一种多花黄精叶多糖及其制备方法和应用

本发明涉及多花黄精叶多糖提取，特别是涉及一种多花黄精叶多糖及其制备方法和应用。

背景技术：

1、多花黄精作为药食同源的中药，具有补脾益气，滋肾润肺等功效。多花黄精中含有多种生物活性成分，如多糖、甾体皂苷、黄酮等。多糖作为多花黄精中主要药效成分之一，具有降血脂血糖、增强免疫力、抗氧化、抗肿瘤等多种药理作用。近年来，黄精野生资源被过度挖掘，各主产区资源普遍锐减，黄精的需求量日益增大。

2、目前，大多数的研究围绕黄精根部展开，有关黄精叶的分离纯化和活性方面的相关报道较少，且分离方法复杂，具有较多杂质。

技术实现思路

1、为了解决上述问题，本发明提供了一种多花黄精叶多糖及其制备方法和应用。本发明提供的方法工艺简单且稳定，制备的多花黄精叶多糖纯度高，是一种均一多糖，具有促glp-1分泌活性的作用。

2、为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

3、本发明提供了一种多花黄精叶多糖的制备方法，包括以下步骤：

4、将多花黄精叶依次进行乙醇脱脂和水提，得到水提液；

5、将所述水提液和α-淀粉酶混合，进行第一酶解，醇沉，得到醇沉物；

6、将所述醇沉物复溶，得到复溶液；将所述复溶液和木瓜蛋白酶混合，进行第二酶解，得到上清液；

7、利用sevag法对所述上清液进行脱蛋白后透析，截留分子量大于3500da的组分，得到多花黄精叶粗多糖；

8、将所述多花黄精叶粗多糖经阴离子交换柱进行初步分离，采用超纯水洗脱，得到第一洗脱液；

9、将所述第一洗脱液经葡聚糖凝胶柱进行纯化，采用超纯水洗脱，得到含有多花黄精叶多糖的洗脱液。

10、优选的，所述乙醇脱脂中所使用的乙醇溶液的体积浓度为60％～90％，所述多花黄精叶和所述乙醇溶液的质量体积比为1g：5～15ml。

11、优选的，所述水提的温度为60～100℃，次数为1～4次，每次水提的时间为1～3h。

12、优选的，所述多花黄精叶和α-淀粉酶的质量体积比为0.5～5kg：1ml，所述α-淀粉酶酶活为46u/ml；所述第一酶解的温度为30～70℃，时间为0.5～10h。

13、优选的，所述醇沉中所使用的乙醇溶液的体积浓度为50％～90％。

14、优选的，所述复溶液和木瓜蛋白酶的体积质量比为1ml：1～10mg，所述木瓜蛋白酶的酶活为≥800u/mg；所述第二酶解的温度为30～70℃，时间为0.5～10h。

15、优选的，所述脱蛋白的次数为5～10次。

16、本发明提供了上述技术方案所述制备方法制备得到的多花黄精叶多糖，所述多花黄精叶多糖的分子量为3.5×103～5×104da，包括甘露糖和葡萄糖；所述甘露糖和葡萄糖的摩尔比为97.55：2.02。

17、本发明提供了上述技术方案所述的多花黄精叶多糖在制备促进glp-1分泌的药物中的应用。

18、本发明提供了上述技术方案所述的多花黄精叶多糖在制备降血糖药物中的应用。

19、有益效果：

20、本发明先利用乙醇溶液对多花黄精叶进行脱脂，然后通过水提得到含有多花黄精叶多糖的水提液，利用α-淀粉酶除去水提液中的淀粉后进行醇沉，得到含有蛋白和多花黄精叶粗多糖的醇沉物；再利用木瓜蛋白酶结合sevag法去除醇沉物中的蛋白，不仅可以减少sevag法除蛋白的次数，而且提高了多糖的得率；最后经阴离子交换柱洗脱分离和葡聚糖凝胶柱进行纯化，得到一种纯度较高的多花黄精叶均一多糖，首次解析了多糖结构主要由t-man(p),4-man(p),4-glc(p)三种糖苷键以摩尔比为7.663：89.958：2.379组成。本发明提供的制备方法具有工艺简单且稳定的优势，制备的多花黄精叶多糖纯度高，是一种均一多糖，具有促glp-1分泌活性的作用，提高了多花黄精叶的利用率。

技术特征：

1.一种多花黄精叶多糖的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述乙醇脱脂中所使用的乙醇溶液的体积浓度为60％～90％，所述多花黄精叶和所述乙醇溶液的质量体积比为1g：5～15ml。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述水提的温度为60～100℃，次数为1～4次，每次水提的时间为1～3h。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述多花黄精叶和α-淀粉酶的质量体积比为0.5～5kg：1ml，所述α-淀粉酶酶活为46u/ml；所述第一酶解的温度为30～70℃，时间为0.5～10h。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述醇沉中所使用的乙醇溶液的体积浓度为50％～90％。

6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述复溶液和木瓜蛋白酶的体积质量比为1ml：1～10mg，所述木瓜蛋白酶的酶活为≥800u/mg；所述第二酶解的温度为30～70℃，时间为0.5～10h。

7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述脱蛋白的次数为5～10次。

8.权利要求1～7任一项所述制备方法制备得到的多花黄精叶多糖，所述多花黄精叶多糖的分子量为3.5×103～5×104da，包括甘露糖和葡萄糖；所述甘露糖和葡萄糖的摩尔比为97.55：2.02。

9.权利要求8所述的多花黄精叶多糖在制备促进glp-1分泌的药物中的应用。

10.权利要求8所述的多花黄精叶多糖在制备降血糖药物中的应用。

技术总结
本发明涉及多花黄精叶多糖提取技术领域，特别是涉及一种多花黄精叶多糖及其制备方法和应用。本发明提供的制备方法具有工艺简单且稳定的优势，制备的多花黄精叶多糖纯度高，是一种均一多糖，具有促GLP‑1分泌活性的作用，提高了多花黄精叶的利用率。

技术研发人员：解松子,罗建平,秦亚敏,曹鹏,王永健,鲍倩雯
受保护的技术使用者：安徽中医药大学
技术研发日：
技术公布日：2024/4/7