,其合成,活性和应用
【专利说明】咪畦并化惦-6-甲醜-||/|61：-6111(082|)2，其合成，活性和应 用 发明领域
[0001] 本发明涉及3H-咪哇并[4,5-c]化巧-6-甲醜-Met-Glu(0Bzl)-0Bzl，涉及它们的 制备方法，进一步涉及它的抗血栓活性，因而本发明涉及它作为抗血栓药物的应用。本发明 属于生物医药领域。
【背景技术】
[0002] 血栓性疾病是一种严重威胁人类健康的必脑血管疾病，每年均会有3%。的人发生 不同程度的血栓性疾病，其发病率及致死率均较高。
[0003]目前临床上治疗血栓性疾病的药物主要分为抗血小板药物、溶栓药物及抗凝血药 物H类。从防治角度来看，抗栓药物更能针对疾病本身，减轻临床治疗压力，从而得到广泛 应用。但由于传统的抗血栓药物的安全性及依从性都有待优化，研究疗效更高且毒副作用 更低的新型药物已成为抗栓药物研究的热点。发明人曾经公开下式代表的3H-咪哇并[4， 5-C]化巧-6-甲醜-AA-OBzl(其中AA代表甘氨基酸或其它k氨基酸残基）在1ymol/kg剂量下显示良好的抗肿瘤活性。通过进一步研究发明人认识到，在3H-咪哇并[4, 5-c]化 巧-6-甲醜-AA-OBzl的6-甲醜基和AA-OBzl基之间插入Met残基，不仅可W延缓它的代 谢，而且可W获得抗血栓活性。根据送些认识，发明人提出了本发明。
[0004]
【发明内容】
[000引本发明的第一个内容是提供3H-咪哇并[4,5-C]化巧-6-甲 醜-Met-Glu(0Bzl)-0Bzl。
[0006]
[0007] 本发明的第二个内容是提供3H-咪哇并[4,5-C]化巧-6-甲 醜-Met-Glu(OBzl) -OBzl的合成方法，该方法包括：
[0008] (1化-组氨酸在稀硫酸催化下与甲醒进行Pictet-Spengler缩合生成6S-4,5,6, 7-四氨-3H-咪哇并[4, 5-C]化巧-6-駿酸；
[0009] (2) 6S-4, 5,6, 7-四氨-3H-咪哇并[4, 5-C]化巧-6-駿酸转化为 6S-4, 5,6, 7-四 氨-3H-咪哇并[4,5-c]化巧-6-甲酸甲醋；
[0010] (3)65-4,5,6,7-四氨-3护咪哇并[4,5-(：]化巧-6-甲醋用高儘酸钟氧化为3护咪 哇并[4, 5-c]化巧-6-甲酸甲醋；
[0011] (4)3H-咪哇并[4,5-c]化巧-6-甲酸甲醋在化0H溶液（2脚中皂化成3H-咪哇并 [4,5-c]化巧-6-甲酸；
[0012] 巧)Boc-Met与Glu(0Bzl)-0Bzl偶联得到Boc-Met-Glu(0Bzl)-0Bzl;
[0013] 化)Boc-Met-Glu(0Bzl)-0Bzl在4N氯化氨己酸己醋溶液中脱Boc保护基，得到 Met-Glu(0Bzl)-0Bzl；
[0014] (7) 3H-咪哇并[4, 5-C]化巧-6-甲酸与Met-Glu(OBzl)-OBzl偶联得到 3H-咪哇 并[4,5-c]化巧-6-甲醜-Met-Glu((ffizl)-(ffizl。
[001引本发明的第S个内容是评价3H-咪哇并[4,5-c]化巧-6-甲 醜-Met-Glu(OBzl) -OBzl的抗血栓作用。
【附图说明】
