一种玫瑰香型精油的制备方法及其产品的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于生物工程领域，更具体地，设及一种玫瑰香型精油及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 玫瑰精油是一种从菩薇科玫瑰花瓣中提炼出的天然名贵香料，被誉为"液体黄 金"，含有香茅醇、香叶醇、芳精醇、β-苯乙醇等挥发性香味物质。其香气浓郁、具有减缓疲 劳、镇静安神、舒缓压力、开阔屯、智的功效，多作为高档天然食品添加剂、名贵化妆品与日化 产品，具有非常广阔的市场前景。
[0003] 目前市场上高档的玫瑰精油，其生产方法主要是从新鲜的玫瑰花瓣中提取，通常 采用水蒸气蒸馈法、有机溶剂浸提法。通过水蒸气蒸馈法提取的玫瑰精油，其得油率较低， 且由于高溫蒸汽的不良作用，所提取的精油色泽深，含有20%左右蜡质（即长链烧控），并带 有少量焦糊味。通过有机溶剂提取的精油杂质较多，0-苯乙醇含量高，精油品质不高。
[0004] 而且，天然玫瑰花瓣中含油量较低，W国际认可的保加利亚的玫瑰花计，通常只有 0.025%，即4000kg鲜花只能生产得到1kg玫瑰精油。更为重要的是玫瑰花的种植受到季节、 地域条件、花朵的采摘时间、人工采摘费用等因素的影响，我国精油的品质不稳定、生产成 本逐年升高。
[0005] 因此，大量、低成本的制备玫瑰精油或者具有相似香型和功能的玫瑰精油类似物 具有广泛的市场需求。
【发明内容】
[0006] 针对现有技术的W上缺陷或改进需求，本发明提供了一种玫瑰香型精油及其制 备方法，其目的在于通过微生物发酵法制备具有玫瑰香型和玫瑰精油类似功能的生物精 油，由此解决现有的玫瑰香型精油产量低、成本高或者效果不佳的技术问题。
[0007] 为实现上述目的，按照本发明的一个方面，提供了一种玫瑰香型精油的制备方法， 利用酵母菌进行发酵，将发酵结束的培养液经有机溶剂萃取、蒸馈后，即制得所述的玫瑰香 型精油;所述有机溶剂优选正己烧或石油酸。
[000引优选地，所述玫瑰香型精油的制备方法，其所述酵母菌其分类命名为 化emothec ium ashbyi i H4565，于2015年10月30日保藏于中国典型培养物保藏中屯、CCTCC， 地址为湖北省武汉市武汉大学，编号为CCTCC NO.Μ 2015655。
[0009] 优选地，所述玫瑰香型精油的制备方法，其包括w下步骤：
[0010] (1)将酵母菌接入培养基进行分级扩大培养，获得酵母菌种子液；
[0011] (2)将步骤（1)中获得的酵母菌种子液转种发酵培养，当发酵培养至20-3化后，向 培养液中添加2g/L至5g/L的活性炭；
[001^ (3)当培养液抑值回升至7.5至8.0之间且溶氧值回升至90% W上时，结束发酵，获 得发酵液；
[0013] (4)将步骤(3)中获得的发酵液进行固液分离，分离出活性炭，并采用有机溶剂洗 脱所述活性炭，获得洗脱液。
[0014] 优选地，所述玫瑰香型精油的制备方法，其包括W下步骤：
[0015] (5)将步骤(3)中获得的发酵液进行固液分离，分离出液相，并采用有机溶剂萃取 所述液相，获得萃取液。
[0016] 优选地，所述玫瑰香型精油的制备方法，其包括W下步骤：
[0017] (6)将步骤(4)中获得的洗脱液和步骤(5)中获得的萃取液合并，蒸发有机溶剂获 得油相；
[0018] (7)将步骤(6)获得的油相进行水蒸气蒸馈，即制得本发明提供的玫瑰香型精油。
