一种葡萄籽中单宁的提取方法
【技术领域】
[0002] 本发明涉及一种葡萄籽中单宁的提取方法。
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【背景技术】
[0004] 葡萄(8抑口68)，是葡萄科(>；^&〇6&6)葡萄属(>；[1^8)的落叶藤本植物。果实可制成 葡萄汁、葡萄干和葡萄酒等产品，随着葡萄产品的生产量越来越大，使得加工过程中产生的 废弃物如葡萄皮、葡萄籽、葡萄废渣等亟待进行综合利用。
[0005] 有关研究表明葡萄废弃物中含有丰富的葡萄籽油、蛋白质、单宁、白藜芦醇等物 质，其蛋白质含量高、氨基酸种类非常齐全、矿物质丰富，对满足人体的需要都是非常重要 的，并且这些物质在药品、保健品、化妆品等行业也被广泛应用，所以如何将这些葡萄籽废 弃物加以综合开发利用，变废为宝意义深远。如果处理得当，既可以减轻给环境带来的污染 又可以创造出巨大的经济效益，从而可以达到双赢的效果。
[0006] 单宁是广泛存在于许多植物中的水溶性多酚类物质，它是一种极强的体内活性功 能因子，许多研究表明，由于其自身的多酚羟基结构，单宁具有较强的抗氧化能力和较好的 药理活性，现已广泛应用于食品、保健品、皮革生产、印染工业、药品和化妆品等领域。但是 由于单宁的结构复杂，人工合成较难，现今国内外主要从天然植物如五倍子中提取，而且因 为天然资源有限，导致了国内外市场单宁的价格非常昂贵。另外，我国葡萄的产量和种植面 积都居于世界首位，葡萄在榨汁和酿酒过程中，会产生大量的副产物，如葡萄籽、葡萄皮等， 葡萄籽中单宁物质含量及其丰富，并且一些特有单宁还具有预防心血管疾病的功效。目前， 在国内从葡萄籽中提取单宁具有很大的开发潜力，但国内对单宁提取的研究较少。因此探 究从葡萄籽中提取单宁的优化工艺有非常重要的实际意义。
[0007] 本申请应用响应面分析法对葡萄籽中单宁的提取工艺进行优化研究，采用多元二 次回归方程作为函数估计的工具，结合数学和统计学建立等高线和曲面模型，使得葡萄籽 中单宁的提取率达到最高，为葡萄籽的综合开发利用提供了一定的科学依据。
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【发明内容】
[0009] 针对【背景技术】中存在的问题，本发明的目的在于提供一种葡萄籽中单宁的提取方 法，本申请通过有机溶剂浸提法对葡萄籽中单宁提取工艺的条件进行优化探究，考察了料 液比、乙醇体积分数、提取时间和提取温度对葡萄籽中单宁提取率的影响，通过单因素实验 和响应面优化实验的结果分析，得出最佳的葡萄籽中单宁提取条件为：乙醇的体积分数为 51.70%，提取时间为3.08h，提取温度为61.87，此条件下单宁的提取率高达6.36%。
[0010] 本发明的目的是通过以下技术方案来实现的： 一种葡萄籽中单宁的提取方法，所述提取方法包括如下步骤： 1) 将脱脂葡萄籽柏进行粉碎、过筛、浸提、抽滤得到滤液和滤渣备用； 2) 将步骤1)中的滤液进行减压浓缩、真空干燥得到单宁粗品。
[0011] 进一步，所述步骤1)中的粉碎、过筛具体为:取适量的脱脂葡萄籽柏，用高速多功 能粉碎机进行粉碎，然后使用60目的筛子过筛备用。
[0012] 进一步，所述步骤1)中的浸提的提取液为乙醇，所述乙醇的体积分数为30-70%，过 筛后的葡萄籽柏与所述乙醇的料液比为：1:40-1:80,提取时间为2-4h，提取温度为40-80 V。
[0013] 进一步，所述步骤1)中的浸提的提取液为乙醇，所述乙醇的体积分数为51.70%，过 筛后的葡萄籽柏与所述乙醇的料液比为 ：1:60，提取时间为3.081!，提取温度为61.87°〇。
[0014] 本发明具有以下积极的技术效果： 本申请通过有机溶剂浸提法对葡萄籽中单宁提取工艺的条件进行优化探究，考察了料 液比、乙醇体积分数、提取时间和提取温度对葡萄籽中单宁提取率的影响，通过单因素实验 和响应面优化实验的结果分析，得出最佳的葡萄籽中单宁提取条件为：乙醇的体积分数为 51.70%，提取时间为3.08h，提取温度为61.87，此条件下单宁的提取率高达6.36%。
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【附图说明】
