1.一种适应肾盂肾炎检测的针对upec毒力基因的引物和探针,至少包括如下任一:
2.如权利要求1所述的适应肾盂肾炎检测的针对upec毒力基因的引物和探针,其特征在于,还包括针对内参基因β-actin的引物和探针,其至少包括如下任一:引物序列如seqid no.16~17所示、探针序列如seq id no.18所示。
3.如权利要求1或2所述的适应肾盂肾炎检测的针对upec毒力基因的引物和探针,其特征在于,所述探针的5’端标记有荧光基团。
4.如权利要求1或2所述的适应肾盂肾炎检测的针对upec毒力基因的引物和探针,其特征在于,所述探针的3’端标记有淬灭基团。
5.多重荧光定量pcr检测试剂,至少包括如权利要求1-4任一所述的适应肾盂肾炎检测的针对upec毒力基因的引物和探针。
6.如权利要求5所述的多重荧光定量pcr检测试剂,其特征在于,所述试剂还包括扩增缓冲液、dntp、dutp、mgcl2、taq聚合酶、ung酶、适量的核酸dna和ddh2o。
7.如权利要求6所述的多重荧光定量pcr检测试剂,其特征在于,所述试剂包括,以体积为50μl计:1.0mmol/l-4.5mmol/l的mgcl2,0.1mmol/l-0.4mmol/l的dntp,如权利要求1-4任一所述的引物和探针中满足每条引物浓度为0.1-1μm和每条探针浓度为0.1-0.5μm,0.5u-2.5u的taq聚合酶,0.1u-0.5u的ung酶,0.1mmol/l-0.3mmol/l的dutp,25μl的2×扩增缓冲液,以及适量的模板dna,余量用ddh2o补齐。
8.如权利要求7所述的荧光定量pcr检测试剂,其特征在于,所述检测试剂的组成包括,以体积为50μl计:2.5mmol/l的mgcl2,0.2mmol/l的dntp,引物和探针组fimh、papg ii、cnf1、hlya、aer以及β-actin的加量分别是0.5μl、0.5μl、0.67μl、0.5μl、0.67μl和0.5μl,2.0u的taq聚合酶,0.2u的ung酶,0.2mmol/l的dutp,25μl的2×扩增缓冲液,以及10μl的模板dna,余量为ddh2o。
9.如权利要求8所述的多重荧光定量pcr检测试剂,其特征在于,所述试剂中:用于检测upec毒力基因fimh的引物和探针、用于检测upec毒力基因papg ii的引物和探针、用于检测upec毒力基因cnf1的引物和探针、用于检测upec毒力基因hlya的引物和探针、用于检测upec毒力基因aer的引物和探针以及用于检测β-actin基因的引物和探针,每一个基因的两对引物和一条探针的摩尔浓度比均满足:2:2:1。
10.如权利要求8所述的荧光定量pcr检测试剂,其特征在于,所述检测试剂的pcr反应的程序为:
11.试剂盒,包括如权利要求1-4任一所述的适应肾盂肾炎检测的针对upec毒力基因的引物和探针或如权利要求5-9任一所述的多重荧光定量pcr检测试剂。