一种用于处理病死猪的生物发酵菌剂及制备方法
【专利摘要】本发明公开了一种用于处理病死猪的生物发酵菌剂及制备方法，该生物发酵菌剂包括以下重量份数的菌种：酿酒酵母菌10?20份、枯草芽孢杆菌15?25份、苏云金杆菌5?10份、放线菌20?30份、黑曲霉8?15份和米曲霉4?8份。本发明将多种微生物菌种制成用于处理病死猪的生物发酵菌剂，各菌种之间配比合理，协同作用好，生物菌剂有效活菌数达到2.0×109cfu/g，死猪肌肉组织彻底分解时间为15天左右，所有有机物基本分解完毕的时间需要10天左右，能够实现病死猪环保、无害化处理。
【专利说明】
一种用于处理病死猪的生物发酵菌剂及制备方法
技术领域
[0001]本发明涉及病死动物无害化处理技术领域，具体是一种用于处理病死猪的生物发酵菌剂及制备方法。
【背景技术】
[0002]我国是畜牧产业大国，养殖规模居世界前列，生猪年饲养量达12亿头左右。生猪养殖过程中，疾病是造成其死亡的最大诱因之一，据资料显示，我国每年因病死亡的猪只约占养殖总数的8-12%。由此可见，我国每年须无害化处理的病死猪数量惊人。当前对病死猪进行无害化处理的主要措施包括深埋、焚烧、化制、生物发酵等，在实际应用过程中，深埋需要较大的场地，对规模化养猪场来说，这种处理措施不现实;焚烧处理由于耗能高，存在二次污染，且没有对资源进行循环利用。因此，这两种处理措施在实际生产中较少采用。高温化制和生物发酵因其更适用于规模化养殖场，且病死猪经处理后可以制成工业用油、肥料等，可以实现资源的循环利用，这两种处理措施在实际生产中应用更广泛。
[0003]病死猪生物发酵技术具备以下优点:①无害化处理周期相对较短。②生物降解病死猪的生产过程中对环境不产生二次污染。③无害化处理产物可回收利用，最终产品被加工成饲料原料，可用于非食用性动物(毛皮类经济动物)。④最终产品基本符合饲料用肉骨粉国家标准，且营养价值较高，具有良好的经济价值和市场前景。在病死猪生物发酵技术中选择合适生物发酵菌剂不仅能缩短降解的时间，还能提高降解率。因此，本发明将提供一种用于病死猪处理的高效生物发酵菌剂。
【发明内容】
[0004]本发明中针对现有病死猪处理存在的问题，提供一种用于处理病死猪的生物发酵菌剂及制备方法。该生物发酵菌剂具有各组分协调性好、配比合理、降解时间短、降解率高、原料来源广泛、成本低等优点。
[0005]为了实现以上目的，本发明是通过以下技术方案实现:
[0006]—种用于处理病死猪的生物发酵菌剂，包括以下重量份数的菌种:酿酒酵母菌(Saccharomyces。6代￥丨8丨&6)10-20份、枯草芽抱杆菌(1^(3；[11118 subtil is) 15-25份、苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis)5-10份、放线菌(Actinobacteria)20-30份、黑曲霉(Aspergillus niger)8_15份和米曲霉(Aspergillus oryzae)4_8份。
[0007]优选地，以上所述用于处理病死猪的生物发酵菌剂的制备方法，包括以下步骤:
[0008](I)—级种子培养:将经过菌种活化的酿酒酵母菌、枯草芽孢杆菌、苏云金杆菌、放线菌、黑曲霉和米曲霉分别接种至PDA培养基，其中培养控制温度在25-28°C、pH为5.5-7.5，一级种子培养时间的控制:酿酒酵母菌在48-72h、枯草芽孢杆菌36-48h、苏云金杆菌36-72h、放线菌48-72h、黑曲霉72-96h和米曲霉48_72h，然后往培养基中分别加入无菌水，在转速为150-250r/min下振荡10-20min，得重量浓度为10-20%的一级种子悬液；
