度滴加丙二酸二乙酯(0.15mol, 24克)溶解的过氧化氢脲(0.15mol, 14.1克)，温度保持在25度，2小时内加完毕，保持温度40度，反应24小时。
[0036]1、过滤分离回收尿素和酶催化剂。滤液加入磷酸水溶液稀释，再滴加饱和碳酸钠溶液中和，随后加入高碘酸钠洗涤。
[0037]2、过滤，滤液加入甲苯萃取，萃取液回收甲苯，粗产物以食用酒精结晶，得白色针状晶体10.5克，收率69%。
[0038]实施例5:
[0039]1、在100毫升三口烧瓶中，加入异丁香酚(0.1mol, 16.4克)，脂肪酶(0.6克)，搅拌下，于25度左右滴加丁二酸二甲酯(0.1mol, 14.6克)溶解的过氧化氢脲(0.15mol, 14.1克)，3小时内滴加完毕，缓慢升温至35-40度，反应8小时。
[0040]2、过滤分离回收尿素和酶催化剂。滤液加入磷酸水溶液稀释，再滴加饱和碳酸钠溶液中和，随后加入高碘酸钠洗涤。
[0041]3、过滤，滤液加入甲苯萃取，萃取液回收甲苯，粗产物以食用酒精结晶，得白色针状晶体9.9克，收率65%。
[0042]实施例6:
[0043]1、在100毫升三口烧瓶中，加入异丁香酚(0.1mol, 16.4克)，脂肪酶(0.6克)，搅拌下，于30度加入丁二酸单甲醋(0.1mol, 13.2克)，分5次加入过氧化氢脲(0.15mol, 14.1克)，每次2.82克，温度保持在30度，3小时内滴加完毕，缓慢升温至35-40度，反应22-24小时。
[0044]2、过滤分离回收尿素和酶催化剂。滤液加入硫酸水溶液稀释，再滴加饱和碳酸钠溶液中和，随后加入高碘酸钠洗涤。
[0045]3、过滤，滤液加入乙苯萃取，萃取液回收甲苯，粗产物以食用酒精结晶，得白色针状晶体10.2克，收率67%。
[0046]实施例7:
[0047]1、在100毫升三口烧瓶中，加入异丁香酚(0.1mol, 16.4克)，脂肪酶(0.5克)，搅拌下，于15度加入草酸单甲醋(0.1mol, 10.4克)，然后分4次加入过氧化氢脲(0.1mol, 9.4克)，每次2.35克，维持温度15度，2小时内加完毕，升高温度至40度，反应8小时。
[0048]2、过滤分离回收尿素和酶催化剂。滤液加入硫酸水溶液稀释，再滴加饱和碳酸钠溶液中和，随后加入高碘酸钠洗涤。
[0049]3、过滤，滤液加入乙酸丁酯萃取，萃取液回收乙酸丁酯，粗产物以食用酒精结晶，得白色针状晶体11.1克，收率73%。
[0050]实施例8:
[0051]1、在100毫升三口烧瓶中，加入异丁香酚(0.1mol, 16.4克)，脂肪酶(0.7克)，搅拌下，于25度左右滴加草酸二甲酯(0.1mol, 13.2克)溶解的过氧化氢脲(0.15mol, 12.5克)，2小时内加完毕，保持温度40度，反应6小时。
[0052]2、过滤分离回收尿素和酶催化剂。滤液加入硫酸水溶液稀释，再滴加饱和碳酸钠溶液中和，随后加入高碘酸钠洗涤。
[0053]3、过滤，滤液加入乙酸丁酯萃取，萃取液回收乙酸丁酯，粗产物以食用酒精结晶，得白色针状晶体11.4克，收率75%。
[0054]实施例9:
[0055]1、在100毫升三口烧瓶中，加入异丁香酚(0.1mol, 16.4克)，脂肪酶(0.5克)，搅拌下，于15度加入草酸单乙酯(0.075mol, 7.8克)，然后分5次加入过氧化氢脲(0.18mol, 12.8克)，每次2.56克，温度保持在15度，2.5小时内加完毕，保持温度40度左右，反应24小时。
[0056]2、过滤分离回收尿素和酶催化剂。滤液经柠檬酸水溶液稀释，再滴加饱和碳酸氢钾溶液中和，随后加入高碘酸钠洗涤。
[0057]3、过滤，滤液加入乙酸丁酯萃取，萃取液回收乙酸丁酯，粗产物以食用酒精结晶，得白色针状晶体10.8克，收率71 %。