[0019] 按照本发明的另一方面，提供了一种玫瑰香型精油，其特征在于，所述玫瑰香型 精油含有酵母菌代谢产物经有机溶剂提取后的挥发性成分。
[0020] 优选地，所述玫瑰香型精油，其含有质量比例3.24% -20.42 %的香茅醇、40.18 % - 74.09% 的香叶醇、2.19 %-8.43 % 的澄花醇、8.19 %-33.65 % 的β-苯乙醇、W 及0.79 %- 3.86 %的巧樣醒。
[0021] 优选地，所述玫瑰香型精油，其不含有碳数大于等于10的长链烧控。
[0022] 优选地，所述玫瑰香型精油，其经质谱检测含有微量成分:顺、反-玫瑰酸、合金欢 醇、下香酪、甲基下香酪、香叶酸、甲酸香叶醋、W及乙酸香叶醋。
[0023] 优选地，所述玫瑰香型精油，其经检测含有微量成分:β-月桂締、2-曹締、D-巧樣 締、化)-β-罗勒締、丫-祗品締、罗勒締、祗品油締、甲酸香草醋、甲酸香叶醋、W及甲基庚締 酬。
[0024] 总体而言，通过本发明所构思的W上技术方案与现有技术相比，能够取得下列有 益效果。
[0025] 本发明公开的一种由微生物发酵法制备的玫瑰香型精油，具有直接从玫瑰花瓣中 提取的玫瑰精油的香味，共有的主要组分有:香茅醇、香叶醇、澄花醇、0-苯乙醇、巧樣醒等， 运些组分的比例接近于保加利亚精油标准（IS09842_2003)。除了运些主要组份外，还具有 大量的微量呈香组分如：顺、反-玫瑰酸，合金欢醇，下香酪，甲基下香酪，香叶酸，甲酸香叶 醋，乙酸香叶醋等。采用微生物发酵制备成的玫瑰香型精油，能量产且品质稳定，解除了从 玫瑰花瓣中提取的精油受到季节、地域条件、花朵的采摘时间、人工采摘费用等因素的限 审IJ，同时解决了勾兑精油难W模拟玫瑰精油中天然含有的微量组分问题。
[0026] 本发明首次提出采用微生物发酵法制备玫瑰香型精油，较于从玫瑰花瓣中提取的 精油而言，本发明的玫瑰香型精油成本低，且生产过程不受地域、季节限制，品质稳定;较勾 兑的精油而言，本发明的玫瑰香型精油含有勾兑过程中难W满足的微量成分W及各组分之 间配比的要求，有望取代花瓣提取的玫瑰精油与勾兑的精油，弥补玫瑰精油的市场空缺， 推动相关产业的发展。
[0027] 除此W外，本发明提供的玫瑰香型精油不含长链蜡质，挥发性更强、纯度更高。
【附图说明】
[0028] 图1是本发明实施例1提供的玫瑰香型精油气相色谱检测结果；
[0029] 图2是本发明实施例2提供的玫瑰香型精油气相色谱检测结果；
[0030] 图3是本发明实施例3提供的玫瑰香型精油气相色谱检测结果。
【具体实施方式】
[0031] 为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，W下结合附图及实施例，对 本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用W解释本发明，并 不用于限定本发明。此外，下面所描述的本发明各个实施方式中所设及到的技术特征只要 彼此之间未构成冲突就可W相互组合。
[0032] 本发明提供的玫瑰香型精油的制备方法，采用酵母菌发酵法，将酵母菌代谢产物 采用有机溶剂提取后挥发有机溶剂，即制得所述玫瑰香型精油;所述有机溶剂优选正己烧 或石油酸。具体而言，所述方法包括W下步骤：
[0033] (1)将酵母菌接入培养基进行分级扩大培养，获得酵母菌种子液；
[0034] 所述酵母菌种子液按照如下方法获得：