[0009](2) 二级发酵培养:将一级种子悬液以3-5%的接种量分别接种至三角瓶培养基中，其中酿酒酵母菌用YI3D培养基培养48-72h、枯草芽孢杆菌用LB培养基培养48-72h、苏云金杆菌用LB培养基培养72-96h、放线菌用高氏一号培养基培养48-72h、黑曲霉用高氏一号培养基培养72-96h和米曲霉用高氏一号培养基培养48-72h;
[0010](3)单一菌剂的制备:将酿酒酵母菌、枯草芽孢杆菌、苏云金杆菌、放线菌、黑曲霉份和米曲霉，分别放入发酵培养基中，在温度为25-28 0C下、pH为5.5-7.5下进行摇床培养3-5天，当菌种含量达到5-10亿个/mL时，将液态发酵菌剂分别按照常规方法经过浓缩、吸附、干燥，即得单一的各菌剂；
[0011](4)配制生物发酵菌剂:按照以下重量份数称取步骤(3)的菌剂:酿酒酵母菌10-20份、枯草芽孢杆菌15-25份、苏云金杆菌5-10份、放线菌20-30份、黑曲霉8-15份和米曲霉4-8份，混合均匀，包装，即可得到生物发酵菌剂。
[0012]以上所述Yro培养基、LB培养基、高氏一号培养基均按常规的配制方法制备。
[0013]优选地，以上步骤(3)所述发酵培养基由以下原料组成:牛肉膏15份、蔗糖10份、蛋白胨8份、玉米粉10份、麸皮5份、葡萄糖3份、硫代硫酸钠0.5份、磷酸氢钾0.5份、硫酸镁0.3份和氯化钠0.8份。
[0014]与现有技术相比，本发明的优点和有益效果:
[0015]1、本发明将多种微生物菌种制成用于处理病死猪的生物发酵菌剂，各菌种之间配比合理，协同作用好，能够快速、全面降解死猪的尸体，能够实现病死猪环保、无害化处理。
[0016]2、本发明提供的生物发酵菌剂不仅能够降解病死猪的尸体，还能将细菌、病毒等病原微生物和寄生虫卵全部杀死，处理彻底，不留疫情隐患。
[0017]3、本发明提供的生物菌剂有效活菌数达到2.0 X 109cfu/g，死猪肌肉组织彻底分解时间为15天左右，所有有机物基本分解完毕的时间需要10天左右，与常用的生物菌剂相比，分解时间可减少5天左右。
[0018]4、本发明的生物发酵菌剂还具有原料来源广泛、成本低廉、制备工艺简单、生产效率高等优点，容易实现工业化生产。
【具体实施方式】
[0019]下面将结合具体实施例对本发明进一步说明，但不限于本发明的保护范围。
[0020]实施例1
[0021]一种用于处理病死猪的生物发酵菌剂，由以下菌种组成:酿酒酵母菌10kg、枯草芽孢杆菌20kg、苏云金杆菌5kg、放线菌25kg、黑曲霉1kg和米曲霉4kg。
[0022]其制备方法，包括以下步骤:
[0023](I) 一级种子培养:将经过菌种活化的酿酒酵母菌、枯草芽孢杆菌、苏云金杆菌、放线菌、黑曲霉和米曲霉分别接种至I3DA培养基，其中培养控制温度在25°C、pH为6.0，一级种子培养的时间控制:酿酒酵母菌72h、枯草芽孢杆菌36h、苏云金杆菌48h、放线菌60h、黑曲霉72h和米曲霉48h，然后往培养基中分别加入无菌水，在转速为150r/min下振荡20min，得重量浓度为15%的一级种子悬液；
[0024](2)二级发酵培养:将一级种子悬液以3%的接种量分别接种至三角瓶培养基中，其中酿酒酵母菌用YPD培养基培养72h、枯草芽孢杆菌用LB培养基培养60h、苏云金杆菌用LB培养基培养72h、放线菌用高氏一号培养基培养60h、黑曲霉用高氏一号培养基培养72h和米曲霉用高氏一号培养基培养72h;
