一种提高免疫力的益生菌组合物以及在治疗疾病中的应用的制作方法

本技术涉及生物领域，具体的涉及一种提高免疫力的益生菌组合物以及在治疗疾病中的应用。

背景技术：

1、炎性肠病(inflammatory bowel disease，ibd)是一组病因尚未阐明的慢性非特异性肠道炎性疾病，包括溃疡性结肠炎(uc)和克罗恩病(cd)。uc主要为局限于黏膜和黏膜下层的连续性炎性反应，病变多自直肠开始，可累及全结肠甚至末段回肠；cd则为节段性的肉芽肿性炎性反应，可累及消化道任何部位，但多常见于末段回肠和邻近结肠。ibd的传统治疗方法包括氨基水杨酸制剂、糖皮质激素、免疫抑制剂、生物制剂等，都可抑制肠道炎性反应，但存在价格高、安全性低、不良反应明显、治疗作用有限等缺点。

2、益生菌种类繁多，人体内就有超过400种。从目前已报道的益生菌来看，大致可分为以下5类：乳杆菌类，如干酪乳杆菌、植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌等；双歧杆菌类，如长双歧杆菌、短双歧杆菌等；芽孢杆菌类，如布拉地芽孢杆菌、丁酸梭状芽孢杆菌等；链球菌属:如嗜热链球菌；肠球菌属，如耐久肠球菌、粪肠球菌等。已有大量研究证实，益生菌在缓解或治疗ibd中起到重要作用。有研究表明，益生菌可提升肠道黏膜自身预防机制，且可拮抗致病菌的致病作用，还可以控制炎性因子的释放及短时间内恢复肠道菌群。肠道菌群失调是促进ibd发生与发展的一个重要因素，研究发现，益生菌能够通过toll样受体促进th1细胞分化，进而改变黏膜免疫系统，增强肠道保护功能，增加肠道菌群多样性。有研究表明，植物乳杆菌q7的细胞外囊泡(ev)可调节肠道微生物群，增加肠道中乳酸杆菌、双歧杆菌等有益细菌的丰度并降低变形杆菌等有害细菌的丰度。益生菌还可通过竞争营养、拮抗等方式与肠道微生物群相互作用，降低致病菌活性，以及产生某些抑菌性物质，如有机酸，直接抑制病原菌的生长。上述研究表明，益生菌可以通过调节肠道菌群影响ibd的发生和发展。

3、类似ibd的全身性炎性疾病患者往往伴有全身虚弱等症状，这可能是由于大脑功能的改变，而益生菌可以通过神经、激素和免疫系统的变化改善“微生物-脑-肠”轴的功能，进而改善上述症状。外周tnf-a可以诱导小胶质细胞激活和募集单核细胞到大脑，这是影响炎症相关的疾病行为发展的关键环节，而使用混合益生菌可以降低动物模型外周血的tnf-a水平，提示益生菌可调节外周炎症(结肠炎)相关的大脑功能障碍和行为改变。越来越多的研究证实益生菌在调节肠道菌群、调节肠道免疫，减轻肠道炎性反应、增加机体抗氧化能力、降低肠道通透性、增强肠道屏障功能等方面发挥重要作用，益生菌或可成为缓解或治疗ibd的新手段。但目前仍有很多问题需要解决，如益生菌的给药剂量、给药间隔及疗程等，且其不良反应尚存在争议，未来需要更多的临床试验进行进一步探究。

4、此外，目前临床上治疗炎症性肠病还有其他常用的三类药：水杨酸类、类固醇类和免疫抑制剂，对溃疡性结肠炎和克罗恩病的缓解率分别为80％和70％左右，且停药后易复发。研究发现，溃疡性结肠炎患者中gap-43没有变化，因为gap-43是与神经再生相关的，可以反映神经元再生的发生，由此推断溃疡性结肠炎患者sp的升高与肠神经元的再生没有明显关系，亦即溃疡性结肠炎中没有明显的肠神经元再生，而sp的升高可能与sp的合成增多有关。进一步的，多肽类药物也有用于炎症性肠病的治疗，比如铃蟾肽是一种含有14个氨基酸残基的生物活性肽。铃蟾肽能刺激其他几种胃肠激素的释放,调节胃肠蠕动,刺激消化道正常粘膜组织的生长,提高致死性小肠结肠炎动物的存活率。但是该多肽并非具有特异性的治疗方向，效果也有待进一步的提高。

5、总之，目前还没有疗效较好，性价比更高的较好的用于治疗益生菌组合物的出现。

技术实现思路

1、本发明克服现有技术的缺陷，提供了一种特异性拥有治疗炎症性肠病同时提高免疫力的益生菌组合物。

2、所述的益生菌包括鼠李糖乳杆菌菌株和瑞士乳杆菌前者是一种乳杆菌，它于1976年首次从乳制品中分离出来，鼠李糖乳杆菌rosell11经常与瑞士乳杆菌r52一起研究，通常被称为“lacidofil”组合。这两种菌株都列在efsa的合格安全菌株(qps)列表中。所述菌株具有提高免疫功能的功能，对于改善肠道特性也有一定功效。二个菌株都是现有技术。

3、进一步的，所述的益生菌还包含来自大江生医股份有限公司的加氏乳杆菌tci515，该菌株是保藏在dsmz德国微生物保藏中心(german collection ofmicroorganisms and cell cultures，dsmz)的dsm33105菌株。

4、所述的益生菌组合物是由提高免疫力的益生菌和治疗炎症性肠病的多肽。

5、进一步的，所述的多肽是分离自苦参。

6、苦参是一种中药材，具有抗菌和抗炎特性。被广泛应用于中医治疗肠炎等疾病。苦参的提取物被用于制成草药茶或药膏，可以减轻肠炎引起的炎症和腹泻。发明人将苦参粉碎后通过胰酶水解后用膜过滤去掉固体组分，通过超滤截留高活性分子量小玉3kda的渗透物，采用rp-hplc分离抗炎活性多肽，经过分离的hplc组分再经ls-ms/ms鉴定获得了活性最高的抗炎肽sf-r-4，其氨基酸序列如seq id no：1所示。

7、本发明提供了一种提高免疫力治疗炎症性肠病的益生菌组合物，所述益生菌组合物是按照加氏乳杆菌tci515、鼠李糖乳杆菌菌株和瑞士乳杆菌的比例分别为2:1:1的重量比例来制备获得益生菌组分，同时按照益生菌和抗炎肽sf-r-4质量比为95:5的比例添加多肽，最终制备获得益生菌组合物。

8、进一步的，本发明还提供了抗炎肽sf-r-4在制备用于治疗炎症性肠病的药物中用途。

9、进一步的，本发明还提供了含有抗炎肽sf-r-4的益生菌组合物在制备用于提高免疫力治疗炎症性肠病的药剂中的用途。所述的所述益生菌组合物是按照加氏乳杆菌tci515、鼠李糖乳杆菌菌株和瑞士乳杆菌的比例分别为2:1:1的重量比例来制备获得益生菌组分，同时按照益生菌和抗炎肽sf-r-4质量比为95:5的比例添加多肽，最终制备获得益生菌组合物。

10、进一步的，本发明的药物或者组合物中还含有其他药学上可接受的载体。

11、适合的药学上可接受的赋形剂的实例包括一种或多种聚合物、润湿剂或表面活性剂、ph调节剂、等渗调节剂、防腐剂、缓冲剂以及螯合剂、或它们的任意组合。

12、适合的药学上可接受的润湿剂或表面活性剂的实例包括但不限于两性、非离子型、阳离子型或阴离子型分子。适合的表面活性剂包括但不限于聚山梨酯、十二烷基硫酸钠(月桂基硫酸钠)、十二烷基二甲基氧化胺、多库酯钠、十六烷基三甲基溴化铵(ctab)、聚乙氧基化醇、聚氧乙烯脱水山梨醇、辛苯昔醇、n,n-二甲基十二烷基胺-n-氧化物、十六烷基三甲基溴化铵、聚氧乙烯(10)月桂醚、表面活性剂(由月桂醇、鲸蜡醇、硬脂醇和油醇衍生的植物油系脂肪醇聚氧乙烯醚)、胆盐(例如脱氧胆酸钠和胆酸钠)、聚氧乙烯蓖麻油、壬基酚乙氧基化物、环糊精、卵磷脂、甲苄索氯铵、羧酸盐、磺酸盐、石油磺酸盐、烷基苯磺酸盐、萘磺酸盐、烯烃磺酸盐、烷基硫酸盐、硫酸盐、硫酸化天然油和脂肪、硫酸化酯、硫酸化烷醇酰胺、烷基酚(乙氧基化和硫酸化的)、乙氧基化脂肪醇、聚氧乙烯表面活性剂、羧酸酯、聚乙二醇酯、脱水山梨醇酯及其乙氧基化衍生物、脂肪酸乙二醇酯、羧酰胺、单烷醇胺缩合物、聚氧乙烯脂肪酸酰胺、季铵盐、具有酰胺键的胺、聚氧乙烯烷基胺和聚氧乙烯脂环族胺、n,n,n,n-四取代乙二胺、2-烷基-1-羟乙基-2-咪唑啉、n-椰油基-3-氨基丙酸/钠盐、n-牛脂基-3-亚氨基二丙酸二钠盐、n-羧甲基-n,n-二甲基-n-9-十八烯基氢氧化铵、n-椰油酰胺乙基-n-羟乙基甘氨酸钠盐等、聚氧乙烯、脱水山梨醇单月桂酸酯和硬脂酸酯、(聚乙氧基化蓖麻油)、(环氧乙烷/12-羟基硬脂酸)、聚山梨酯、四丁酚醛，以及它们的任意组合。优选的药学上可接受的表面活性剂包括四丁酚醛和(脱水山梨醇单油酸酯)或其混合物。

13、有益效果

14、本发明提供了含有抗炎肽sf-r-4的益生菌组合物在制备用于提高免疫力治疗炎症性肠病的药剂中的用途。所述的所述益生菌组合物是由加氏乳杆菌tci515、鼠李糖乳杆菌菌株和瑞士乳杆菌和抗炎肽sf-r-4组成。本发明的益生菌组合物能够有效的降低溃疡性结肠炎小鼠的dai积分和组织学评分，具有较好的治疗效果。