[0058]实施例10:
[0059]1、在100毫升三口烧瓶中，加入异丁香酚(0.1mol, 16.4克)，脂肪酶(0.5克)，搅拌下，室温下加入草酸(0.075mol, 6.75克)，然后加入草酸二异丙酯(0.075mol, 13.1克)溶解的过氧化氢脲(0.15mol, 14.1克)，2.5小时内加完毕，保持温度30度，反应24小时。
[0060]2、过滤分离回收尿素和酶催化剂。滤液经柠檬酸水溶液稀释，再滴加饱和碳酸氢钾溶液中和，随后加入高碘酸钠洗涤。
[0061]3、过滤，滤液加入乙酸丁酯萃取，萃取液回收乙酸丁酯，粗产物以食用酒精结晶，得白色针状晶体11.1克，收率73%。
[0062]上述实施例只为说明本发明的技术构思及特点，其目的在于让熟悉此项技术的人士能够了解本发明的内容并据以实施，并不能以此限制本发明的保护范围。凡根据本发明精神实质所作的等效变化或修饰，都应涵盖在本发明的保护范围之内。
【主权项】
1.一种采用催化氧化法合成香兰素的工艺，其特征在于，包括如下步骤: 1)将异丁香酚、脂肪酶、二元酸或二元酸衍生物加入反应釜中，搅拌，控制反应釜内温度为15-35度，加入过氧化氢脲，升温至15-40度继续搅拌反应8-24h，过滤，分离回收滤液，并得到滤液； 2)将步骤I)的滤液经酸液稀释，碱液中和，高碘酸钠洗涤后，再经有机溶剂萃取，质量浓度为30-95%食用酒精重结晶，干燥后得到香兰素。
2.根据权利要求1所述的采用催化氧化法合成香兰素的工艺，其特征在于，脂肪酶质量为异丁香酸质量1% -4% ;二元酸或二元酸衍生物摩尔质量为异丁香酸摩尔质量的0.75-1.5倍；过氧化氢脲摩尔质量为异丁香酚摩尔质量的1-1.5倍。
3.根据权利要求1或2所述的采用催化氧化法合成香兰素的工艺，其特征在于，所述脂肪酶为脂肪酶Novozyme 435 ;所述的二元酸或二元酸衍生物为C2-C4二元酸或二元酸酯类衍生物；所述酸液为摩尔浓度为0.1-lmol/L的硫酸水溶液或磷酸水溶液或柠檬酸水溶液；所述的碱液为饱和碳酸氢钠水溶液或饱和碳酸氢钾水溶液或饱和碳酸钠水溶液或饱和碳酸钾水溶液；所述有机溶剂为甲苯或乙苯或乙酸丁酯。
4.根据权利要求3所述的采用催化氧化法合成香兰素的工艺，其特征在于，C2-C4二元酸或二元酸酯类衍生物包括草酸或草酸二甲脂/ 二乙酯/ 二异丙酯，丙二酸或丙二酸二甲酯/ 二乙酯/ 二异丙酯，丁二酸或丁二酸二甲酯/ 二乙酯/ 二异丙酯，草酸单甲酯/单乙酯/单异丙酯，丙二酸单甲酯/单乙酯/单异丙酯，丁二酸单甲酯/单乙酯/单异丙酯中的任意一种或两种。
【专利摘要】一种脂肪酶催化制备香兰素的方法，在反应釜中，依次经过加入溶剂、底物松柏醇/松柏醛/阿魏酸、脂肪酶、二元酸或二元酸衍生物、过氧化氢脲的步骤，其中脂肪酶质量为底物异丁香酚质量1％-4％；二元酸或二元酸衍生物摩尔质量为底物摩尔质量的0.75-1.5倍；过氧化氢脲摩尔质量为底物摩尔质量的1-2倍；过氧化氢脲加入温度为15-35度，反应温度为20-40度，反应时间为14-36小时后，过滤分离回收尿素和酶催化剂滤液经水稀释，有机溶剂萃取，食用酒精重结晶，干燥后得到香兰素。有机溶剂萃取后的母液经亚硫酸氢钠或亚硫酸钠络合，回收醛的副产物。本方法的香兰素收率可达85％，反应步骤简单，条件温和，催化特异性强，不易产生副产物，产品收率高，对环境友好，可易于放大。
【IPC分类】C12P7-24
【公开号】CN104531781
【申请号】CN201410770561
【发明人】李斌, 彭春睿, 刘旭, 石化兵
【申请人】波顿（上海）生物技术有限公司
【公开日】2015年4月22日
【申请日】2014年12月12日