专利名称：复方丹参口腔崩解片及制备方法和质量控制方法
技术领域：
本发明涉及一种复方丹参口腔崩解片及制备方法和质量控制方法，属于中药
背景技术：
心脑血管病是当今世界范围内危害人类健康的主要疾病，寻找一种效果好、服用方便、利于普及以达到预防和治疗目的的心血管病药物，是目前急需解决的问题。心血管疾病基本病机是气虚血淤，心脉淤滞。因此益气活血应当是治疗心血管病的基本治法。复方丹参制剂用于心血管疾病可显著扩张冠状动脉，增加血流量，减少心肌耗氧量，改变血液流变性，对心血管疾病有很好的预防和治疗作用。现在市场上应用较多的有复方丹参片与滴丸，在治疗心脑血管疾病方面有着肯定的疗效。而近几年来研究开发的新型固体速释制剂一口腔崩解片，服用时可不用水辅助吞咽，能在口腔中1min内迅速崩解成细颗粒，借助吞咽动力，即可完成服药过程，与普通片剂相比，其吸收更快，生物利用度更高，消化道粘膜刺激作用小，且有利于工业化大生产。另外，现有的复方丹参片质量控制方法过于简单，不能全面考察和控制产品的质量，从而影响了药品的临床疗效；因此，现在急需寻找更理想的制备工艺和更稳定的质量控制方法。
发明内容
本发明的目的在于提供一种复方丹参口腔崩解片及制备方法和质量控制方法，本发明针对现有技术的不足，提供了一种服用方便、吸收快、生物利用度高的新型制剂，并拟订了更为科学合理的制备工艺和质量控制方法，以有效地控制和提高产品质量，从而确保其临床疗效。
本发明是这样构成的它是用丹参255g、三七50g、冰片2.85g和交联聚乙烯吡咯烷酮170g、低取代羟丙纤维素71g、微晶纤维素71g、阿司帕坦10g、硬脂酸镁4g制备而成的。
本发明所述复方丹参口腔崩解片的制备方法为取丹参、三七加水煎煮三次，每次1小时，合并煎煮液，滤过，滤液浓缩，加入2倍量乙醇，静置24小时，滤过，回收乙醇，并浓缩至55~80℃相对密度为1.33～1.35的稠膏，真空干燥，粉碎，过80目筛，备用；冰片用β-环糊精包合，备用；干浸膏粉与交联聚乙烯吡咯烷酮、低取代羟丙纤维素、微晶纤维素混合均匀，用95％乙醇制粒，干燥，干颗粒与阿司帕坦、硬脂酸镁、冰片包合物混合均匀，压片，包装，即得。
其中，冰片包合物的制备方法为2.85g冰片溶于86.4ml95％乙醇中，制成冰片的饱和醇溶液，17.27gβ-环糊精溶于431.75ml55℃热水中，制成β-环糊精的饱和水溶液，将冰片饱和醇溶液加入在缓慢搅拌状态下的β-环糊精的饱和水溶液中，并继续搅拌30分钟，冷藏24小时，抽滤，滤渣用冷水冲洗，抽干后于40℃干燥，即得冰片包合物。
本发明所述复方丹参口腔崩解片的质量控制方法为所述质量控制方法主要包括性状、鉴别、检查以及含量测定项目中的部分或全部；其中鉴别包括对制剂中冰片、三七和丹参的薄层色谱鉴别；含量测定是对制剂中丹参和冰片的含量测定。
冰片的鉴别方法是以冰片对照品为对照，以环己烷∶乙酸乙酯＝17∶3为展开剂的薄层色谱法；三七的鉴别方法是以三七皂苷R1对照品为对照，以正丁醇∶乙酸乙酯∶水＝4∶1∶5的上层溶液为展开剂的薄层色谱法；丹参的鉴别方法是以丹参素钠对照品为对照，以三氯甲烷∶丙酮∶甲酸＝25∶10∶4为展开剂的薄层色谱法。
具体的鉴别方法包括以下项目的部分或全部(1)取本制剂8片，研细，加乙水无醇15ml，超声处理10分钟，滤过，滤液作为供试品溶液；另取冰片对照品，加无水乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典附录VIB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液15μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷∶乙酸乙酯＝17∶3为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(2)取本制剂4片，研细，置离心管中，加入约40℃的稀氨溶液9ml，振摇使溶解，离心，取上清液，通过内径约0.7ml、柱高约5ml的D101型大孔吸附树脂柱，用水15ml洗脱，弃去水洗脱液，再用甲醇洗脱，弃去初洗脱液约0.4ml，收集续洗脱液约5ml，作为供试品溶液；另取三七皂苷R1对照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典附录VIB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液15μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇∶乙酸乙酯∶水＝4∶1∶5的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