本发明属于免疫治疗，具体涉及一种靶向抑制乳酸化提高nk细胞功能的方法。
背景技术：
1、近年来，免疫治疗在肿瘤治疗领域取得了突破性进展，以免疫检查点抑制剂、car-t细胞疗法、细胞因子疗法及肿瘤疫苗等为代表的治疗策略显著改善了临床疗效。然而，现有疗法仍面临诸多挑战，包括治疗响应率低、耐药性产生、显著毒副作用以及实体瘤治疗受限等问题。
2、肿瘤微环境的特征性代谢重塑是导致免疫抑制的重要因素。为适应缺氧及营养匮乏的恶劣环境，肿瘤细胞通过有氧糖酵解产生大量乳酸。这一代谢产物不仅造成微环境酸化，还可通过乳酸化修饰这一表观遗传调控机制影响肿瘤进展。免疫细胞通过单羧酸转运体mct分子摄入肿瘤微环境中的乳酸，乳酰辅酶a合成酶（acss2），琥珀酰辅酶a合成酶（scs）家族的gtpscs以及乙酰转移酶acat1/2，能够将乳酸催化位为乳酰辅酶a，随后在乳酸化修饰酶p300的催化下，发生乳酸化修饰。乳酸化修饰作为一种新发现的蛋白质翻译后修饰，其底物分子及修饰酶不断被鉴定，已成为肿瘤治疗的新靶点。
3、nk细胞通过多种机制参与抗肿瘤免疫应答，包括细胞因子分泌、抗体依赖性细胞介导的细胞毒性（adcc）效应、树突状细胞（dc）的招募与活化，以及cd8+t细胞的辅助激活。然而，在肿瘤微环境中，nk细胞摄取过量乳酸后，发生乳酸化修饰，进而导致细胞功能受损。目前，如何靶向调控nk细胞的乳酸化修饰以逆转其功能耗竭状态，仍是肿瘤免疫治疗面临的重大科学难题。值得注意的是，针对实体瘤中nk细胞乳酸化修饰的靶向干预策略及其疗效提升，迄今尚未见明确报道。
技术实现思路
1、为了解决肿瘤微环境中nk细胞功能耗竭的问题，本发明提供一种靶向抑制乳酸化提高nk细胞功能的方法。
2、一种靶向抑制乳酸化提高nk细胞功能的方法，所述方法为靶向抑制 nk 细胞乳酸转运载体以及抑制乳酸化过程中的修饰酶；所述修饰酶为nk细胞乳酸化修饰酶writer或乳酸辅酶a合成酶。
3、优选的，所述靶向抑制 nk 细胞乳酸转运载体为单羧酸转运蛋白（monocarboxylate transporter，mct），靶向阻断nk细胞乳酸的摄取，恢复nk细胞效应功能，具体步骤如下：
4、将nk细胞稀释至50万/ml，在肿瘤上清或者15 mm乳酸钠的浓度中，使用mct的抑制剂chc（α-cyano-4-hydroxycinnamic acid，cas号为28166-41-8）10 mm孵育nk细胞48 h。
5、优选的，所述乳酸化修饰酶writer为p300；所述乳酸辅酶a合成酶为gtpscs、ascc2或acat1/2；所述抑制乳酸化过程中的修饰酶，恢复nk细胞效应功能，具体步骤如下：
6、所述修饰酶为p300时，将nk细胞稀释至50万/ml，在15 mm乳酸钠的浓度中，使用p300的抑制剂c646（cas号：328968-36-1）20 μm孵育nk92mi细胞48 h；
7、所述修饰酶为gtpscs时，将nk细胞稀释至50万/ml，15 mm乳酸钠的浓度中，使用gtpscs的抑制剂甲酸钠100 mm；
8、所述修饰酶为ascc2时，将nk细胞稀释至50万/ml，15 mm乳酸钠的浓度中，使用ascc2的抑制剂acss2-in-2（cas号：2332820-04-7）20 μm；
9、所述修饰酶为acat1/2时，将nk细胞稀释至50万/ml，15 mm乳酸钠的浓度中，使用acat1/2的抑制剂阿伐麦布（avasimibe，cas号为166518-60-1）20 μm孵育nk92mi细胞48 h。
10、本发明的有益效果为：
11、本发明靶向乳酸化修饰这一蛋白质修饰，阻断nk92mi乳酸化修饰从而逆转nk细胞的功能耗竭，通过抑制乳酸化修饰能够部分逆转nk细胞功能，恢复nk92mi细胞的效应分子的表达水平。
1.一种靶向抑制乳酸化提高nk细胞功能的方法，其特征在于，所述方法为靶向抑制nk细胞乳酸转运载体或抑制乳酸化过程中的修饰酶；所述修饰酶为nk细胞乳酸化修饰酶writer或乳酸辅酶a合成酶。
2. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述靶向抑制nk细胞乳酸转运载体为单羧酸转运蛋白（monocarboxylate transporter，mct），具体步骤如下：
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述乳酸化修饰酶writer为p300；所述乳酸辅酶a合成酶为gtpscs、ascc2或acat1/2；所述抑制乳酸化过程中的修饰酶的具体步骤如下：