一种简便提取动物蹄甲多肽的方法
【专利摘要】本发明公开了一种简便提取动物蹄甲多肽的方法，试管中称取氨基甲酸铵，加入动物蹄甲粉末，动物蹄甲和氨基甲酸铵的重量比为5?18：1，用橡皮塞密封试管，在140?190℃下加热10?15分钟，动物蹄甲全部溶解后得到动物蹄甲溶液，降温，动物蹄甲溶液凝固，粉碎，再加入95%乙醇让蹄甲多肽析出，氨基甲酸铵重量：乙醇体积=1：5，过滤，用乙醇或蒸馏水清洗沉淀，加热干燥，得到粉末状的蹄甲多肽，滤液旋转蒸发，回收乙醇。本发明操作步骤简单，成本低，耗时短。
【专利说明】
一种简便提取动物蹄甲多肽的方法
技术领域
[0001] 本发明属于动物蹄甲深加工的技术领域，具体涉及一种简便提取动物蹄甲多肽的 方法。
【背景技术】
[0002] 检索到如下4篇专利文献，专利文献1(申请号为201110315457.8)记载了一种蹄甲 肽的提取方法，该方法采用健康猪蹄甲为原料，经过升温蒸煮、烘干、粉碎机粉碎、蹄甲粉配 水、升温蒸煮、酶解、灭酶、活性炭脱色、膜分离，将得到的滤液经干燥后即获蹄甲肽的技术； 专利文献2(申请号201110084644.X)记载了一种蹄甲多肽的复合水解制备方法，是将经过 干燥和粉碎后的蹄甲原料，在碱溶液中进行温和的部分水解;然后使用蛋白水解酶进一步 水解;制得蹄甲多肽产品。其技术特点在于采用碱液和蛋白水解酶双重复合水解方法制备 蹄甲多肽;专利文献3(申请号200910192431.1)记载了一种动物蹄甲提取物的制备方法，具 体的说是一种采用酶解方法制备蹄甲提取物的生产工艺，酶解所得酶解液，结合喷雾干燥 的方法制备蹄甲多肽提取物，其特征在于将猪、羊或牛的蹄甲洗净、除杂、酶解后，精制加工 制成多肽提取液，加入生物活性保护剂后喷雾干燥制成蹄甲提取物干粉的技术;专利文献4 (申请号200910230964.4)记载了一种蹄甲多肽的制备方法，该方法属于一种药物的制备方 法，所述的方法是原料处理、提取、浓缩、烘干、粉碎、制得蹄甲多肽的技术。
[0003] 以上方法从蹄甲中分离（提取）蹄甲肽时，使用酸化剂、还原剂等药品以及蛋白酶 等生物活性试剂。缺点主要有所需耗材多，成本高;.g.操作时间长，除去试剂残留需要 较长时间，并且有些成分长时间也很难去除;Γ|)操作过程复杂，以上蹄甲多肽的分离(提取） 需要复杂的操作步骤，需要具有较强专业知识的专业技术人员才可完成。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的在于克服现有技术的不足，并提供一种使用热的氨基甲酸铵溶液来 处理动物蹄甲简便提取动物蹄甲多肽的方法，它不使用酸化剂、还原剂、表面活性剂和酶等 试剂，操作步骤简单，成本低，耗时短。
[0005] 本发明的技术方案如下： 一种简便提取动物蹄甲多肽的方法，试管中称取氨基甲酸铵，加入动物蹄甲粉末，动物 蹄甲粉末和氨基甲酸铵的重量比为5-18:1，用橡皮塞密封试管，在140-190°C下加热10-15 分钟，动物蹄甲全部溶解后得到动物蹄甲溶液，降温，动物蹄甲溶液凝固，粉碎，然后按氨基 甲酸铵重量：乙醇体积=1:5,加入95%乙醇让蹄甲多肽析出，过滤，用乙醇或蒸馏水清洗沉 淀，加热干燥，得到粉末状的蹄甲多肽，滤液旋转蒸发，回收乙醇。
[0006] 优选，动物蹄甲和氨基甲酸铵的重量比为8-13:1。
[0007] 优选，在150-170 °C下加热得到动物蹄甲溶液。
[0008] 本发明的优点在于：1、据实验结果，热的氨基甲酸铵溶液溶解动物蹄甲的能力很 强，不使用酸化剂、还原剂、表面活性剂等试剂，也可以在短时间内充分溶解蹄甲，可以节省 提取蹄甲多肽的试剂费用和不需要复杂的试剂除去过程;2、只使用热的氨基甲酸铵溶液就 可以溶解动物蹄甲并可以提取蹄甲多肽，溶解过程很简单;3、本发明加热氨基甲酸铵的方 法没有特别的要求，油浴加热，微波炉加热都可以；4、本发明从动物蹄甲中分离蹄甲多肽 时，不使用酸化剂、还原剂、表面活性剂和酶等试剂，操作步骤简单，成本低，耗时短。
[0009]【附图说明】图1是本发明工艺流程图。
[0010]【具体实施方式】下面结合附图对本发明作进一步说明。
[0011] 实施例1，由图1可知，一种简便提取动物蹄甲多肽的方法，试管中称取氨基甲酸 铵，加入驴蹄甲粉末，驴蹄甲粉末和氨基甲酸铵的重量比为5:1，用橡皮塞密封试管，在140 °C下加热15分钟，驴蹄甲全部溶解后得到驴蹄甲溶液，降温，驴蹄甲溶液凝固，粉碎，然后按 氨基甲酸铵重量：乙醇体积=1:5,加入95%乙醇让蹄甲多肽析出，过滤，用乙醇或蒸馏水清洗 沉淀，加热干燥，得到粉末状的蹄甲多肽，滤液旋转蒸发，回收乙醇，蹄甲多肽提取率为 91.21%〇
[0012] 实施例2,由图1可知，一种简便提取动物蹄甲多肽的方法，试管中称取氨基甲酸 铵，加入驴蹄甲粉末，驴蹄甲粉末和氨基甲酸铵的重量比为7 :1，用橡皮塞密封试管，在150 °C下加热11分钟，驴蹄甲全部溶解后得到驴蹄甲溶液，降温，驴蹄甲溶液凝固，粉碎，然后按 氨基甲酸铵重量：乙醇体积=1:5,加入95%乙醇让蹄甲多肽析出，过滤，用乙醇或蒸馏水清洗 沉淀，加热干燥，得到粉末状的蹄甲多肽，滤液旋转蒸发，回收乙醇，蹄甲多肽提取率为 91.51%〇
[0013] 实施例3,由图1可知，一种简便提取动物蹄甲多肽的方法，试管中称取氨基甲酸 铵，加入猪蹄甲粉末，猪蹄甲粉末和氨基甲酸铵的重量比为18:1，用橡皮塞密封试管，在190 °C下加热10分钟，猪蹄甲全部溶解后得到猪蹄甲溶液，降温，猪蹄甲溶液凝固，粉碎，然后按 氨基甲酸铵重量：乙醇体积=1:5,加入95%乙醇让蹄甲多肽析出，过滤，用乙醇或蒸馏水清洗 沉淀，加热干燥，得到粉末状的蹄甲多肽，滤液旋转蒸发，回收乙醇，蹄甲多肽提取率为 91.17%〇
[0014] 实施例4,由图1可知，一种简便提取动物蹄甲多肽的方法，试管中称取氨基甲酸 铵，加入猪蹄甲粉末，猪蹄甲粉末和氨基甲酸铵的重量比为16:1，用橡皮塞密封试管，在180 °C下加热10分钟，猪蹄甲全部溶解后得到猪蹄甲溶液，降温，猪蹄甲溶液凝固，粉碎，然后按 氨基甲酸铵重量：乙醇体积=1:5,加入95%乙醇让蹄甲多肽析出，过滤，用乙醇或蒸馏水清洗 沉淀，加热干燥，得到粉末状的蹄甲多肽，滤液旋转蒸发，回收乙醇，蹄甲多肽提取率为 91.33%〇
[0015] 实施例5,由图1可知，一种简便提取动物蹄甲多肽的方法，试管中称取氨基甲酸 铵，加入羊蹄甲粉末，羊蹄甲粉末和氨基甲酸铵的重量比为8:1，用橡皮塞密封试管，在150 °C下加热12分钟，羊蹄甲全部溶解后得到羊蹄甲溶液，降温，羊蹄甲溶液凝固，粉碎，然后按 氨基甲酸铵重量：乙醇体积=1:5,加入95%乙醇让蹄甲多肽析出，过滤，用乙醇或蒸馏水清洗 沉淀，加热干燥，得到粉末状的蹄甲多肽，滤液旋转蒸发，回收乙醇，蹄甲多肽提取率为 93.25%〇
