一种抗微纳米气泡大肠杆菌的构建及其在固碳合成丁二酸中的应用

文档序号:41738915发布日期:2025-04-25 17:14阅读:52来源:国知局
技术特征:

1.一种抗微纳米气泡大肠杆菌在固碳合成丁二酸中的应用;

2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述的微纳米气泡的直径为100nm-50μm。

3.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述的csga基因来源于大肠杆菌。

4.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述的抗微纳米气泡大肠杆菌,其出发菌为产丁二酸的大肠杆菌。

5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,所述的出发菌为大肠杆菌escherichiacoli ber 208,保藏编号为cctcc no:m 2012351。

6.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述的抗微纳米气泡大肠杆菌按照如下方法构建得到:扩增csga基因,克隆至质粒载体中构建得到重组质粒,导入出发菌中,即得所述的抗微纳米气泡大肠杆菌,命名为escherichia coli ber208-csga。

7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,所述的质粒载体为pdonor、pjn105、pucp20或pherd20t中的任意一种。

8.根据权利要求1-7任意一项所述的应用,其特征在于,所述的抗微纳米气泡大肠杆菌固碳合成丁二酸,按照如下方法进行:将所述的抗微纳米气泡大肠杆菌接种至装有发酵培养基的发酵罐中,使初始od550为0.4-0.6,加入诱导剂,并向发酵罐中通入微纳米气泡形式的co2气体,置换空气完成后,利用微纳米气泡形式的co2气体维持发酵罐内的绝对压力恒定,采用闭气恒压的模式进行发酵,当发酵液中葡萄糖浓度低于1g/l时,停止发酵。

9.根据权利要求8所述的应用,其特征在于,所述的发酵培养基,其配方包括:甜菜碱0.07-0.17g/l,(nh4)2hpo4 2.1-3.1g/l,kcl 0.1-0.2g/l,nh4h2po4 0.82-0.92g/l,mgso40.15-0.24g/l,fecl3 1.1-1.8g/l,cocl2 0.2-0.35g/l,cucl2 0.1-0.2g/l,zncl20.3-0.5g/l,na2moo4 0.4-0.6g/l,mncl2 0.2-0.45g/l,h3bo3 0.07-0.09g/l,葡萄糖60-100g/l;

10.根据权利要求9所述的应用,其特征在于,所述的发酵ph通过流加碱液控制,所述的碱液,为koh水溶液或naoh水溶液,其浓度为5-8mol/l。


技术总结
本发明属于生物工程领域,公开了一种抗微纳米气泡大肠杆菌的构建及其在高效固碳合成丁二酸方面的应用。本发明以产丁二酸的大肠杆菌为出发菌株,扩增并构建淀粉样纤维蛋白(Curli)形成关键基因CsgA的过表达质粒,导入出发菌株获得过表达菌株。本发明构建的抗微纳米气泡大肠杆菌以CO<subgt;2</subgt;微纳米气泡为唯一CO<subgt;2</subgt;供体,在厌氧发酵过程中无需补充任何碳酸盐或碳酸氢盐,细胞对CO<subgt;2</subgt;微纳米气泡体现了优良的抗性,其生长代谢未受到显著抑制,保持了良好的丁二酸生产性能,CsgA的导入使菌体对CO<subgt;2</subgt;气体的实际利用效率大幅提高,有利于降低丁二酸的生产成本并提升其环境效益,具有广泛的社会与经济价值。

技术研发人员:吴昊,徐安明,姜岷,周鑫雨,陈颖,蒋羽佳,章文明
受保护的技术使用者:南京工业大学
技术研发日:
技术公布日:2025/4/24
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