热约10分钟；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(3)取本制剂3片，研细，置离心管中，加水3ml和稀盐酸2滴，振摇使溶解，加入乙酸乙酯3ml，振摇1分钟后离心2分钟，取上清液作为供试品溶液；另取丹参素钠对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典附录VIB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl、对照品溶液2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷∶丙酮∶甲酸＝25∶10∶4为展开剂，展开，取出，晾干，置氨蒸气中熏15分钟后，显淡黄色斑点，放置30分钟置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
丹参的含量测定方法是以丹参素钠对照品为对照，以甲醇∶水∶冰醋酸＝8∶91∶1为流动相的高效液相色谱法；冰片的含量测定方法是以冰片对照品为对照的气相色谱法。
具体的含量测定方法包括以下项目的部分或全部(1)丹参素钠 照中国药典附录VID高效液相色谱法测定色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇∶水∶冰醋酸＝8∶91∶1为流动相；检测波长为281nm；理论板数按丹参素钠峰计算应不低于2000；对照品溶液的制备 取丹参素钠对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.16mg的溶液，相当于每1ml含丹参素0.144mg，即得；供试品溶液的制备 取本制剂20片，研细，取约1.5g，精密称定，置100ml锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，称定重量，于功率50W、频率50KHz条件下超声处理10分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，以2000转/分的转速离心5分钟，取上清液，即得；测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本制剂每片含丹参以丹参素C9H10O5计，不得少于0.50mg；(2)冰片 照中国药典附录VI E气相色谱法测定色谱条件与系统适用性试验 30m×0.53mm×1μm的HP-INNOWAX弹性石英毛细管柱；程序升温初始140℃，保持7分钟，以每分钟50℃升至220℃保持2分钟；载气流速每分钟1.5ml；理论板数按水杨酸甲酯峰计算，应不低于5000；校正因子测定 取水杨酸甲酯适量，精密称定，加无水乙醇制成每1ml含0.20mg的溶液，作为内标溶液；另取冰片对照品适量，精密称定，加内标溶液溶解并稀释成每1ml含0.25mg的溶液，吸取2μl注入气相色谱仪，计算校正因子；测定法 取本制剂10片，精密称定，研细，精密称取约含冰片12.5mg的细粉适量，置平底烧瓶中，精密加入内标溶液50ml，水浴回流15分钟，放冷，滤过，取续滤液，作为供试品溶液；取2μl注入气相色谱仪，测定，按内标法计算，即得；本制剂每片含冰片C10H18O不得低于2.0mg。
本发明所述质量控制方法包括性状药物为淡棕黄色至淡棕色片，片面有散在斑点；气芳香，味微苦；
鉴别(1)取本制剂8片，研细，加乙水无醇15ml，超声处理10分钟，滤过，滤液作为供试品溶液；另取冰片对照品，加无水乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典附录VIB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液15μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷∶乙酸乙酯＝17∶3为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(2)取本制剂4片，研细，置离心管中，加入约40℃的稀氨溶液9ml，振摇使溶解，离心，取上清液，通过内径约0.7ml、柱高约5ml的D101型大孔吸附树脂柱，用水15ml洗脱，弃去水洗脱液，再用甲醇洗脱，弃去初洗脱液约0.4ml，收集续洗脱液约5ml，作为供试品溶液；另取三七皂苷R1对照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典附录VIB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