专利名称:一种从长春花中提取长春碱的方法
技术领域：
本发明涉及天然药物领域，特别涉及一种采用超声波提取技术从长春花中提取长 春碱的方法。
背景技术长春碱主要从长春花植物中提取得到，是夹竹桃科植物长春花所含有的一种抗癌 生物碱，是目前临床使用的抗肿瘤药物，也可作为合成另一种抗癌生物碱长春瑞宾的化学 中间体。
目前从长春花中提取长春碱的方法有
1.从长春花鲜草中提取生物碱的工艺，中国专利局公开号CN101007033A ；公开 日2007. 8. 1 ；申请号=200610023692. 7。该发明涉及一种从长春花鲜草中提取生物碱的工 艺，通过打浆一调酸一离心、榨汁一过滤一滤液调PH —四氯化碳萃取一浓缩抽松得到生物 碱混合物。
2. —种长春碱的高效生产方法，中国专利局公开号CN1534038A ；
公开日2004. 10.6 ；申请号200410013558.X。该发明涉及一种长春碱的高效生产方法，通过将长 春花经与醇或酸醇提取溶剂混合一勻浆固液萃取一空化混悬萃取一过滤一提取液浓缩一 浓缩液调PH值一过滤一空化混悬液液萃取一浓缩一纯化后得到长春碱成品。
3.从长春花中提取抗癌活性成分的新工艺，中国专利局公开号CN1365978A ；公 开日2002. 08. 28 ；申请号=011319879. 9。该发明涉及一种长春花全草干粉中提取长春碱、 长春新碱及熊果酸的工艺方法，采用长春花干料磨粉一苯渗漉一3 10%的酒石酸液逆流 萃取一酸溶物经柱层析分离一长春碱和长春新碱。
4.Process for the isolation of alkaloid components from the plantVinca Rosea L.(一种从长春花中分离生物碱成分的工艺)美国专利局公开号4172077 ；
公开日1979. 10. 23 ；申请号[HU]RI 638。该发明涉及一种以长春花干草粉碎后，通过不同的pH萃 取来提取长春花生物碱的工艺方法。原料经粉碎一甲醇、2%硫酸水溶液及甲苯渗漉一浓缩 渗漉液一PH梯度萃取一纯化得到生物碱。
其中方法2、3、4存在工艺复杂不易推广、提取时间较长、生产成本高等缺点；方法 1、3、4存在使用苯、甲苯、四氯化碳等有毒溶剂，容易对环境造成污染。
发明内容
本发明的目的是针对现有技术的不足而提供一种工艺流程简单、提取率高、对环 境无污染的从长春花中提取长春碱的方法。
为了达到上述目的，本发明采用的技术方案为将长春花鲜草加入提取溶液中制 成勻浆，勻浆经超声波处理后进行固液分离，提取液经调PH值、有机溶剂萃取，萃取液再经 浓缩、纯化后得到长春碱成品。
本发明的优点[0012]1.工艺流程简单，易于推广，对环境无污染。
2.采用超声波提取法，具有生产周期短、提取率高的优点。
3.本发明提供的工艺方法也可用于提取长春花所含有的其它生物碱如文多灵、长 春质碱、脱水长春碱、长春新碱等。
具体实施方式
下面结合非限定性实施例对本发明作进一步详细说明。
本发明所提供的从长春花中提取长春碱的方法，具体步骤如下
(1)、将长春花地上部分刈割后得到的鲜品、提取溶液同时加入勻浆机中进行勻 浆，然后用0. 5 5%的硫酸水溶液将勻浆的PH值调至1 3. 5。所述提取溶液为硫酸 水溶液与无机盐水溶液的混合溶液，其中混合溶液的pH为1 3. 5，无机盐的摩尔浓度为 0. 5M 3. 5M。所述无机盐为氯化钠、氯化钾、硫酸钠或硫酸钾其中的一种或二种以上混合。
(2)、用超声波提取机以频率为20KHz IMHz的超声波处理勻浆，以增加长春碱的 溶出量，时间为10 90分钟。
(3)、采用沉降离心机离心除去固体物质得到提取液，分离因数为1000 6000，时 间3 20分钟。
(4)、用浓氨水将提取液的PH值调至7. 5 12，然后用有机溶剂进行萃取。所述有 机溶剂是乙酸乙酯。
(5)、将萃取液在温度35 50°C、负压0.06 0. IMPa或常压下浓缩至干得到长春 碱混合物。
(6)、用正相硅胶柱对长春碱混合物进行纯化，所用洗脱液为含1 10%甲醇的三 氯甲烷溶液。用洗脱液进行洗脱，然后合并含有长春碱的洗脱液，在温度35 50°C、负压 0. 06 0. IMPa条件下回收溶剂得到长春碱粗品。
(7)、将所得长春碱粗品进行重结晶即得长春碱产品；所用的重结晶溶剂为 85% 95%的甲醇或乙醇溶液。
实施例一、
将含水率83 %的鲜长春花50kg与提取液(pH值为2. 5的硫酸水溶液，含IM氯化 钠)100L混合同时投入勻浆机进行勻浆，勻浆液以2%的硫酸水溶液调至pH 2. 5，勻浆液经 转子泵打入超声波提取机，25KHz超声波处理30分钟，勻浆液再经转子泵打入沉降离心机 内离心，分离因数3000，时间10分钟，收集上清液。将沉淀物加入新的提取液重复上述操作 3次，合并上清液，用浓氨水调pH值至8 9，与1/4体积的乙酸乙酯置于萃取罐中，搅拌萃 取10分钟，静置10分钟，将乙酸乙酯萃取液经温度为30°C、负压为0. IMPa的溶剂浓缩器 回收乙酸乙酯，将萃取液浓缩至干，经结晶及正相硅胶柱层析分离后，再经重结晶得到纯度 98. 9的长春碱1. 05g。
实施例二、
将含水率45%的长春花50kg与提取液(pH值为1. 5的硫酸水溶液，含2M硫酸 钠)100L混合同时投入勻浆机进行勻浆，勻浆液以2%的硫酸水溶液调至pH 1. 5，勻浆液经 转子泵打入超声波提取机，IMHz超声波处理30分钟，勻浆液再经转子泵打入沉降离心机内 离心，分离因数3000，时间5分钟，收集上清液。将沉淀物加入新的提取液重复上述操作3次，合并上清液，用浓氨水调pH8 9，与1/4体积的乙酸乙酯置于萃取罐中，搅拌萃取15分 钟，静置10分钟，将乙酸乙酯萃取液经温度为30°C、负压为0. IMPa的溶剂浓缩器回收乙酸 乙酯，将萃取液浓缩至干，经结晶及正相硅胶柱层析分离后，再经重结晶得到纯度98. 1的 长春碱1.33g。
权利要求
一种从长春花中提取长春碱的方法，其特征在于具体步骤如下(1)、将长春花地上部分刈割后得到的鲜品、提取溶液同时加入匀浆机中进行匀浆，然后用0.5～5％的硫酸水溶液将匀浆的pH值调至1～3.5；所述提取溶液为硫酸水溶液与无机盐水溶液的混合溶液，其中混合溶液的pH为1～3.5，无机盐的摩尔浓度为0.5M～3.5M；所述无机盐为氯化钠、氯化钾、硫酸钠或硫酸钾其中的一种或二种以上混合；(2)、用超声波提取机以频率为20KHz～1MHz的超声波处理匀浆；(3)、采用沉降离心机离心除去固体物质得到提取液，分离因数为1000～6000，时间3～20分钟；(4)、用浓氨水将提取液的pH值调至7.5～12，然后用有机溶剂进行萃取；所述有机溶剂是乙酸乙酯；(5)、将萃取液在温度35～50℃、负压0.06～0.1MPa或常压下浓缩至干得到长春碱混合物；(6)、用正相硅胶柱对长春碱混合物进行纯化，所用洗脱液为含1～10％甲醇的三氯甲烷溶液；用洗脱液进行洗脱，然后合并含有长春碱的洗脱液，在温度35～50℃、负压0.06～0.1MPa条件下回收溶剂得到长春碱粗品；(7)、将所得长春碱粗品进行重结晶即得长春碱产品。
2.根据权利要求
1所述的从长春花中提取长春碱的方法，其特征在于所述超声波处 理勻浆的时间为10 90分钟。
3.根据权利要求
1所述的从长春花中提取长春碱的方法，其特征在于所用的重结晶 溶剂为85% 95%的甲醇或乙醇溶液。
专利摘要
本发明公开了一种从长春花中提取长春碱的方法，它是将长春花鲜品加入含盐的酸性提取溶液制成匀浆，经超声波处理后采用沉降离心机进行固液分离，提取液经调pH值至碱性、有机溶剂萃取，萃取液再经浓缩、纯化后得到长春碱成品。本发明具有工艺简单、生产周期短、提取效率高、无污染等特点，易于在生产中应用。
文档编号A61K36/24GKCN101337972 B发布类型授权 专利申请号CN 200810131031
公开日2010年9月15日 申请日期2008年8月12日
发明者何际婵, 庞玉新, 晏小霞, 王建荣, 王祝年, 董志超, 邹冬梅 申请人:中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所导出引文BiBTeX, EndNote, RefMan专利引用 (2),