[001引 图1. 3H-咪哇并[4, 5-C]化巧-6-甲醜-Met-Pro-OBzl的合成路线.U肥册，&0，H2S04,65°C;ii)Me0H，SOClz'CrC;iii)DMF，立己胺，KMn〇4;iv)NaOH，H2〇，(TC;v)二环己基碳 二亚胺值CC)，1-居基苯并H哇化OBt)，N-甲基吗晰（NMM)，四氨巧喃灯HF) ;vi)4N氯化氨 己酸己醋溶液，〇°C;vii)二环己基碳二亚胺值CC)，1-居基苯并H哇（HOBt)，N-甲基吗晰 (NMM),DMFo
【具体实施方式】
[0017] 为了进一步阐述本发明，下面给出一系列实施例。送些实施例完全是例证性的，它 们仅用来对本发明进行具体描述，不应当理解为对本发明的限制。
[001引实施例1化合物6S-4,5,6,7-四氨-3H-咪哇并[4,5-c]化巧-6-駿酸（1)的制 备
[001引 10. 00g(64. 5mm0Uk组氨酸，30血水混合于100血茄瓶中，冰浴下，用恒压漏斗 逐滴加入2mL浓硫酸，随浓硫酸的加入，原料逐渐溶解，待其完全溶解后，向反应液中加入 40%的甲醒溶液lOmU在微波加速反应仪65C下反应5小时。反应完毕后，冰浴下缓慢滴 加浓氨水调溶液P册-7,有大量白色沉淀析出，减压过滤，得到无色固体10. 76g巧9. 2% )。 ESI-MS(m/z) :168[M+H]+。
[0020] 实施例2化合物6S-4,5,6,7-四氨-3H-咪哇并[4,5-c]化巧-6-甲酸甲醋似 的制备
[0021] 冰浴下在100血茄瓶里加15. 6血甲醇，冰浴下，用恒压漏斗缓慢滴加1. 56血二 氯亚讽，30min后加入1.00g(6mmol)6S-4,5,6,7-四氨-3H-咪哇并[4,5-c]化巧-6-駿酸 (1)，室温反应3天后，TLC监测反应完全，反应混合物减压浓缩，残留物加甲醇溶解并减压 浓缩。该操作重复3次得白色泡状固体，再加己離抽干重复3次得无色粉末，最后用甲醇/ 己離重结晶得0. 58g(53%)标题化合物，为无色固体。ESI-MS(m/z)181[M+田+。
[002引实施例3化合物3H-咪哇并[4, 5-C]化巧-6-甲酸甲醋做的制备
[002引 冰浴下在100血茄瓶里加1.Ig化.lmmol)6S-4,5,6,7-四氨-3H-咪哇并[4,5-c] 化巧-6-甲酸甲醋（2)，加DMF使溶解。向该溶液中滴加ImLH己胺调抑到8,分H次加入 1.2g(7.6mmol)高儘酸钟。反应6小时后，TLC监测反应完毕。反应物吹干，得到的黑色固体 用1NHC1溶液溶解，冰浴下滴加2NNaOH溶液调抑到7，析出大量无色固体。该固体W二氯甲 焼/甲醇为洗脱剂用硅胶柱纯化，得〇.68g(63. 2% )标题化合物，为无色固体。ESI-MS(m/ z)177[]\Wl]+。
[0024]实施例4化合物3H-咪哇并[4, 5-c]化巧-6-駿酸（4)的制备 [00幼 冰浴下在100血茄瓶里力日40mLNa0H溶液（2脚，lOmin后力日入 5. 30g(29.9mmol)3H-咪哇并[4,5-c]化巧-6-甲酸甲醋（3)，反应1小时后TLC显示反应 完毕，冰浴下向反应液中滴加2NHC1溶液调抑到7,析出大量无色固体。该固体W二氯甲 焼/甲醇为洗脱剂用硅胶柱纯化，得1. 50g(30% )标题化合物，为无色固体。ESI-MS(m/ z)162[M-田。
[0026]实施例 5 化合物Boc-Met-Glu(OBzl)-OBzl的制备
[0027] 称取3g(12mmol)Boc-Met于100血茄形瓶中，加入40血THF。在冰浴和揽拌下依 次加入 1. 4g(10. 4mmo1)HOBt及 2. 96g(13. 9mmo