一种那西肽精粉的提取方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于兽药制备技术领域，具体设及一种那西肤精粉的提取方法。
【背景技术】
[0002] 那西肤又名诺西肤、诺肤菌素和诺肤霉素，是一种含硫多肤类抗生素，分子式 为CwH43Ni3〇i2Se。它是由放线菌菌株发酵产生，为淡黄色至淡褐色结晶性粉末，不溶于水 和石油酸，微溶于甲醇、乙醇、乙酸乙醋和苯，可溶于氯仿、化晚、二甲基甲酯胺，烙点为 310-320°C(伴随分解）。那西肤的作用机制是阻碍细菌的蛋白质合成，在低浓度时呈抑菌 作用，在高浓度时呈杀菌作用。由于那西肤阻抑了肠内有害细菌的生长，使肠道管壁吸收机 能正常，从而促进了动物的生长，提高了饲料利用率。那西肤是一种毒性极低的物质，其在 动物体内残留极少且不被消化道吸收。那西肤与其它抗生素类饲料添加剂相比，具有用量 少、无药物残留、毒性小，且对环境影响小等特点，是一种新型、高效、绿色的饲料添加剂。因 此，近年来那西肤倍受畜禽行业和养殖行业的关注。
[0003] 那西肤是一种脂溶性抗生素，主要存在于菌体细胞内，仅有少量分泌到细胞外。对 于主要存在于细胞内的脂溶性抗生素最有效的提取方法是有机溶剂萃取。李霞等（饲料 添加剂那西肤的分离提取和精制，工业微生物，1991，21 (1) : 19-22)采用乙醇浸提那西肤发 酵液，再经正下醇反萃取得到那西肤粗品，精制后得那西肤精品。该法存在的主要缺点为： 1、正下醇萃取液浓缩溫度高，而那西肤在高溫下不稳定，所W给提取工作带来很大困难；2、 正下醇萃取时容易产生大量乳化层，分离乳化层使产品的收率大大降低（粗品70%，精品 50% )，因此不适合工业化生产。为此需要开发一种适合工业化生产的那西肤提取工艺，W 期推动在运一领域的发展。
【发明内容】
[0004] 为了解决现有的那西肤提取工艺中存在的问题，本发明提供了一种那西肤精粉的 提取方法，工艺简单，设备常规，制得那西肤精粉收率高，效价高，且不含菌丝体。
[0005] 本发明解决技术问题所采用的技术方案为：
[0006] 一种那西肤精粉的提取方法，包括W下步骤：
[0007] (1)取灭活后的那西肤发酵液，加入助滤剂，采用邸式螺旋沉降离屯、机离屯、处理；
[0008] (2)取步骤（1)所得那西肤滤渣，向其中加入二氯乙烧，并于45-50°C揽拌0. 5-1 小时，过滤，滤液静置分层，取有机相，得那西肤提取液；
[0009] (3)取步骤（2)所得滤渣，向其中加入二氯乙烧，并于45-50°C揽拌0.5-1小时，过 滤，滤液静置分层，取有机相，得那西肤提取液；
[0010] (4)将步骤（2)、（3)所得那西肤提取液合并，减压蒸馈回收二氯乙烧，再于室溫下 加入去离子水，过滤，滤饼经水洗、干燥、研磨得那西肤精粉，蒸馈出的二氯乙烧可W直接回 收套用。
[0011] 作为优选，所述助滤剂为娃藻±，其用量为那西肤发酵液的1%。为了防止二氯乙 烧提取时菌丝体沉淀结团的现象，更有利于菌丝体中那西肤的溶出，加入少量助滤剂，能防 止滤渣菌丝体堆积过于密实，使过滤顺利进行。
[0012] 作为优选，步骤（2)所述二氯乙烧溶剂的用量为那西肤滤渣质量的3-5倍。
[0013] 作为优选，步骤（3)所述二氯乙烧溶剂的用量为滤渣质量的1-2倍。
[0014] 作为优选，步骤（4)所述去离子水为那西肤提取液总质量的1-1. 5倍。
[0015] 那西肤是一种脂溶性抗生素，主要存在于菌体细胞内，仅有少量分泌到细胞外，因 此可W通过将那西肤发酵液离屯、去除上清液，收集滤渣菌体采用有机溶剂萃取的方法提 取。本发明采用邸式螺旋沉降离屯、机对发酵液进行离屯、处理，相比于传统的板框过滤发酵 液方法，单位时间处理量更大，分离效果更好。利用那西肤溶于二氯乙烧的性质，先将步骤 (1)所得那西肤滤渣采用二氯乙烧溶剂提取，溶解那西肤，除去菌丝体，得到那西肤提取液； 由于那西肤在水中不溶，向那西肤提取物中加入去离子水，那西肤晶体析出，其他杂质溶于 水中，从而达到对那西肤精制的目的，提高那西肤效价和品质。
[0016] 本发明的有益效果为：
[0017] 1、采用本发明所述方法所得那西肤精粉效价970ug/mg，产品不含菌丝体，收率高 达93%。
[0018] 2、本发明所述的那西肤提取工艺简单，提取效率高，适合工业化生产。
[0019] 3、本发明所用的二氯乙烧溶剂可经回收循环使用，从而减少废水污染，降低生产 成本。
【具体实施方式】
[0020] W下结合实施例来进一步解释本发明，但实施例并不对本发明做任何形式的限 定。 阳OW 实施例1
[0022] (1)取灭活后的那西肤发酵液3000g，加入娃藻± 30g，采用邸式螺旋沉降离屯、机 离屯、处理，得到120g含那西肤的滤渣（含水）；
