一种用于植物组织DNA提取的离心管的制作方法

一种用于植物组织dna提取的离心管
技术领域
1.本实用新型涉及离心管，具体涉及一种用于植物组织dna提取的离心管。


背景技术：

2.分离植物基因组dna是建立基因组文库、遗传标记作图及基因克隆的前提，以柑橘叶片为例，其植物组织dna提取通常包括以下步骤：
3.1、取适量植物组织用干净的刀片切碎放入无菌研磨皿中，加入液氮研磨至粉状；
4.2、取2ml无菌离心管，加入占无菌离心管1/6体积的研碎的植物组织到2ml无菌离心管中，加入1ml含2.5％pvp的dna extraction buffer(dna提取缓冲液)，涡旋混匀，置于冰上；
5.3、将上述样品涡旋混匀，于转速14000rpm，温度25℃条件下离心5min，倒掉上清液；
6.4、向离心管加入1ml不含pvp的dna extraction buffer，重新悬浮，涡旋混匀，于转速 14000rpm，温度25℃条件下离心5min，倒掉上清液；
7.5、加入不含pvp的dna extraction buffer 300ul，重新悬浮植物组织，加入300ul lysis buffer(裂解缓冲液)，200ul5％sarcosyl(十二烷基肌氨酸钠)，涡旋混匀；
8.6、65℃水浴45min；
9.7、加入800ul酚：氯仿：异戊醇(体积比：25:24:1)，涡旋混匀，于转速14000rpm，温度25℃条件下离心10min；
10.8、将700ul上清液转移到一新的无菌2ml离心管中，加入700ul氯仿：异戊醇(体积比： 24:1)，涡旋混匀，于转速14000rpm，温度25℃条件下离心10min；
11.9、取600ul上清液到一新的无菌2ml离心管中，加入1200ul的冰冻100％乙醇，60ul的醋酸钠，轻轻翻转离心管10次，混匀液体，于-20℃条件下静置至少1h；
12.10、于转速14000rpm，温度4℃条件下离心15min；
13.11、倒掉液体，加入1ml冰冻70％乙醇，轻轻翻转，于转速14000rpm，温度4℃条件下离心 5min；
14.12、重复步骤11；
15.13、室温下晾干离心管(完全移除乙醇)；
16.14、加入50ul 1x te buffer溶解dna。
17.现有技术的植物组织dna提取需在无菌研磨皿研磨至粉状，再倒入离心管中摇动混匀后，再于约65℃水浴保温30-60分钟，步骤较为复杂，整体耗时较长。


技术实现要素：

18.针对上述背景技术中提出的问题，本实用新型提供一种用于植物组织dna提取的离心管，采用该离心管进行植物dna提取，能够简化植物dna提取的步骤，缩短植物dna提取的耗时。
19.为达到上述目的，本实用新型所采用的技术方案是：
20.一种用于植物组织dna提取的离心管，包括管体及管盖，所述管盖盖设于所述管体的管口处，以打开及封闭所述管体的管口，所述管体内设有对撞件，所述对撞件为金属材料制成，并固定于所述管体的底部。
21.进一步地，所述对撞件为球状或板状。
22.进一步地，所述管盖与所述管体通过连接带连接。
23.本实用新型还提供另一种用于植物组织dna提取的离心管，包括管体及管盖，所述管盖盖设于所述管体的管口处，以打开及封闭所述管体的管口，所述管体包括主管及底盖，所述主管的一端设有限位部，所述底盖可拆卸地装设于所述主管设有所述限位部的一端，所述底盖面向所述主管的一侧设有放置槽，所述放置槽用以放置对撞件，且所述底盖及所述限位部相互配合以防止所述对撞件沿所述主管的轴向运动；所述管盖盖设于所述主管相对所述底盖的一端。
24.进一步地，所述底盖包括端板及环绕连接于所述端板周缘的周壁，所述周壁与所述主管的一端可拆卸连接，所述周壁与所述端板围成所述放置槽，所述对撞件为金属制成的球状，所述限位部为凸设于所述主管内壁上的凸缘，所述凸缘围成连通口，所述对撞件面向所述管盖的一侧能够经由所述连通口伸入所述主管内。
25.进一步地，所述底盖包括端板及环绕连接于所述端板周缘的周壁，所述周壁与所述主管的一端可拆卸连接，所述放置槽凹设于所述周壁上并环绕所管体的轴线设置，所述对撞件为金属制成的圆板状，所述对撞件的周缘可拆卸地放置于所述放置槽中，所述主管靠近所述底盖的一端形成所述限位部，所述主管靠近所述底盖的一端能够与所述对撞件相抵。
26.进一步地，所述对撞件朝向所述管盖的侧面凹设形成凹弧面。
27.进一步地，所述主管靠近所述底盖的一端外周壁上凹设有避让槽，所述周壁收容于所述避让槽内。
28.进一步地，所述管盖与所述主管通过连接带连接。
29.进一步地，所述对撞件采用不锈钢制成；所述管体内还活动放置有研磨珠，所述研磨珠采用不锈钢制成。
30.由于采用上述技术方案，本实用新型具有以下有益效果：
31.1、上述用于植物组织dna提取的离心管，其于管体的底部设有对撞件，使用时，将剪碎的植物叶片、dna提取所需的提取液及研磨珠置于管体内，在磨样机上对植物叶片进行研磨及摇动混匀，在离心的过程中，研磨珠与金属制成的对撞件的碰撞还能够产生热量，该热量可用于代替水浴对样品预热。因此，采用该离心管进行植物dna提取，能够在摇动混匀样品的同时对样品进行研磨及预热，使得研磨、离心及预热在一步完成，能够简化植物组织dna 提取的步骤，缩短植物组织dna提取的耗时。同时，由于对撞件相对固定于管体的内底部，其与活动的研磨珠配合，能够进一步增加研磨珠与对撞件碰撞的几率，提高产热量，进一步提高预热的效果。
32.2、上述用于植物组织dna提取的离心管，其管体分为底盖及与底盖可拆卸连接的主管，通过主管上限位部与底盖的配合能够防止对撞件沿管体的轴向运动，从而将对撞件锁定于管体的内底部上；当离心管完成使用后，可将底盖从主管上拆下，将对撞件从底盖的
放置槽中取出以重复利用，进一步节约成本。
附图说明
33.图1为本实用新型第一实施方式的用于植物组织dna提取的离心管的立体图。
34.图2为图1所示用于植物组织dna提取的离心管在纵截面上的剖视图。
35.图3为本实用新型第二实施方式的用于植物组织dna提取的离心管的立体图。
36.图4为图3所示用于植物组织dna提取的离心管在纵截面上的剖视图。
37.图5为图4所示用于植物组织dna提取的离心管安装好对撞件后的结构示意图。
38.图6为本实用新型第三实施方式的用于植物组织dna提取的离心管的剖视结构示意图。
39.图7为本实用新型第四实施方式的用于植物组织dna提取的离心管的剖视结构示意图。
40.主要元件符号说明
41.1、管体；12、主管；121、限位部；123、连通口；124、避让槽；14、底盖；140、放置槽；141、端板；143、周壁；3、管盖；4、对撞件；5、连接带；6、研磨珠。
具体实施方式
42.下面将结合本实用新型实施例中的附图，对本实用新型实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本实用新型一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本实用新型中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本实用新型保护的范围。
43.需要说明的是，当组件被称为“固定于”另一个组件，它可以直接在另一个组件上或者也可以存在居中的组件。当一个组件被认为是“连接”另一个组件，它可以是直接连接到另一个组件或者可能同时存在居中组件。当一个组件被认为是“设置于”另一个组件，它可以是直接设置在另一个组件上或者可能同时存在居中组件。本文所使用的术语“垂直的”、“水平的”、“左”、“右”以及类似的表述只是为了说明的目的。
44.除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本实用新型的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本实用新型的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在于限制本实用新型。本文所使用的术语“及/或”包括一个或多个相关的所列项目的任意的和所有的组合。
45.实施例1
46.请一并参见图1及2，本实用新型第一实施方式提供一种用于植物组织dna提取的离心管，包括管体1及管盖3，管盖3盖设于管体1的管口处，以打开及封闭管体1的管口。
47.在本实施方式中，管体1内设有对撞件4，对撞件4为金属材料制成，并固定于管体1 的底部。在本实施方式中，对撞件4为球状，其通过粘接等方式与管体1的管壁固定连接。可以理解，对撞件4的形状不限于球体状，例如，其也可以根据需要设置为板状等其他形状。对撞件4与现有技术的研磨珠6的材质可相同，均为钢珠。
48.管盖3与管体1通过连接带5连接，连接带5的材质可采用塑料等柔性材料制成，其能够受力弯曲，以使管盖3能够与管体1盖合或分离。
49.以柑橘叶片的dna提取为例，采用上述用于植物组织dna提取的离心管提取植物组织dna 时，可包括以下步骤：
50.步骤s1：清洗柑橘叶片，用纸吸干水分后，切取适量的植物组织，加入本实施例的离心管中，该离心管容积为2ml，并在离心管中放入一棵6mm无菌研磨珠6，加入1200ul提取液[含 2.5％pvp的dna extraction buffer：lysis buffer：5％sarcosyl＝3:3:2(体积比)]，盖好管盖3后，放入震荡磨样机，震荡15min得均浆组织；
[0051]
步骤s2：取800ul均浆组织，转移入另一新的2ml无菌离心管(该无菌离心管为现有技术中不含钢珠的普通离心管)中，加入800ul酚：氯仿：异戊醇(体积比：25:24:1)，涡旋混匀，于转速14000rpm，温度25℃条件下离心10min；
[0052]
步骤s3：将700ul上清液转移到一新的无菌2ml离心管(该无菌离心管为现有技术中不含钢珠的普通离心管)中，加入700ul氯仿：异戊醇(体积比：24:1)，涡旋混匀，于转速 14000rpm，温度25℃条件下离心10min；
[0053]
步骤s4：取600ul上清液到一新的无菌2ml离心管(该无菌离心管为现有技术中不含钢珠的普通离心管)中，于-20℃条件下静置5min，加入1200ul的冰冻100％乙醇，60ul的醋酸钠，轻轻翻转离心管10次，混匀液体；
[0054]
步骤s5：于转速14000rpm，温度4℃条件下离心15min；
[0055]
步骤s6：倒掉液体，加入1ml冰冻70％乙醇，轻轻翻转，于转速14000rpm，温度4℃条件下离心5min；
[0056]
步骤s7：重复步骤s6；
[0057]
步骤s8：室温下晾干离心管(完全移除乙醇)；
[0058]
步骤s9：加入50ul 1x te buffer溶解dna。
[0059]
上述用于植物组织dna提取的离心管，其于管体1的底部设有对撞件4，使用时，将剪碎的植物叶片、提取所需的溶液及研磨珠6置于管体1内，在磨样机上对植物叶片进行研磨及摇动混匀，在离心的过程中，通过研磨珠6与金属制成的对撞件4的碰撞产生热量，该热量可用于代替水浴对样品预热，经过实验验证，通过上述步骤能够成功完成植物组织dna提取。因此，采用该离心管进行植物dna提取，能够在摇动混匀样品的同时对样品进行研磨及预热，使得研磨、离心及预热在一步完成，能够简化植物组织dna提取的步骤，缩短植物组织dna提取的耗时。同时，由于对撞件4相对固定于管体1的内底部，其与活动的研磨珠6 配合，能够进一步增加研磨珠6与对撞件4碰撞的几率，提高产热量，进一步提高预热的效果。
[0060]
实施例2
[0061]
请一并参见图3至图5，本实用新型第二实施方式提供一种用于植物组织dna提取的离心管，其与第一实施方式中离心管的结构大致相同，均包括管体1及管盖3，管盖3盖设于管体1的管口处，以打开及封闭管体1的管口；不同之处在于对撞件4与管体1的连接方式。
[0062]
在本实施方式中，对撞件4与管体1可拆卸连接，具体地，管体1包括主管12及底盖 14，主管12的管腔沿主管12的轴向贯通主管12的相对两端，主管12的一端设有限位部121。在本实施方式中，限位部121为凸设于主管12内壁上的凸缘，凸缘围成与主管12的管腔连通的连通口123。底盖14可拆卸地装设于主管12设有限位部121的一端，在本实施方式中，底盖14套接于主管12的一端外并与主管12螺纹连接。具体地，底盖14包括端板141及环绕连接于端板141周缘的周壁143，周壁143套接于主管12的一端外并与主管12的一端通过螺纹连接
的方式实现可拆卸连接，以提高底盖14与主管12连接的密封性，防止泄漏。在本实施方式中，主管12靠近底盖14的一端外壁上环绕凹设有避让槽124，周壁143套接于主管12的一端外并收容于避让槽124中，以使管体1的外表面较为平整，更为美观。周壁 143与端板141围成放置槽140，放置槽140与主管12连通，放置槽140用以放置对撞件4。底盖14及限位部121相互配合以防止对撞件4沿主管12的轴向运动。在本实施方式中，对撞件4为金属制成的球状，对撞件4面向管盖3的一侧能够经由连通口123伸入主管12内。
[0063]
管盖3盖设于主管12相对底盖14的一端。在本实施方式中，管盖3与管体1通过连接带5连接，连接带5的材质可采用塑料制成，其能够受力弯曲，以使管盖3能够与管体1盖合或分离。
[0064]
上述用于植物组织dna提取的离心管，其管体1分为底盖14及与底盖14可拆卸连接的主管12，通过主管12的限位部121与底盖14的配合能够防止对撞件4沿管体1的轴向运动，从而将对撞件4锁定于管体1的内底部上；当离心管完成使用后，可将底盖14从主管12上拆下，将对撞件4从底盖14的放置槽140中取出清洗、消毒以重复利用，进一步节约成本；管体1可作为一次性用品，更卫生，进一步提高实验的精度。此外，在本实施方式中的对撞件4采用球状，其可直接使用现有技术中尺寸较大的研磨珠6作为对撞件4，较为方便。
[0065]
实施例3
[0066]
请一并参见图6，本实用新型第三实施方式提供一种用于植物组织dna提取的离心管，其与第二实施方式中离心管的结构大致相同，均包括管体1及管盖3，管盖3盖设于管体1 的管口处，以打开及封闭管体1的管口。
[0067]
对撞件4与管体1可拆卸连接，具体地，管体1包括主管12及底盖14，主管12的管腔沿主管12的轴向贯通主管12的相对两端，主管12的一端设有限位部121。在本实施方式中，主管12靠近底盖14的一端为所述限位部121。底盖14可拆卸地装设于主管12设有限位部 121的一端，在本实施方式中，底盖14套接于主管12的一端外并与主管12螺纹连接。具体地，底盖14包括端板141及环绕连接于端板141周缘的周壁143，周壁143套接于主管12 的一端外并与主管12的一端通过螺纹连接的方式实现可拆卸连接，以提高底盖14与主管12 连接的密封性，防止泄漏。在本实施方式中，主管12靠近底盖14的一端外壁上环绕凹设有避让槽124，周壁143套接于主管12的一端外并收容于避让槽124中，以使管体1的外表面较为平整，更为美观。
[0068]
底盖14面向主管12的一侧设有放置槽140，在本实施方式中，放置槽140凹设于周壁 143上并环绕所管体1的轴线设置，放置槽140用以放置对撞件4，且底盖14与限位部121 相互配合以防止对撞件4沿主管12的轴向运动。在本实施方式中，对撞件4为金属制成的圆板状，对撞件4的周缘可拆卸地放置于放置槽140中，主管12靠近底盖14的一端能够与对撞件4相抵，进而与底盖14配合以防止对撞件4沿主管12的轴向运动。
[0069]
管盖3盖设于主管12相对底盖14的一端。在本实施方式中，管盖3与管体1通过连接带5连接，连接带5的材质可采用塑料等柔性材料制成，其能够受力弯曲，以使管盖3能够与管体1盖合或分离。
[0070]
上述用于植物组织dna提取的离心管，其管体1分为底盖14及与底盖14可拆卸连接的主管12，通过主管12上限位部121与底盖14的配合能够防止对撞件4沿管体1的轴向运动，从而将对撞件4锁定于管体1的内底部上；当离心管完成使用后，可将底盖14从主管12上拆
下，将对撞件4从底盖14的放置槽140中取出清洗、消毒以重复利用，进一步节约成本；管体1可作为一次性用品。此外，在本实施方式中的对撞件4采用圆板状，其可对主管12底部进行较好的密封，防止离心管内的样品进入主管12与对撞件4之间的缝隙中，导致后续难以取出而造成样品浪费。
[0071]
实施例4
[0072]
请一并参见图7，本实用新型第四实施方式提供一种用于植物组织dna提取的离心管，其与第三实施方式中离心管的结构大致相同，不同之处在于：在本实施方式中，对撞件4朝向管盖3的侧面凹设形成凹弧面。由于置于离心管内的研磨珠6表面为球面，将对撞件4朝向管盖3的侧面设为凹弧面，其在对撞件4与研磨珠6碰撞时，能够增加对撞件4与研磨珠 6的接触面积，进一步提高产热量。
[0073]
优选地，对撞件4采用不锈钢制成；研磨珠6采用不锈钢制成。
[0074]
可以理解，在其他实施方式中，用于植物组织dna提取的离心管还可包括研磨珠6，研磨珠6活动地放置于管体1或管体1的主管12内。通过在离心管内配套放置研磨珠6，在使用时无需再另外向离心管内放置研磨珠6，使用更方便。
[0075]
可以理解，管盖3与管体1的连接方式不限于本实施例，例如，在其他实施方式中，管盖3与管体1也可通过螺纹连接的方式进行连接。
[0076]
可以理解，离心管的容积可根据实际需要进行设置。
[0077]
上述说明是针对本实用新型较佳可行实施例的详细说明，但实施例并非用以限定本实用新型的专利申请范围，凡本实用新型所提示的技术精神下所完成的同等变化或修饰变更，均应属于本实用新型所涵盖专利范围。