1.一种多重qrt-pcr检测病毒的引物和探针组,其特征在于,用于检测亨尼帕病毒属;所述亨尼帕病毒属包括琅琊病毒layv、墨江病毒mojv、尼帕病毒niv和雪松病毒cedv;
2.根据权利要求1所述的引物和探针组,其特征在于,所述探针的5’端修饰有报告基团;四种探针采用不同的报告基团修饰;可选的,所述报告基团包括fam、hex、vic、rox或cy5。
3.根据权利要求1或2所述的引物和探针组,其特征在于,所述探针的3’端修饰有淬灭基团;可选的,所述淬灭基团为bhq1和bhq2。
4.根据权利要求1~3任一所述的引物和探针组,其特征在于,seq id no.3所示核苷酸序列与seq id no.9所示核苷酸序列采用淬灭基团bhq1修饰,seq id no.6所示核苷酸序列与seq id no.12所示核苷酸序列采用淬灭基团bhq2修饰。
5.一种检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒中含有权利要求1~4任一所述多重qrt-pcr检测病毒的引物和探针组。
6.根据权利要求5所述的检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒中还含有四种亨尼帕病毒的阳性对照和阴性对照。
7.一种检测四种亨尼帕病毒的方法,所述方法不以疾病的诊断为目的,其特征在于,所述方法为利用权利要求1~4任一所述多重qrt-pcr检测病毒的引物和探针组,或权利要求5或6所述试剂盒进行四种亨尼帕病毒的检测,所述四种亨尼帕病毒为layv、mojv、niv、cedv。
8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:
9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,s2中所述实时荧光定量pcr的扩增体系为taq酶0.5μl、逆转录酶0.5μl、四种探针各0.25μl和四对上下游引物各0.5μl、pcrbuffer12.5μl和核酸模板4μl。
10.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,s2中所述实时荧光定量pcr的反应程序为45℃反转录5min,95℃预变性10s;95℃5s和60℃30s;40个扩增循环,60℃退火延伸。