[0023] (2)取步骤（1)所得那西肤滤渣，向其中加入360g二氯乙烧溶剂，并于45°C揽拌 0. 5小时，过滤、分层，取有机相，得364g那西肤提取液和116g菌丝体滤渣；
[0024] 做取步骤似所得局菌丝体滤渣，向其中加入116g二氯乙烧，并于45°C揽拌0. 5 小时，过滤、分层，取有机相，得117. 5g那西肤提取液；
[00巧](4)将步骤（2)、（3)所得西肤提取液合并，减压蒸馈至干，室溫下向其中加入去离 子水481. 5g去离子水，过滤，滤饼经水洗、干燥、研磨得5. 42g那西肤精粉。
[0026] 实验结果如表1所示： 1^0027]表1 :
[0028]
[0029] 实施例2
[0030] (1)取灭活后的那西肤发酵液3000g，加入娃藻± 30g，采用邸式螺旋沉降离屯、机 离屯、处理，得到120g含那西肤的滤渣（含水）；
[00川 似取步骤（1)所得那西肤滤渣，向其中加入480g二氯乙烧溶剂，并于48°C揽拌 0. 8小时，过滤、分层，取有机相，得512g那西肤提取液和88g菌丝体滤渣；
[0032] (3)取步骤（2)所得局菌丝体滤渣，向其中加入132g二氯乙烧，并于48°C揽拌0.8 小时，过滤、分层，取有机相，得122g那西肤提取液；
[0033] (4)将步骤（2)、（3)所得西肤提取液合并，减压蒸馈至干，室溫下向其中加入去离 子水698g去离子水，过滤，滤饼经水洗、干燥、研磨得5. 86g那西肤精粉。
[0034] 实验结果如表2所示：
[0035]表 2 :
[0036]
[0037] 实施例3
[003引（1)取灭活后的那西肤发酵液3000g，加入娃藻±30g，采用邸式螺旋沉降离屯、机 离屯、处理，得到120g含那西肤的滤渣（含水）；
[0039] 似取步骤（1)所得那西肤滤渣，向其中加入600g二氯乙烧溶剂，并于50°C揽拌 1小时，过滤、分层，取有机相，得615g那西肤提取液和105g菌丝体滤渣；
[0040] (3)取步骤（2)所得局菌丝体滤渣，向其中加入210g二氯乙烧，并于50°C揽拌1 小时，过滤、分层，取有机相，得223g那西肤提取液；
[0041] (4)将步骤（2)、（3)所得西肤提取液合并，减压蒸馈至干，室溫下向其中加入 1257g去离子水，过滤，滤饼经水洗、干燥、研磨得5. 79g那西肤精粉。
[0042] 实验结果如表3所不：
[0043]表 3 :
[0044]
[0045] W上仅列举了本发明的优选实施方案，本发明的保护范围并不限制于此，本领域 技术人员在本发明权利要求范围内所作的任何改变均落入本发明保护范围内。
【主权项】
1. 一种那西肽精粉的提取方法，其特征在于，所述提取方法包括以下步骤： (1) 取灭活后的那西肽发酵液，加入助滤剂，采用卧式螺旋沉降离心机离心处理； (2) 取步骤（1)所得那西肽滤渣，向其中加入二氯乙烷，并于45-50°C搅拌0. 5-1小时， 过滤，滤液静置分层，取有机相，得那西肽提取液； (3) 取步骤（2)所得滤渣，向其中加入二氯乙烷，并于45-50°C搅拌0. 5-1小时，过滤， 滤液静置分层，取有机相，得那西肽提取液； (4) 将步骤（2)、（3)所得那西肽提取液合并，减压蒸馏回收二氯乙烷，再于室温下加 入去离子水，过滤，滤饼经水洗、干燥、研磨得那西肽精粉。2. 如权利要求1所述的那西肽精粉的提取方法，其特征在于，所述助滤剂为硅藻土，其 用量为那西肽发酵液质量的1%。3. 如权利要求1所述的那西肽精粉的提取方法，其特征在于，步骤⑵中所述二氯乙烷 的用量为那西肽滤渣的3-5倍。4. 如权利要求1所述的那西肽精粉的提取方法，其特征在于，步骤⑶中所述二氯乙烷 的用量为那西肽滤渣的1-2倍。5. 如权利要求1所述的那西肽精粉的提取方法，其特征在于，步骤（4)中所述去离子水 为那西肽提取液总质量的1-1. 5倍。
【专利摘要】本发明提供了一种那西肽精粉的提取方法，将灭活后的那西肽发酵液，加入助滤剂离心处理后，取所得滤渣加入二氯乙烷，并于45-50℃搅拌0.5-1小时，过滤，滤液静置分层后，取有机相得那西肽提取液，再经减压蒸馏回收二氯乙烷，于室温下加入去离子水，过滤，滤饼经水洗、干燥、研磨得那西肽精粉，蒸馏出的二氯乙烷可以直接回收套用。采用本发明所述方法所得那西肽精粉效价970ug/mg，产品不含菌丝体，收率高达93%。本发明所述的那西肽提取工艺简单，提取效率高，所用的二氯乙烷溶剂可经回收循环使用，从而减少废水污染，降低生产成本，适合工业化生产。
【IPC分类】C07K1/36, C07K1/34, C07K5/078, C07K1/30
【公开号】CN105198958
【申请号】CN201510633203
【发明人】吴中华, 张小朋, 陈贵才, 徐天华, 何奇雷, 闻鸣
【申请人】浙江汇能动物药品有限公司
【公开日】2015年12月30日
【申请日】2015年9月29日