1.一种基于高通量测序的鉴定碱基特异性调控元件的建库方法,其特征在于,包括:
2.根据权利要求1所述的基于高通量测序的鉴定碱基特异性调控元件的建库方方法,其特征在于,所述构建候选易感snp质粒文库,包括:
3.根据权利要求2所述的基于高通量测序的鉴定碱基特异性调控元件的建库方方法,其特征在于,所述由包含所有候选snp不同等位基因型的单链dna文库得到双链dna文库,组装双链dna文库与酶切后的报告载体,构建候选易感snp质粒文库;具体包括:
4.根据权利要求3所述的基于高通量测序的鉴定碱基特异性调控元件的建库方方法,其特征在于,所述利用精准引物池合成方法之前还包括:
5.根据权利要求1所述的基于高通量测序的鉴定碱基特异性调控元件的建库方方法,其特征在于,所述对所述候选易感snp质粒文库进行pcr扩增、纯化后构建输入型dna测序文库,包括:
6.根据权利要求5所述的基于高通量测序的鉴定碱基特异性调控元件的建库方方法,其特征在于,所述第三引物为特异性分子标签引物,由如下3部分组成:
7.根据权利要求5所述的基于高通量测序的鉴定碱基特异性调控元件的建库方方法,其特征在于,所述使用第三引物对候选易感snp质粒文库进行一步法pcr扩增,纯化后获得带有特异性分子标签的dna文库,具体包括:
8.根据权利要求1所述的基于高通量测序的鉴定碱基特异性调控元件的建库方方法,其特征在于,所述转染质粒文库至靶细胞,获得rna表达文库;进行反转录、纯化、pcr扩增,构建输出型dna测序文库;包括:
9.根据权利要求1所述的基于高通量测序的鉴定碱基特异性调控元件的建库方方法,其特征在于,所述对输入型dna测序文库和输出型dna测序文库分别添加一步法pcr扩增为不同重复组引入不同的barcode标签序列,包括:
10.根据权利要求9所述的基于高通量测序的鉴定碱基特异性调控元件的建库方方法,其特征在于,所述分别进行末端加a尾及测序接头连接,构建混合样本测序库,包括: