1.本发明涉及茶叶提取物技术领域，更具体地说，涉及一种具有降血糖作用的黄大茶活性化合物组合的提取方法。
背景技术：
2.糖尿病是一种以高血糖为特征的代谢性疾病。高血糖则是由于胰岛素分泌缺陷或其生物作用受损，或两者兼有引起。长期存在的高血糖，导致各种组织，特别是眼、肾、心脏、血管、神经的慢性损害、功能障碍。目前尚无根治糖尿病的方法，但通过多种治疗手段可以控制好糖尿病。主要包括5个方面：糖尿病患者的教育，自我监测血糖，饮食治疗，运动治疗和药物治疗。
3.茶叶中富含有多种生理活性物质，具有良好的药理作用和营养价值。茶所具有独特的营养与保健功能使其成为世界三大饮料之一,茶产业亦被称为健康产业。随着科技的发展,茶树资源中有效成分提取技术、新功能拓展以及新产品开发等许多方面的研究成果丰硕,这将加速茶树资源的综合利用。
4.黄大茶，老干烘（又名老干烘）：产生与安徽省霍山县六安一带．创制于明代隆庆年间，遂传入莱芜。其叶大，梗长，汤色浓重，具有强烈的老火香；外形梗壮叶肥，叶片成条，梗叶相连形似钓鱼钩，梗叶金黄显褐，叶底黄中显赫，色泽油润，汤色深黄显褐，滋味浓厚醇和，具有高爽的焦香。除了有独特的茶香之外，还有多种保健功能。其中具有降血糖作用的活性化合物n-乙基-2-吡咯烷酮取代的黄烷-3-醇类物质（简称epsfs）可以通过抑制葡萄糖水解酶从而降低血糖水平。现有技术中对epsfs的提取存在一定困难。
技术实现要素：
5.本发明的目的在于提供一种具有降血糖作用的黄大茶活性化合物组合的提取方法，用以解决上述背景技术中存在的技术问题。
6.本发明技术方案提供一种具有降血糖作用的黄大茶活性化合物组合的提取方法，包括如下步骤：s1：称取市场购买的黄大茶样品500g，以1:5的茶水比加入沸水，并在磁力搅拌器下搅拌，滤出茶渣，得到黄大茶茶汤a；s2：将1l无水乙醇加入黄大茶茶汤a中，静置10-14h，再用纱布将茶汤过滤，滤出沉淀物，上清液即为黄大茶茶汤b；s3：将黄大茶茶汤b减压浓缩去除乙醇后加入纯水复溶，加入石油醚，充分混合后再加入乙酸乙酯进行萃取，得到萃取液c；s4：将萃取液c减压浓缩，等有机溶剂挥发之后，置于冷冻干燥机中冻干，再加入纯水复溶后作为母液d；s5：母液d稀释后，用高效液相色谱法进样，接100针后将每个组分通过减压浓缩蒸干，再加入纯水复溶定容至10ml，即为所要提取的活性化合物。
7.在一个优选地实施例中，s1中磁力搅拌器最适搅拌时间为400-500r/min，搅拌15-20min。
8.在一个优选地实施例中，s3中加入的纯水量为30-40ml。
9.在一个优选地实施例中，s4中加入的纯水量为10-15ml。
10.在一个优选地实施例中，s5中的进样条件为，进样体积50-60μl；柱温：30-35℃，流速：1-2ml/min。
11.本发明技术方案的有益效果是：本方案通过对过滤后的黄大茶茶汤进行萃取、浓缩冻干，以及稀释浓缩蒸干等步骤，得到黄大茶活性化合物组合。上述提取方案操作简单，保证提取的活性化合物组合物的活性，对于α-葡萄糖苷酶具有较高的抑制率。同时，通过对比实验也可以证明该活性化合物组合物抑制α-葡萄糖苷酶活性的效果较为显著。
具体实施方式
12.下面结合具体实施方式对本发明作进一步详细的说明。本发明的实施例是为了示例和描述方便起见而给出的，而并不是无遗漏的或者将本发明限于所公开的形式。很多修改和变化对于本领域的普通技术人员而言是显而易见的。选择和描述实施例是为了更好说明本发明的原理和实际应用，并且使本领域的普通技术人员能够理解本发明从而设计适于特定用途的带有各种修改的各种实施例。
13.实施例1本发明技术方案提供一种具有降血糖作用的黄大茶活性化合物组合的提取方法，包括如下步骤：s1：称取市场购买的黄大茶样品500g，以1:5的茶水比加入沸水，并在磁力搅拌器下搅拌，滤出茶渣，得到黄大茶茶汤a；s2：将1l无水乙醇加入黄大茶茶汤a中，静置10h，再用纱布将茶汤过滤，滤出沉淀物，上清液即为黄大茶茶汤b；s3：将黄大茶茶汤b减压浓缩去除乙醇后加入纯水复溶，加入石油醚，充分混合后再加入乙酸乙酯进行萃取，得到萃取液c；s4：将萃取液c减压浓缩，等有机溶剂挥发之后，置于冷冻干燥机中冻干，再加入纯水复溶后作为母液d；s5：母液d稀释后，用高效液相色谱法进样，接100针后将每个组分通过减压浓缩蒸干，再加入纯水复溶定容至10ml，即为所要提取的活性化合物。