[0025](3)单一菌剂的制备:将酿酒酵母菌、枯草芽孢杆菌、苏云金杆菌、放线菌、黑曲霉份和米曲霉，分别放入发酵培养基中，在温度为25°C下、pH为5.5下进行摇床培养4天，当菌种含量达到5亿个/mL时，将液态发酵菌剂分别按照常规方法经过浓缩、吸附、干燥，即得单一的各菌剂；
[0026](4)配制生物发酵菌剂:按照以下重量份数称取步骤(3)的菌剂:酿酒酵母菌10kg、枯草芽孢杆菌20kg、苏云金杆菌5kg、放线菌25kg、黑曲霉1kg和米曲霉4kg，混合均匀，包装，即可得到生物发酵菌剂。
[0027]本实施例得到生物发酵菌剂应用在病死猪处理时，死猪肌肉组织彻底分解时间为16天，所有有机物基本分解完毕的时间需要12天。
[0028]实施例2
[0029]一种用于处理病死猪的生物发酵菌剂，由以下菌种组成:酿酒酵母菌20kg、枯草芽孢杆菌15kg、苏云金杆菌I Okg、放线菌20kg、黑曲霉8kg和米曲霉8kg。
[0030]其制备方法，包括以下步骤:
[0031](I) 一级种子培养:将经过菌种活化的酿酒酵母菌、枯草芽孢杆菌、苏云金杆菌、放线菌、黑曲霉和米曲霉分别接种至I3DA培养基，其中培养控制温度在260C、pH为5.0，一级种子培养的时间控制:酿酒酵母菌培养时间控制在60h、枯草芽孢杆菌48h、苏云金杆菌36h、放线菌48h、黑曲霉72h和米曲霉60h，然后分别往培养基中加入无菌水，在转速为200r/min下振荡15min，得重量浓度为1 %的一级种子悬液；
[0032](2)二级发酵培养:将一级种子悬液以5%的接种量分别接种至三角瓶培养基中，其中酿酒酵母菌用YPD培养基培养60h、枯草芽孢杆菌用LB培养基培养48h、苏云金杆菌用LB培养基培养96h、放线菌用高氏一号培养基培养72h、黑曲霉用高氏一号培养基培养96h和米曲霉用高氏一号培养基培养60h ；
[0033](3)单一菌剂的制备:将酿酒酵母菌、枯草芽孢杆菌、苏云金杆菌、放线菌、黑曲霉份和米曲霉，分别放入发酵培养基中，在温度为26°C下、pH为5.5下进行摇床培养5天，当菌种含量达到10亿个/mL时，将液态发酵菌剂分别按照常规方法经过浓缩、吸附、干燥，即得单一的各菌剂；
[0034](4)配制生物发酵菌剂:按照以下重量份数称取步骤(3)的菌剂:酿酒酵母菌20kg、枯草芽孢杆菌15kg、苏云金杆菌1kg、放线菌20kg、黑曲霉8kg和米曲霉8kg，混合均匀，包装，即可得到生物发酵菌剂。
[0035]本实施例得到生物发酵菌剂应用在病死猪处理时，死猪肌肉组织彻底分解时间为13天，所有有机物基本分解完毕的时间需要9天。
[0036]实施例3
[0037]一种用于处理病死猪的生物发酵菌剂，由以下菌种组成:酿酒酵母菌15kg、枯草芽孢杆菌25kg、苏云金杆菌8kg、放线菌30kg、黑曲霉15kg和米曲霉6kg。
[0038]其制备方法，包括以下步骤:
[0039](I) 一级种子培养:将经过菌种活化的酿酒酵母菌、枯草芽孢杆菌、苏云金杆菌、放线菌、黑曲霉和米曲霉分别接种至I3DA培养基，其中培养控制温度在280C、pH为7.5，一级种子培养的时间控制:酿酒酵母菌48h、枯草芽孢杆菌48h、苏云金杆菌36h、放线菌72h、黑曲霉96h和米曲霉72h，然后分别往培养基中加入无菌水，在转速为250r/min下振荡lOmin，得重量浓度为20%的一级种子悬液；
