剂悬浮液分别加入种子悬浮液中，恒温聚合反应，制得单分散聚苯乙烯微球。

12、作为进一步的优化，s11中所述胶体保护剂为羧甲基纤维素、聚乙烯醇或聚乙烯吡咯烷酮中的一种或多种。

13、作为进一步的优化，s12中所述烷基苯包括甲苯、二甲苯或乙苯中的一种或多种。

14、作为进一步的优化，s14中的加入速率为8-10ml/min，反应温度为70-85℃。

15、作为进一步的优化，所述单分散聚苯乙烯微球的粒径为30-40um，cv(coefficientof variation)为2.5-3％

16、作为进一步的优化，所述单分散聚苯乙烯微球的孔体积为1.5-2.5ml/g，比表面积为850-1000m2/g。

17、作为进一步的优化，s2中采用一根10×300mm的一端可调玻璃柱管，以单分散聚苯乙烯微球为层析介质装柱，柱高250mm，柱体积为20ml。

18、作为进一步的优化，s4中有机溶剂包括乙腈、四氢呋喃和n,n-二甲基甲酰胺中的一种或多种。

19、作为进一步的优化，s4中有机溶剂的质量分数为5-30％。

20、作为进一步的优化，s3中的三(3-羟基丙基)膦的待分离样品的纯度小于60％，s4中的纯化的三(3-羟基丙基)膦的纯度大于80％。

21、本发明相较于现有技术的有益效果为：

22、1.本发明在纯化三(3-羟基丙基)膦的过程中，采用单分散聚苯乙烯微球作为色谱柱的层析填料进行柱层析，柱床不会随着流动相的变化而变化，且利用其微球的表面和孔结构的特殊设计，不但能够有效的将三(3-羟基丙基)膦吸附在色谱柱上，而且确保了三(3-羟基丙基)膦不被氧化，从而达到高载量和高回收率；

23、2.本发明采用单分散聚苯乙烯微球做填料，可耐酸、耐碱、耐有机溶剂，因此可以用高强度的酸、碱或有机溶剂清洗色谱柱。

技术特征：

1.一种三(3-羟基丙基)膦的纯化方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的三(3-羟基丙基)膦的纯化方法，其特征在于，s1中的单分散聚苯乙烯微球的制备方法包括如下步骤：

3.根据权利要求2所述的三(3-羟基丙基)膦的纯化方法，其特征在于，s11中所述胶体保护剂为羧甲基纤维素、聚乙烯醇或聚乙烯吡咯烷酮中的一种或多种。

4.根据权利要求2所述的三(3-羟基丙基)膦的纯化方法，其特征在于，s12中所述烷基苯包括甲苯、二甲苯或乙苯中的一种或多种。

5.根据权利要求2所述的三(3-羟基丙基)膦的纯化方法，其特征在于，s14中的加入速率为8-10ml/min，反应温度为70-85℃。

6.根据权利要求1至5任意一项所述的三(3-羟基丙基)膦的纯化方法，其特征在于，所述单分散聚苯乙烯微球的粒径为30-40μm，孔体积为1.5-2.5ml/g，比表面积为850-1000m2/g。

7.根据权利要求1所述的三(3-羟基丙基)膦的纯化方法，其特征在于，s2中采用一根10×300mm的一端可调玻璃柱管，以单分散聚苯乙烯微球为层析介质装柱，柱高250mm，柱体积为20ml。

8.根据权利要求1所述的三(3-羟基丙基)膦的纯化方法，其特征在于，s4中有机溶剂包括乙腈、四氢呋喃和n,n-二甲基甲酰胺中的一种或多种。

9.根据权利要求1或8所述的三(3-羟基丙基)膦的纯化方法，其特征在于，s4中有机溶剂的质量分数为5-30％。

10.根据权利要求1所述的三(3-羟基丙基)膦的纯化方法，其特征在于，s3中的三(3-羟基丙基)膦的待分离样品的纯度小于60％，s4中的纯化的三(3-羟基丙基)膦的纯度大于80％。

技术总结
本发明公开了一种三(3‑羟基丙基)膦的纯化方法，包括步骤：S1)制备单分散聚苯乙烯微球；S2)将S1制备的单分散聚苯乙烯微球作为层析介质填充至色谱柱中；S3)将含有三(3‑羟基丙基)膦的待分离样品缓慢流过色谱柱，再用纯水淋洗色谱柱；S4)将含有有机溶剂的水溶液洗脱色谱柱，得到纯化的三(3‑羟基丙基)膦。本发明采用单分散聚苯乙烯微球作为色谱柱的层析填料对三(3‑羟基丙基)膦进行柱层析，柱床不会随着流动相的变化而变化，且能够有效的将三(3‑羟基丙基)膦吸附在色谱柱上，并确保三(3‑羟基丙基)膦不被氧化，从而达到高载量和高回收率。

技术研发人员：李雪,阳承利,沈怡,黄功卿
受保护的技术使用者：苏州知益微球科技有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/4/17