14.s1中磁力搅拌器最适搅拌时间为400r/min，搅拌15min。s3中加入的纯水量为30ml。s4中加入的纯水量为10ml。s5中的进样条件为，进样体积50μl；柱温：30℃，流速：1ml/min。
15.实施例2本发明技术方案提供一种具有降血糖作用的黄大茶活性化合物组合的提取方法，包括如下步骤：s1：称取市场购买的黄大茶样品500g，以1:5的茶水比加入沸水，并在磁力搅拌器下搅拌，滤出茶渣，得到黄大茶茶汤a；
s2：将1l无水乙醇加入黄大茶茶汤a中，静置14h，再用纱布将茶汤过滤，滤出沉淀物，上清液即为黄大茶茶汤b；s3：将黄大茶茶汤b减压浓缩去除乙醇后加入纯水复溶，加入石油醚，充分混合后再加入乙酸乙酯进行萃取，得到萃取液c；s4：将萃取液c减压浓缩，等有机溶剂挥发之后，置于冷冻干燥机中冻干，再加入纯水复溶后作为母液d；s5：母液d稀释后，用高效液相色谱法进样，接100针后将每个组分通过减压浓缩蒸干，再加入纯水复溶定容至10ml，即为所要提取的活性化合物。
16.s1中磁力搅拌器最适搅拌时间为500r/min，搅拌20min。s3中加入的纯水量为40ml。s4中加入的纯水量为15ml。s5中的进样条件为，进样体积60μl；柱温：35℃，流速：2ml/min。
17.下面通过设置对比实验，检测活性抑制率：实施例1：将实施例1提取的活性化合物稀释后与α-葡萄糖苷酶的分子模拟结合，检测活性抑制。
18.对比例1：将egcg和l-茶氨酸按一定比例混合稀释后，检测α-葡萄糖苷酶抑制率。
19.对比例2：将含有egcg溶液稀释后，检测α-葡萄糖苷酶抑制率。
20.对比例3：将含有l-茶氨酸溶液稀释后，检测α-葡萄糖苷酶抑制率。
21.检测结果见下表1：表1由上表的检测结果可知，本方案提取的活性化合物组合物相较于对比例，抑制α-葡萄糖苷酶活性的效果较为显著。
22.显然，所描述的实施例仅仅是本发明的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域及相关领域的普通技术人员在没有作出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例，都应属于本发明保护的范围。本发明中未具体描述和解释说明的结构、装置以及操作方法，如无特别说明和限定，均按照本领域的常规手段进行实施。
技术特征：
1.一种具有降血糖作用的黄大茶活性化合物组合的提取方法，其特征在于，包括如下步骤：s1：称取市场购买的黄大茶样品500g，以1:5的茶水比加入沸水，并在磁力搅拌器下搅拌，滤出茶渣，得到黄大茶茶汤a；s2：将1l无水乙醇加入黄大茶茶汤a中，静置10-14h，再用纱布将茶汤过滤，滤出沉淀物，上清液即为黄大茶茶汤b；s3：将黄大茶茶汤b减压浓缩去除乙醇后加入纯水复溶，加入石油醚，充分混合后再加入乙酸乙酯进行萃取，得到萃取液c；s4：将萃取液c减压浓缩，等有机溶剂挥发之后，置于冷冻干燥机中冻干，再加入纯水复溶后作为母液d；s5：母液d稀释后，用高效液相色谱法进样，接100针后将每个组分通过减压浓缩蒸干，再加入纯水复溶定容至10ml，即为所要提取的活性化合物。2.根据权利要求1所述的一种具有降血糖作用的黄大茶活性化合物组合的提取方法，其特征在于，s1中磁力搅拌器最适搅拌时间为400-500r/min，搅拌15-20min。3.根据权利要求1所述的一种具有降血糖作用的黄大茶活性化合物组合的提取方法，其特征在于，s3中加入的纯水量为30-40ml。4.根据权利要求1所述的一种具有降血糖作用的黄大茶活性化合物组合的提取方法，其特征在于，s4中加入的纯水量为10-15ml。5.根据权利要求1所述的一种具有降血糖作用的黄大茶活性化合物组合的提取方法，其特征在于，s5中的进样条件为，进样体积50-60μl；柱温：30-35℃，流速：1-2ml/min。
技术总结
本发明公开了一种具有降血糖作用的黄大茶活性化合物组合的提取方法。本方案通过对过滤后的黄大茶茶汤进行萃取、浓缩冻干，以及稀释浓缩蒸干等步骤，得到黄大茶活性化合物组合。上述提取方案操作简单，保证提取的活性化合物组合物的活性，对于α-葡萄糖苷酶具有较高的抑制率。同时，通过对比实验也可以证明该活性化合物组合物抑制α-葡萄糖苷酶活性的效果较为显著。果较为显著。
技术研发人员：张世潮 尹成男
受保护的技术使用者：合肥极世茗香生物科技有限公司
技术研发日：2022.12.26
技术公布日：2023/1/31