[0016] 图1是提取剂乙醇的体积分数对单宁提取率的影响； 图2是不同料液比对单宁提取率的影响； 图3是不同提取温度对单宁提取率的影响； 图4是不同提取时间对单宁提取率的影响； 图5是乙醇的体积分数和提取时间交互作用对单宁提取率的影响(等高线图）； 图6是乙醇的体积分数和提取时间交互作用对单宁提取率的影响（响应面3D图）； 图7是乙醇的体积分数和提取温度交互作用对单宁提取率的影响(等高线图）； 图8是乙醇的体积分数和提取温度交互作用对单宁提取率的影响(3D曲面图）； 图9是提取时间和提取温度对单宁提取率的影响(等高线图）； 图10是提取时间和提取温度对单宁提取率的影响(3D曲面图）。
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【具体实施方式】
[0018] 下面，参考附图，对本发明进行更全面的说明，附图中标示出了本发明的示例性实 施例。然而，本发明可以体现为多种不同形式，并不应理解为局限于这里叙述的示例性实施 例。而是，提供这些实施例，从而使本发明全面和完整，并将本发明的范围完全地传达给本 领域的普通技术人员。
[0019] 本申请提供了一种葡萄籽中单宁的提取方法，该提取方法包括如下步骤：1)将脱 脂葡萄籽柏进行粉碎、过筛、浸提、抽滤得到滤液和滤渣备用；2)将步骤1)中的滤液进行减 压浓缩、真空干燥得到单宁粗品。其中，粉碎、过筛具体为:取适量的脱脂葡萄籽柏，用高速 多功能粉碎机进行粉碎，然后使用60目的筛子过筛备用。
[0020] 提取剂乙醇的体积分数对单宁提取率的影响： 取21个三角瓶，分为7组，每组3个平行，向其中加入1 g预处理后的原料，向每组三角瓶 中分别加入30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%的乙醇30mL，用保鲜膜封口后放于60°C的恒温 水浴锅中浸提3 h。取出后用布氏漏斗真空抽滤，将滤液移入离心管中，3000 r/min离心30 min。从每个样品液中吸取lmL上清液，置于盛有30mL蒸馏水的50mL容量瓶中，加2.5mLF-D试 剂，再加5mL饱和碳酸钠溶液，加水稀释至50mL。摇勾使其充分混合，并于30 min后在650nm 处测其吸光值。
[0021 ]不同料液比对单宁提取率的影响 取21个三角瓶，分为7组，每组3个平行，向其中加入1 g预处理后的原料，向每组三角瓶 中加入50%的乙醇2〇1^、3〇1^、4〇1^、5〇1^、6〇1^、7〇1^、8〇11^，用保鲜膜封口后放于60°(3的恒 温水浴锅中浸提3 h。取出后用布氏漏斗真空抽滤，将滤液移入离心管中，3000 r/min离心 30 min。从每个样品液中吸取2mL上清液，置于盛有30mL蒸馏水的50mL容量瓶中，加2.5mLF-D试剂，再加5mL饱和碳酸钠溶液，加水稀释至50mL。摇勾使其充分混合，并于30 min后在 650nm处测其吸光值。
[0022] 不同提取温度对单宁提取率的影响 取21个三角瓶，分为7组，每组3个平行，向其中加入1 g预处理后的原料，向每组三角瓶 中分别加入50%的乙醇30mL，用保鲜膜封口后分别放于20°C、30°C、40°C、50°C、60°C、70°C、 80°C的恒温水浴锅中浸提3 h。取出后用布氏漏斗真空抽滤，将滤液移入离心管中，3000 r/ min离心30 min。从提取温度为60°C的样品液中吸取lmL上清液，其余的每组都吸取2mL上清 液，置于盛有30mL蒸馏水的50mL容量瓶中，加2.5mLF-D试剂，再加5mL饱和碳酸钠溶液，加水 稀释至50mL。摇匀使其充分混合，并于30 min后在650nm处测其吸光值。
[0023] 不同提取时间对单宁提取率的影响 取15个三角瓶，分为5组，每组3个平行，向其中加入1 g预处理后的原料，向每组三角瓶 中分别加入50%的乙醇30mL，用保鲜膜封口后放于60°C的恒温水浴锅中分别浸提1 h、2 h、3 h、4 h、5 h。取出后用布氏漏斗真空抽滤，将滤液移入离心管中，3000r/min离心30 min。从 每个样品液中吸取2mL上清液，置于盛有30mL蒸馏水的50mL容量瓶中，加2.5mLF-D试剂，再 加5mL饱和碳酸钠溶液，加水稀释至50mL。摇勾使其充分混合，并于30 min后在650 nm处测 其吸光值。
[0024] 根据Box-Behnken中心组和的实验设计原理，综合单因素对单宁提取率影响的实 验结果，选取料液比、提取时间和提取温度3个因素的3个较优水平，在单因素试验基础上采 用3因素3水平的响应面分析法进行实验设计，得出数学模型，分析各因素之间的相互作用， 以及各因素与响应值之间的关系。实验因素及水平见表1。
[0025]表1单宁提取工艺响应面实验因素及水平
如图1所示