液15μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇∶乙酸乙酯∶水＝4∶1∶5的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热约10分钟；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(3)取本制剂3片，研细，置离心管中，加水3ml和稀盐酸2滴，振摇使溶解，加入乙酸乙酯3ml，振摇1分钟后离心2分钟，取上清液作为供试品溶液；另取丹参素钠对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典附录VIB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl、对照品溶液2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷∶丙酮∶甲酸＝25∶10∶4为展开剂，展开，取出，晾干，置氨蒸气中熏15分钟后，显淡黄色斑点，放置30分钟置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点检查崩解时限 取10ml刻度试管，装入2ml蒸馏水，置37℃水浴中，取本制剂1片，放入试管内，立即计时，应在1分钟内崩解，并不得有大于二号筛孔径的颗粒；其他 应符合中国药典附录ID片剂项下有关的各项规定；含量测定(1)丹参素钠 照中国药典附录VID高效液相色谱法测定色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇∶水∶冰醋酸＝8∶91∶1为流动相；检测波长为281nm；理论板数按丹参素钠峰计算应不低于2000；对照品溶液的制备 取丹参素钠对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.16mg的溶液，相当于每1ml含丹参素0.144mg，即得；供试品溶液的制备 取本制剂20片，研细，取约1.5g，精密称定，置100ml锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，称定重量，于功率50W、频率50KHz条件下超声处理10分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，以2000转/分的转速离心5分钟，取上清液，即得；测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本制剂每片含丹参以丹参素C9H10O5计，不得少于0.50mg；(2)冰片 照中国药典附录VI E气相色谱法测定色谱条件与系统适用性试验 30m×0.53mm×1μm的HP-INNOWAX弹性石英毛细管柱；程序升温初始140℃，保持7分钟，以每分钟50℃升至220℃保持2分钟；载气流速每分钟1.5ml；理论板数按水杨酸甲酯峰计算，应不低于5000；校正因子测定 取水杨酸甲酯适量，精密称定，加无水乙醇制成每1ml含0.20mg的溶液，作为内标溶液；另取冰片对照品适量，精密称定，加内标溶液溶解并稀释成每1ml含0.25mg的溶液，吸取2μl注入气相色谱仪，计算校正因子；测定法 取本制剂10片，精密称定，研细，精密称取约含冰片12.5mg的细粉适量，置平底烧瓶中，精密加入内标溶液50ml，水浴回流15分钟，放冷，滤过，取续滤液，作为供试品溶液；取2μl注入气相色谱仪，测定，按内标法计算，即得；本制剂每片含冰片C10H18O不得低于2.0mg。
心血管疾病基本病机是气虚血淤，心脉淤滞，因此益气活血应当是治疗心血管病的基本治法。本方中丹参苦中微寒，可治血通脉，又可祛淤养血；三七味甘微苦，为活血化淤之要药，可增加冠脉血流量；冰片性辛寒，为开窍醒神、清热止痛之上品。以上诸药配伍，有活血化淤，通经活络，理气止痛，醒神开窍之功效。用于心血管疾病可显著扩张冠状动脉，增加血流量，减少心肌耗氧量，改变血液流变性，对心血管疾病有很好的预防和治疗作用。
与现有技术相比，本发明口腔崩解片能在口腔中迅速崩解，服用方便，吸收更快，生物利用度更高，消化道粘膜刺激作用小，其制备工艺有利于工业化大生产；改剂成为口腔崩解片，能充分发挥其剂型优势，有利于患者用药。此外，本发明质量控制方法精密度高，重现性好，可操作性强，回收率较高，提高了复方丹参制剂的质量控制标准，从而保证了该制剂的临床疗效。
申请人进行了一系列实验来选择本发明药物制剂的制备工艺和质量控制方法，以保证其科学、合理、可行，并具有良好的治疗效果。
一、制备工艺研究
1.提取加水量及提取时间的确定取一个处方量生药材，分别加不同量的水提取不同时间，以所得干浸膏量为评价指标，确定最佳提取加水量及提取时间，试验结果见下表
结果表明，采用加10倍量水提取三次，每次1小时，既能充分提取生药材有效成份，又节约能耗，因此确定提取加水量为10倍量，提取时间为每次1小时。
2.制剂工艺的筛选根据国内同类产品规格及临床用量，各类辅料的国内相关制剂应用情况，以颗粒可压性(硬度)、制得成品的崩解时限、口味等为筛选指标，结果见下表
上述试验结果表明，采用处方1所得的成品各项指标均符合标准规定要求，为最佳处方，因此复方丹参口腔崩解片采用处方1进行中试生产，三批中试产品的试验数据见下表三批中试产品的试验结果
结论三批中试产品试验结果表明，本制剂工艺合理、稳定，成品收得率较高，所得成品经质量检验，结果均符合规定。
二、质量控制方法研究(一)样品及对照药来源样品本申请人自制，批号为050501、050502、050503。
冰片对照品(中国药品生物制品检定所提供)，批号110743-200303；丹参素钠对照品(中国药品生物制品检定所提供)，批号110855-200405；三七皂苷R1对照品(中国药品生物制品检定所提供)，批号110745-200312；(二)含量限度本品规格为0.44g，复方丹参口腔崩解片需要定量的两个含量指标，其中丹参素含量采用高效液相色谱法测定，每片含丹参以丹参素(C9H10O5)计，不得少于0.50mg；冰片含量采用气相色谱法测定，每片含冰片(C10H18O)不得少于2.0mg。
(三)性状本品为口崩片，系由干浸膏粉加适量辅料经制粒后，外加部分辅料，压片而得，所得片子均为淡棕黄色至淡棕色，片面有散在斑点，气芳香，味微苦。
(四)鉴别参考《中国药典》2005年版一部复方丹参滴丸鉴别项下的内容，用薄层鉴别方法对本品主药丹参、冰片和三七进行鉴别。
1.冰片的薄层鉴别(1)取本制剂8片，研细，加乙水无醇15ml，超声处理10分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。另取冰片对照品，加无水乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(附录VIB)试验，吸取供试品溶液15μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯(17∶3)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
(2)点样量的选择经实验选择吸取供试品溶液10μl、对照品溶液5μl与供试品溶液15μl、对照品溶液5μl，结果发现吸取供试品溶液15μl、对照品溶液5μl时斑点较好，较为清晰。故本标准吸取供试品溶液15μl、对照品溶液5μl。
(3)专属性实验取冰片的阴性样品0.4959g，同提取(1)法操作制成阴性供试品溶液，展开后在对照品处无相应斑点，说明阴性样品对本实验无干扰。
2.三七的薄层鉴别(1)取本制剂4片，研细，置离心管中，加入约40℃的稀氨溶液(取浓氨溶液8ml，加水使成100ml，混匀)9ml，振摇使溶解，离心，取上清液，通过D101型大孔吸附树脂柱(内径约0.7ml，柱高约5ml)，用水15ml洗脱，弃去水洗脱液，再用甲醇洗脱，弃去初洗脱液约0.4ml，收集续洗脱液约5ml，作为供试品溶液。另取三七皂苷R1对照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(附录VIB)试验，吸取供试品溶液15μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-乙酸乙酯-水(4∶1∶5)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热约10分钟。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
(2)点样量的选择在三七鉴别实验中，经实验选择供试品溶液和对照品溶液各10μl点样，供试品溶液斑点较浅；供试品溶液和对照品溶液各5μl进行点样，供试品溶液无斑点；供试品溶液15μl和对照品溶液5μl点样时斑点分离较好，适合实验要求。所以选择供试品溶液15μl和对照品溶液5μl进行点样。
(3)专属性实验取三七的阴性样品，照(1)项下配制成阴性供试品溶液，展开后在三七皂苷R1对应位置没有相应斑点，说明阴性样品对本实验无干扰。
3.丹参的薄层鉴别(1)取本制剂3片，研细，置离心管中，加水3ml和稀盐酸2滴，振摇使溶解，加入乙酸乙酯3ml，振摇1分钟后离心2分钟，取上清液作为供试品溶液。另取丹参素钠对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(附录VIB)试验，吸取供试品溶液10μl、对照品溶液2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-丙酮-甲酸(25∶10∶4)为展开剂，展开，取出，晾干，置氨蒸气中熏15分钟后，显淡黄色斑点，放置30分钟置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
(2)点样量的选择在丹参的鉴别实验中，经实验选择供试品溶液10μl和对照品溶液2μl点样时斑点分离较好，适合实验要求。供试品溶液5μl和对照品溶液2μl点样时斑点较浅，所以选择供试品溶液10μl和对照品溶液2μl点样。
(3)专属性实验取丹参的阴性样品，照(1)项下配制成阴性供试品溶液，展开后在丹参素钠对应位置没有相应斑点，说明阴性样品对本实验无干扰。
(五)检查1、崩解时限 取10ml刻度试管，装入2ml蒸馏水，置37℃水浴中，取本制剂1片，放入试管内，立即计时，应在1分钟内溶散，并不得有大于二号筛孔径的颗粒。
表1崩解时限考察结果
2、砷盐 按中国药典2005年版一部附录IX F砷盐检查法第一法进行检查，结果符合规定。
表2砷盐测定结果
3、重金属 按中国药典2005年版一部附录IX E重金属检查法第二法进行检查，结果符合规定。
表3重金属测定结果
4、重量差异本品重量大于0.3g，按中国药典2005年版一部规定片重差异应在±5％以内，取本制剂三批样品20片检查，结果见下表4。
表4重量差异检查结果
本制剂三批样品测定结果表明，片重差异均在规定范围之内。
5、微生物限度照微生物限度检查法(中国药典2005年版一部附录XIII)检查，三批样品的检查结果见下表。
表5微生物限度检查结果
(六)含量测定A.丹参素的含量测定方法学研究1、方法
(1)仪器与试药HP1100高效液相色谱仪，HP色谱工作站。
丹参素钠对照品(由中国药品生物制品检定所提供，批号110855-200405)。
甲醇为色谱纯，水为重蒸馏水，其余为分析纯。
供试品(复方丹参口崩片)批号050501、050502、050503。
(2)色谱条件色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-冰醋酸(8∶91∶1)为流动相；检测波长为281nm。理论板数按丹参素钠峰计算应不低于2000。
色谱柱型号Hypersil ODS25μmφ4.6×200mm。
(3)对照品溶液的配制取丹参素钠对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.16mg的溶液(相当于每1ml含丹参素0.144mg)，即得。
(4)供试品溶液的配制取本制剂20片，研细，取约1.5g，精密称定，置100ml锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，称定重量，超声处理(功率50W，频率50KHz)10分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，离心(转速为每分钟2000转)5分钟，取上清液，即得。
(5)检测波长的选择量取丹参素钠对照品溶液在紫外分光光度计上测定紫外光谱图，在400～200nm波长范围内扫描，结果在281nm波长处有最大吸收峰，故选择281nm作为本制剂的检测波长。
2、提取条件的选择(1)提取方法的比较取本制剂20片，研细，取粉末约1.5g两份，精密称定，分别置100ml锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，称定重量，一份超声处理(功率50W，频率50KHz)30分钟，另一份回流提取30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，离心(转速为每分钟2000转)5分钟，取上清液，各取10μl注入液相色谱仪，记录色谱图。
表6提取方法的比较结果
结果显示两者的提取结果差不多，为了便于操作，选用超声提取作为本实验的提取方法。
(2)提取溶剂选择取本制剂20片，研细，取粉末约1.5g两份，精密称定，分别置100ml锥形瓶中，一份精密加入乙醇25ml，一份精密加入甲醇25ml，密塞，称定重量，超声处理(功率50W，频率50KHz)10分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，离心(转速为每分钟2000转)5分钟，取上清液，各取10μl注入液相色谱仪，记录色谱图。
表7提取溶剂的比较结果
结果显示甲醇提取的含量结果较高，因此选用甲醇溶液作为提取溶剂。
