本发明属于微生物,具体涉及一种红色毛癣菌培养基及其制备方法与应用。
背景技术:
1、目前,红色毛癣菌是引起人浅表真菌病的最常见病原菌,可在人与人之间传播。红色毛癣菌可以侵犯人的皮肤、指(趾)甲,轻则引起瘙痒,脱屑等不适症状,重则可引起肉芽肿等严重的皮肤病。对于红色毛癣菌的研究越来越引起国内外学者的关注。
2、红色毛癣菌是一种丝状真菌,由匍匐菌丝、气生菌丝、小分生孢子和大分生孢子组成。小分生孢子易见,大分子孢子偶见。红色毛癣菌的小分生孢子是红色毛癣菌无性繁殖产生的子代,能够在环境中长期存活。红色毛癣菌的研究实验几乎都先基于收集足量小分生孢子后开展。
3、然而,红色毛癣菌的产孢能力不稳定,有很大一部分红色毛癣菌的产孢能力相对较弱,这就限制了对于红色毛癣菌的研究,尤其是需要进行孢子定量等的相关实验。国内外学者一直在进行增加红色毛癣菌的产孢量的研究,但是产孢能力的提升并不显著,或者需要借助特殊设备,这无疑增加了临床研究的成本和基层医院普及的困难性。
4、因此,开发新的便捷的培养基用于促进红色毛癣菌产孢无疑是迫切的。
技术实现思路
1、发明目的:本发明目的在于针对现有技术的不足,提供一种红色毛癣菌培养基及其制备方法与应用。本发明的培养基可使红色毛癣菌在较短时间内进行大量产孢,有利于利用红色毛癣菌孢子开展药物敏感性检测实验,快速提供药物敏感性检测结果。同时促进红色毛癣菌孢子的产孢也有利于应用红色毛癣菌开展其他科学研究。
2、本发明研究的产孢能力,主要针对红色毛癣菌产小分生孢子的能力。
3、技术方案:本发明的目的通过下述技术方案实现:
4、本发明提供了一种红色毛癣菌培养基,其由水,酵母提取物1.25-10g/l,葡萄糖5-40g/l,znso4·7h2o 5.5-44mg/l,h3bo3 0.275-22mg/l,mncl2·4h2o 12.5 -100mg/l,feso4·7h2o 12.5-100mg/l,cocl2·5h2o 0.4-3.2mg/l,cuso4 0.4-3.2mg/l,
5、(nh4)6mo7o24·4h2o 0.275-22mg/l,edta 12.5-100mg/l,琼脂10-20g/l组成。
6、本发明还提供了所述的红色毛癣菌培养基的制备方法,将其由水,酵母提取物1.25-10g/l,葡萄糖5-40g/l,znso4·7h2o 5.5-44mg/l,h3bo3 0.275-22mg/l,mncl2·4h2o12.5 -100mg/l,feso4·7h2o 12.5-100mg/l,cocl2·5h2o 0.4-3.2mg/l,cuso4 0.4-3.2g/l,(nh4)6mo7o24·4h2o 0.275-22mg/l,edta 12.5-100mg/l混合,调节ph,加琼脂10-20g/l,高压灭菌,配制固体平板,即得所述培养基。
7、优选地,所述调节ph的方式为采用naoh溶液将ph调至6.5-7.0。
8、优选地,所述高压灭菌的条件为:121℃高压蒸汽灭菌25min。
9、本发明还提供了所述的红色毛癣菌培养基在红色毛癣菌培养中的应用。
10、所述红色毛癣菌培养基促进红色毛癣菌产孢。
11、本发明一种优选地实施方式是,将红色毛癣菌接种在所述的培养基上,30℃培养7-10天。相较于传统的pda培养基或者oa培养基,产孢能力显著提升。
12、本发明还提供了所述的红色毛癣菌培养基在抗真菌药物敏感性检测中的应用。
13、本发明提供的培养基具有显著提升红色毛癣菌产孢的能力,可以有效解决红色毛癣菌临床分离株约一半产孢能力不足,导致开展抗真菌药物敏感性检测滞后的情况。同时,产孢能力的提升为今后开展红色毛癣菌的孢子相关的研究提供了便捷。
14、本发明还提供了所述的红色毛癣菌培养基在红色毛癣菌动物模型实验、红色毛癣菌基因操作实验、红色毛癣菌与细胞共培养实验、红色毛癣菌生理生化实验中的应用。
15、有益效果:
16、(1)本发明培养基可使红色毛癣菌在较短时间内进行大量产孢。红色毛癣菌通过对孢子计数定量后开展抗真菌药物敏感性检测,缩短红色毛癣菌的产孢培养时间,可以缩短临床上药物敏感性检测报告的周期,为临床合理用药赢得宝贵时间。
17、(2)同时,开展红色毛癣菌的致病机制等科学研究也同样依赖红色毛癣菌孢子。如体外红色毛癣菌感染模型-真菌与细胞共培养、体内红色毛癣菌感染模型-真菌感染动物等这些实验都依赖于红色毛癣菌的孢子作为实验起始样本。因此,本发明培养基提升了红色毛癣菌的产孢能力,有利于开展红色毛癣菌的科学研究。
1.一种红色毛癣菌培养基,其特征在于,其由水,酵母提取物1.25-10g/l,葡萄糖5-40g/l,znso4·7h2o 5.5-44mg/l,h3bo3 0.275-22mg/l,mncl2·4h2o 12.5-100mg/l,feso4·7h2o12.5-100mg/l,cocl2·5h2o 0.4-3.2mg/l,cuso4 0.4-3.2mg/l,(nh4)6mo7o24·4h2o0.275-22mg/l,edta 12.5-100mg/l,琼脂10-20g/l组成。
2.根据权利要求1所述的红色毛癣菌培养基的制备方法,其特征在于,其由水,酵母提取物1.25-10g/l,葡萄糖5-40g/l,znso4·7h2o 5.5-44mg/l,h3bo3 0.275-22mg/l,mncl2·4h2o 12.5-100mg/l,feso4·7h2o 12.5-100mg/l,cocl2·5h2o 0.4-3.2mg/l,cuso40.4-3.2mg/l,(nh4)6mo7o24·4h2o 0.275-22mg/l,edta 12.5-100mg/l混合,调节ph,加琼脂10-20g/l,高压灭菌,配制固体平板,即得所述培养基。
3.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述调节ph的方式为采用naoh溶液将ph调至6.5-7.0。
4.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述高压灭菌的条件为:121℃高压蒸汽灭菌25min。
5.权利要求1所述的红色毛癣菌培养基在红色毛癣菌培养中的应用。
6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述培养基促进红色毛癣菌产孢。
7.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,将红色毛癣菌接种在权利要求1所述的培养基上,30℃培养7-10天。
8.权利要求1所述的红色毛癣菌培养基在抗真菌药物敏感性检测中的应用。
9.权利要求1所述的红色毛癣菌培养基在红色毛癣菌动物模型实验、红色毛癣菌基因操作实验、红色毛癣菌与细胞共培养实验、红色毛癣菌生理生化实验中的应用。