[0035] (1-1)将冻干保藏的酵母菌接入已灭菌的一级种子培养基，一级种子培养基组成 为(g/L):葡萄糖10、蛋白腺4、W及K2HP化0.5，接种量为5 %，培养20至40小时，获得一级种 子液；
[0036] (1-2)将步骤（1-1)中获得的一级种子液，接入二级种子培养基，二级种子培养基 组成为(g/L):葡萄糖15、蛋白腺6、W及拉册化0.5，接种量为5 %，培养20至30小时，获得酵 母菌种子液。
[0037] (2)将步骤(1)中获得的酵母菌种子液转种发酵培养，当发酵培养至20-3化后，向 培养液中添加2g/L至5g/L的活性炭;发酵培养基组成为(g/L):薦糖20、蛋白腺6、K2HP化1、 W及班巧酸钢2,接种量为5%。
[003引（3)当所述培养液pH值回升至7.5至8.0之间且溶氧值回升至90% W上时，结束发 酵，获得发酵液；
[0039] (4)将步骤(3)中获得的发酵液进行固液分离，分离出活性炭，并采用有机溶剂洗 脱所述活性炭，获得洗脱液。
[0040] (5)将步骤(3)中获得的发酵液进行固液分离，分离出液相，并采用有机溶剂萃取 所述液相，获得萃取液。
[0041] (6)将步骤(4)中获得的洗脱液和步骤(5)中获得的萃取液蒸发有机溶剂并合并获 得油相。
[0042] (7)将步骤(6)获得的油相进行水蒸气蒸馈，即制得本发明提供的玫瑰香型精油。
[0043] 优选地，所述酵母菌其分类命名为Elremothecium ashbyii H4565,于2015年10月 30日保藏于中国典型培养物保藏中屯、CCTCC，编号为CCTCC NO.Μ 2015655。
[0044] 所述酵母菌是在研究阿舒假囊酵母发酵生产核黄素中发现的，通过对能产玫瑰花 香味物质的菌株进行紫外-亚硝基脈诱变后定向筛选后得到的。
[0045] 按照上述方法制备的玫瑰香型精油，具有从玫瑰花中提取的玫瑰精油香味，该精 油具有玫瑰精油的主要组成成分和相似的微量成分，由香叶醇、香茅醇、澄花醇、β-苯乙醇 等主要成分W及顺、反-玫瑰酸，合金欢醇，下香酪，甲基下香酪，香叶酸，甲酸香叶醋，乙酸 香叶醋等重要的微量成分组成。
[0046] 具体而言，本发明提供的玫瑰香型精油，含有质量比例3.24%-20.42%的香茅醇、 40.18%-74.09%的香叶醇、2.19%-8.43%的澄花醇、8.19%-33.65%的护苯乙醇、^及 0.79%-3.86%的巧樣醒，经质谱检测还含有微量顺、反-玫瑰酸、合金欢醇、下香酪、甲基下 香酪、香叶酸、甲酸香叶醋、W及乙酸香叶醋;尤其需要指出，本发明提供的玫瑰香型精油， 为酵母菌代谢产物经有机溶剂提取的挥发性成分，因此其纯度较高，几乎不含有玫瑰精油 中的碳数大于或等于10的长链烧控。
[0047] W下为实施例：
[004引实施例1
[0049] -种玫瑰香型精油的制备方法，具体包括W下步骤：
[0050] (1)将酵母菌接入培养基进行分级扩大培养，获得酵母菌种子液：
[0051] (1-1)将冻干保藏的酵母菌液接入已灭菌的一级种子培养基，一级种子培养基组 成为(g/L):葡萄糖10、蛋白腺4、W及K2HP化0.5，接种量为5 %，培养20至40小时，获得一级 种子液；
[0052] 所述酵母菌其分类命名为化emothecium ashbyii H4565,于2015年10月30日保藏 于中国典型培养物保藏中屯、CCTCC，编号为CCTCC N0.M 2015655。
[0053] (1