[0040](2)二级发酵培养:将一级种子悬液以5%的接种量分别接种至三角瓶培养基中，其中酿酒酵母菌用YPD培养基培养48h、枯草芽孢杆菌用LB培养基培养48h、苏云金杆菌用LB培养基培养72h、放线菌用高氏一号培养基培养48h、黑曲霉用高氏一号培养基培养72h和米曲霉用高氏一号培养基培养48h ；
[0041](3)单一菌剂的制备:将酿酒酵母菌、枯草芽孢杆菌、苏云金杆菌、放线菌、黑曲霉份和米曲霉，分别放入发酵培养基中，在温度为28°C下、pH为7.5下进行摇床培养3天，当菌种含量达到8亿个/mL时，将液态发酵菌剂分别按照常规方法经过浓缩、吸附、干燥，即得单一的各菌剂；
[0042](4)配制生物发酵菌剂:按照以下重量份数称取步骤(3)的菌剂:酿酒酵母菌20kg、枯草芽孢杆菌15kg、苏云金杆菌1kg、放线菌20kg、黑曲霉8kg和米曲霉8kg，混合均匀，包装，即可得到生物发酵菌剂。
[0043]本实施例得到生物发酵菌剂应用在病死猪处理时，死猪肌肉组织彻底分解时间为15天，所有有机物基本分解完毕的时间需要9天。
【主权项】
1.一种用于处理病死猪的生物发酵菌剂，其特征在于:包括以下重量份数的菌种:酿酒酵母菌10-20份、枯草芽孢杆菌15-25份、苏云金杆菌5-10份、放线菌20-30份、黑曲霉8-15份和米曲霉4-8份。2.根据权利要求1所述一种用于处理病死猪的生物发酵菌剂的制备方法，其特征在于:包括以下步骤: (1)一级种子培养:将经过菌种活化的酿酒酵母菌、枯草芽孢杆菌、苏云金杆菌、放线菌、黑曲霉和米曲霉分别接种至PDA培养基，其中培养控制温度在25-28°C、pH为5.5_7.5，一级种子培养时间的控制:酿酒酵母菌48-72h、枯草芽孢杆菌36-48h、苏云金杆菌36-72h、放线菌48-72h、黑曲霉72-96h和米曲霉48-72h，然后分别往培养基中加入无菌水，在转速为150-250r/min下振荡10-20min，得重量浓度为10-20%的一级种子悬液； (2)二级发酵培养:将一级种子悬液以3-5%的接种量分别接种至三角瓶培养基中，其中酿酒酵母菌用YB)培养基培养48-72h、枯草芽孢杆菌用LB培养基培养48-72h、苏云金杆菌用LB培养基培养72-96h、放线菌用高氏一号培养基培养48-72h、黑曲霉用高氏一号培养基培养72-96h和米曲霉用高氏一号培养基培养48-72h; (3)单一菌剂的制备:将酿酒酵母菌、枯草芽孢杆菌、苏云金杆菌、放线菌、黑曲霉份和米曲霉，分别放入发酵培养基中，在温度为25-28°C下、pH为5.5-7.5下进行摇床培养3-5天，当菌种含量达到5-10亿个/mL时，将液态发酵菌剂分别按照常规方法经过浓缩、吸附、干燥，即得单一的各菌剂； (4)配制生物发酵菌剂:按照以下重量份数称取步骤(3)的菌剂:酿酒酵母菌10-20份、枯草芽孢杆菌15-25份、苏云金杆菌5-10份、放线菌20-30份、黑曲霉8_15份和米曲霉4_8份，混合均匀，包装，即可得到生物发酵菌剂。3.根据权利要求2所述一种用于处理病死猪的生物发酵菌剂的制备方法，其特征在于:步骤(3)所述发酵培养基由以下原料组成:牛肉膏15份、蔗糖10份、蛋白胨8份、玉米粉10份、麸皮5份、葡萄糖3份、硫代硫酸钠0.5份、磷酸氢钾0.5份、硫酸镁0.3份和氯化钠0.8份。
【文档编号】C12R1/01GK105861386SQ201610351195
【公开日】2016年8月17日
【申请日】2016年5月25日
【发明人】苏林, 戴光文, 黄东玲, 邹超贤
【申请人】广西南宁市圣农科技开发有限公司