从小蓟中提取的苯乙醇苷类化合物及其制备方法和用图
【技术领域】
[0001] 本发明属于天然药物化学领域，涉及从小蓟中提取的苯乙醇苷类化合物及其制备 方法和用途。
【背景技术】
[0002] 小蓟(Cirsium setosum)为菊科蓟属植物，在民间俗称为刺角芽，又名刺儿菜，富 含多种营养物质。长期以来，它作为一种野菜，深受人们的喜爱。作为药食两用的野生植物， 小蓟广泛分布于中国大部分地区，在中欧、东欧、俄罗斯东部、日本、朝鲜等地区亦有分布。 小蓟性凉，味甘、苦，归心、肝经，具有凉血止血，散瘀解毒消痈之功效。研究发现小蓟中含有 黄酮类、生物碱类、三萜类和挥发油类等化学成分。现代药理研究表明小蓟具有凉血止血、 抗菌消炎、利胆、利尿和强心等作用。目前，人们对小蓟的化学成分研究还不够深入，需要进 一步挖掘其有效成分，明确其药理活性与有效成分之间的关系，为人类从天然植物中发现 新药奠定理论基础。
【发明内容】
[0003] 本发明所要解决的技术问题是提供一种从小蓟中提取的具有很好降脂活性和抗 氧化作用的苯乙醇苷类化合物，本发明还提供该化合物的制备方法。
[0004] 为解决上述技术问题，本发明所采取的技术方案是：
[0005] 如式（I)所示的苯乙醇苷类化合物，
[0007] 式（I)苯乙醇苷类化合物的化学名为：l〃-(7S)-7-(3-甲氧基-4-羟基苯基)-7_甲 氧乙基-3〃-a-L-吡喃鼠李糖-4〃-[ (8E)-7-( 3，4，5-三羟基苯基-8-丙烯酸酯）]。
[0008] 式（I)苯乙醇苷类化合物的制备方法，包括：取干燥的小蓟全株为原料，用70 % -95%乙醇回流提取2-4次，每次1-3小时，提取液过滤，合并滤液，浓缩得到总稠膏，总稠膏加 水混悬后依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇各萃取2-4次，分别浓缩得到石油醚部位萃取 物、乙酸乙酯部位萃取物和正丁醇部位萃取物；正丁醇部位萃取物上大孔吸附树脂，用 10 %-95 %乙醇进行梯度洗脱，收集40-70 %乙醇馏分，反复运用硅胶柱层析和Sephadex LH-20柱层析进行分离纯化，得到（I)苯乙醇苷类化合物。
[0009] 所述的小蓟全株和70 % -95 %乙醇的重量体积比为1:1 -2.5kg/L。
[0010]所述的滤液在30-50°C下低温浓缩至无醇味得到总稠膏。
[0011]所述的总稠膏和水按照体积比1:1进行混悬。
[0012]所述的大孔吸附树脂的型号为Diaion-IOl。
[0013]所述的40-70%乙醇馏分的分离纯化得到（I)苯乙醇苷类化合物的方法为:进行第 一次硅胶柱层析分离，第一次硅胶柱层析的洗脱液为石油醚-丙酮，石油醚-丙酮的体积比 为15:1-1:2;收集石油醚-丙酮3:1馏分，进行第二次硅胶柱层析，第二次硅胶柱层析的洗脱 液为石油醚-丙酮，石油醚-丙酮的体积比为6 : 1 - 2 : 1，收集石油醚-丙酮3 : 1馏分，上 SephadexLH-20柱，用85-95%甲醇洗脱，得到式（I)苯乙醇苷类化合物。
[0014]优选的，第一次硅胶柱层析采用100-200目硅胶;第二次硅胶柱层析采用200-300 目硅胶。
[0015] 发明人根据活性指导的分离方法，对式(I)化合物进行了多模型的药理活性筛选， 药理结果表明该化合物具有很好的降脂活性和抗氧化作用。故式（I)化合物可以应用于制 备降脂药物方面，尤其是制备减肥药物方面;也可以应用于制备抗氧化药物，尤其是制备自 由基清除剂药物方面；
[0016] 本发明式（I)化合物也可作为食品、药品或化妆品原料用于生产食品（如保健食 品）、药品和化妆品。
[0017] 本发明还包括一种组合物，其以式（I)化合物或其药学上可接受的盐为活性成分 或主要活性成分，辅以辅料制成。具体可辅以食品辅料制成食品（如保健食品等）、辅以药学 上可接受的载体制成药品、辅以化妆品辅料制成化妆品等。
[0018] 本发明的有益效果：
[0019] 本发明依据"药食同源"的原理，选取小蓟作为研究对象，采用现代提取分离技术， 简便有效地从小蓟中分离纯化得到一种新的苯乙醇苷类化合物，该化合物结构新颖，具有 很好的降脂活性和抗氧化作用，这为进一步开发疗效显著、毒副作用小的新型减肥药物和 抗氧化作用药物奠定了重要的理论基础。该化合物的提取分离工艺简单，操作方便，节约了 成本。