[0016] 实施例6,由图1可知，一种简便提取动物蹄甲多肽的方法，试管中称取氨基甲酸 铵，加入羊蹄甲粉末，羊蹄甲粉末和氨基甲酸铵的重量比为10:1，用橡皮塞密封试管，在160 °C下加热13分钟，羊蹄甲全部溶解后得到羊蹄甲溶液，降温，羊蹄甲溶液凝固，粉碎，然后按 氨基甲酸铵重量：乙醇体积=1:5,加入95%乙醇让蹄甲多肽析出，过滤，用乙醇或蒸馏水清洗 沉淀，加热干燥，得到粉末状的蹄甲多肽，滤液旋转蒸发，回收乙醇，蹄甲多肽提取率为 93.68%〇
[0017] 实施例7,由图1可知，一种简便提取动物蹄甲多肽的方法，试管中称取氨基甲酸 铵，加入马蹄甲粉末，马蹄甲粉末和氨基甲酸铵的重量比为13:1，用橡皮塞密封试管，在170 °C下加热13分钟，马蹄甲全部溶解后得到马蹄甲溶液，降温，马蹄甲溶液凝固，粉碎，然后按 氨基甲酸铵重量：乙醇体积=1:5,加入95%乙醇让蹄甲多肽析出，过滤，用乙醇或蒸馏水清洗 沉淀，加热干燥，得到粉末状的蹄甲多肽，滤液旋转蒸发，回收乙醇，蹄甲多肽提取率为 93.58%〇
[0018] 实施例8,由图1可知，一种简便提取动物蹄甲多肽的方法，试管中称取氨基甲酸 铵，加入马蹄甲粉末，马蹄甲粉末和氨基甲酸铵的重量比为11:1，用橡皮塞密封试管，在165 °C下加热15分钟，马蹄甲全部溶解后得到马蹄甲溶液，降温，马蹄甲溶液凝固，粉碎，然后按 氨基甲酸铵重量：乙醇体积=1:5,加入95%乙醇让蹄甲多肽析出，过滤，用乙醇或蒸馏水清洗 沉淀，加热干燥，得到粉末状的蹄甲多肽，滤液旋转蒸发，回收乙醇，蹄甲多肽提取率为 93.79%〇
[0019] 本发明氨基甲酸铵溶液当中溶解蹄甲的机理如下：以驴蹄甲为例，这些多肽分子 主要是以二硫键和氢键结合的，氨基甲酸铵切断多肽的氢键让多肽变性，即氨基甲酸铵作 为溶媒切断多肽氢键的同时，结合多肽中自由的氨基和羧基，提高了氨基甲酸铵当中的溶 解度。另外，氨基甲酸铵分解产生的氨侵入多肽的结晶领域，扩大了多肽分子间距离，氨基 甲酸铵分子更容易侵入多肽分子当中，促进多肽的溶解。
【主权项】
1. 一种简便提取动物蹄甲多肽的方法，其特征在于采用如下步骤，试管中称取氨基甲 酸铵，加入动物蹄甲粉末，动物蹄甲和氨基甲酸铵的重量比为5-18:1，用橡皮塞密封试管， 在140-190°C下加热10-15分钟，动物蹄甲全部溶解后得到动物蹄甲溶液，降温，动物蹄甲溶 液凝固，粉碎，再加入95%乙醇让蹄甲多肽析出，氨基甲酸铵重量：乙醇体积=1:5,过滤，用乙 醇或蒸馏水清洗沉淀，加热干燥，得到粉末状的蹄甲多肽，滤液旋转蒸发，回收乙醇。2. 如权利要求1所述的一种简便提取动物蹄甲多肽的方法，其特征在于:动物蹄甲和氨 基甲酸铵的重量比为8-13:1。3. 如权利要求1所述的一种简便提取动物蹄甲多肽的方法，其特征在于:在150-170°C 下加热得到动物蹄甲溶液。
【文档编号】C07K1/36GK105949275SQ201610448651
【公开日】2016年9月21日
【申请日】2016年6月21日
【发明人】萨如拉, 陈建兴
【申请人】赤峰学院