【附图说明】
[0020] 图1为本发明化合物的提取分离流程示意图；
[0021] 图2为本发明化合物的偶联相关图。
【具体实施方式】
[0022] 下面通过【具体实施方式】对本发明的技术方案作进一步说明。
[0023] 实施例1
[0024]如图1所示，取8kg干燥的小蓟整株植物为原料，用70 %的乙醇（18L X 2)提取2次， 每次1.5小时，提取液过滤，合并滤液，40°C下减压浓缩至无醇味得到总稠膏0.9kg。将所得 总稠膏和水按照体积比1:1混悬于适量水中，依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇各萃取3次， 分别得到石油醚部分萃取物83.5g，乙酸乙酯部分萃取物185.7g，正丁醇部分萃取物 238. lg。根据前期萃取物药理筛选结果，确定正丁醇部位萃取物为活性部位。将正丁醇部位 萃取物238. Ig上大孔吸附树脂柱(Diaion-IOl)，依次用10%、25%、45%、95%乙醇进行梯 度洗脱，得到A、B、C、D四种馏份;然后将C馏分拌适量硅胶（100-200目）进行硅胶柱层析分 离，用石油醚-丙酮(9:1、6 :1、3:1、2:1、1:1)进行洗脱，合并石油醚-丙酮(3:1)馏分再次上 200-300目的硅胶柱、用石油醚-丙酮(4:1、3:1、2:1)依次进行洗脱，最后合并石油醚-丙酮 (3:1)馏分上Sephadex LH-20柱，用85%甲醇洗脱，进行分离纯化，得到式（I)苯乙醇苷类化 物。
[0025] 实施例2
[0026]取12kg干燥的小蓟整株植物为原料，用85 %的乙醇（18L X 3)提取3次，每次2小时， 提取液过滤，合并滤液，45°C下减压浓缩至无醇味得到总稠膏1.3kg。将所得总稠膏和水按 照体积比1:1混悬于适量水中，依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇各萃取4次，分别得到石油 醚部分萃取物110.2g，乙酸乙酯部位萃取物202.5g，正丁醇部分萃取物280.4g。根据前期萃 取物药理筛选结果，确定正丁醇部分萃取物为活性部位。将正丁醇部位萃取物280.4g上大 孔吸附树脂柱(Diaion-IOl)，依次用15%、30%、60%、95%乙醇进行梯度洗脱，得到A、B、C、 D四种馏份;然后将C馏分拌适量硅胶（100-200目）进行硅胶柱层析分离，用石油醚-丙酮 (12:1、8:1、5 :1、3:1、1:1)依次进行洗脱，合并石油醚-丙酮(3:1)馏分再次上200-300目的 硅胶柱、用石油醚-丙酮(5:1、3:1、2:1)进行洗脱，合并石油醚-丙酮(3:1)馏分上Sephadex LH-20柱，用90%甲醇洗脱，进行分离纯化，得到式（I)苯乙醇苷类化物。
[0027] 实施例3
[0028]取15kg干燥的小蓟整株植物为原料，用95 %的乙醇(20L X 4)提取4次，每次3小时， 提取液过滤，合并滤液，48°C下减压浓缩至无醇味得得到总稠膏1.6kg。将所得总稠膏和水 按照体积比1:1混悬于适量水中，依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇各萃取4次，分别得到石 油醚部分萃取物156.4g，乙酸乙酯部分萃取物254.2g，正丁醇部分萃取物304.7g。根据前期 粗提物药理筛选结果，确定正丁醇部位萃取物为活性部位。将正丁醇部分萃取物304.7g上 大孔吸附树脂柱(Diaion-IOl)，依次用20%、40%、70%、95%乙醇进行梯度洗脱，得到A、B、 C、D四种馏份;然后将C馏分拌适量硅胶（100-200目）进行硅胶柱层析分离，用石油醚-丙酮 (15:1、7:1、5:1、3:1、1:1)依次进行洗脱，合并石油醚-丙酮(3:1)馏分再次上200-300目的 硅胶柱、用石油醚-丙酮(6:1、3:1、2:1)进行洗脱，合并石油醚-丙酮(3:1)馏分上Sephadex LH-20柱，用95%甲醇洗脱，进行分离纯化，得到式（I)苯乙醇苷类化物。
[0029]根据TLC、HPLC等检测手段和化合物的波谱数据，鉴定实施例1-3所得单体化合物 (I)为同一单体化合物，其为一个苯乙醇苷类化合物。
[0030] 化合物为黄色固体（甲醇），HR-ESI-MS