(3)提取时间选择取本制剂20片，研细，取约1.5g三份，精密称定，分别置100ml锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，称定重量，超声处理(功率50W，频率50KHz)10分别、20分钟、30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，离心(转速为每分钟2000转)5分钟，取上清液，各取10μl注入液相色谱仪，记录色谱图。
表8提取时间的比较结果
结果显示超声提取15min时已基本提取完全，因此选用甲醇超声提取15min作为提取时间。
4、空白试验取缺丹参阴性样品约1.3g，照供试品溶液项下的方法配制，按上述色谱条件分析。与对照品相应的位置上，无明显其它峰出现。结果证明阴性样品对该试验无干扰。
5、标准曲线的绘制取丹参素钠对照品8.16mg，精密称定，置25ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；再精密量取0.3ml、0.4ml、0.5ml、0.6ml、0.7ml，分别置于1ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，各进样10μl，测定峰面积，以浓度C为横坐标，峰面积为纵坐标，绘图得标准曲线，回归方程为Y＝-50.7597+6.6114X，r＝0.9998测定结果见下表。
表9线性关系考察
结果表明丹参素钠在88.13μg/ml～205.63μg/ml范围内峰面积与浓度具有良好的线性关系。
6、精密度试验取本制剂(批号050501)按上法配制供试品溶液，重复进样5次，结果RSD为1.81％(n＝5)结果见下表。
表10精密度试验结果
7、重现性试验按供试品溶液配制方法配制6份供试品，分别测定每份样品含量，结果平均含量为2.22mg/g，RSD为2.33％(n＝6)结果见下表。
表11重现性试验结果
8、回收率试验精密称取一已知含量的供试品(批号050501)，分别添加丹参素钠对照品(浓度为1.12mg/ml)1ml，按上述方法制成供试品溶液，依法进行测定，计算回收率，测定结果见下表。
表12回收率试验结果
9、稳定性试验取供试品溶液一份，每隔一定时间测定，测得丹参素钠的峰面积如下表，结果表明，供试品溶液在室温下放置23小时内稳定。测定结果见下表。
表13稳定性试验结果
10、样品的测定及含量限度的确定按供试品溶液的配制方法，对十批样品进行含量测定，以确定其含量限度，十批样品的含量测定结果见下表。
表14含量测定结果
最后确定其含量限度为0.5mg/片，应符合规定。
B.冰片含量测定方法学研究1、仪器与试药仪器HP6890气相色谱仪冰片对照品由中国药品生物制品检定所提供(批号110743-200303)试剂均为分析纯。
2、提取条件及溶剂的选择冰片易溶于无水乙醇，故选无水乙醇做为溶剂。因本制剂中冰片采用适当工艺进行包和，因此进行了提取方法考察，以确定提取条件，因实验条件下无法确定超声波振荡器的功率及频率，为保证方法的耐用性故暂不考察超声处理，而采用加入内标溶液，水浴回流提取，结果见表15。
表15回流时间考查
结果显示采用无水乙醇回流方法进行提取时，当回流时间大于30分钟，随着回流时间的增加，含量有下降趋势，根据试验结果，采用回流15分钟作为提取方法。
3、内标物的选择，因水杨酸甲酯在下述色谱条件下，保留时间及理论板数均同冰片中龙脑和异龙脑峰相近，是气相色谱法测定冰片含量常用的内标物。故本方法采用水杨酸甲酯做为内标物。
4、色谱条件及系统适用性试验HP-INNOWAX弹性石英毛细管柱(30m×0.53mm×1μm)；程序升温初始140℃，保持7分钟，以每分钟50℃升至220℃保持2分钟；载气流速每分钟1.5ml；分流进样，分流比50∶1。理论板数按水杨酸甲酯峰计算，应不低于5000。
在此色谱条件下冰片中的龙脑和异龙脑及内标物水杨酸甲酯色谱峰分离度均符合要求。
5、对照品溶液及供试品溶液的制备见后述样品冰片含量测定方法。
6、线性关系考察精密称取冰片对照品26.97mg，置25ml量瓶中，精密加入内标溶液20ml，振摇，使溶解，做为贮备液，分别精密量取贮备液0.5、1、2、2.5、3.5ml，置10ml量瓶中，加内标溶液稀释至刻度，摇匀。分别取2μl注入气相色谱仪，以冰片对照品中的龙脑峰和异龙脑峰面积总和与内标峰面积的比值为纵坐标，冰片浓度(mg/ml)为横坐标(见表17)，得回归方程Y＝7.0889X-0.0118，r＝1.000；冰片浓度在0.06743mg～0.472mg范围内有良好的线性关系。
表16冰片线性关系考察结果
7、专属性试验取缺冰片阴性试验样品，按含量测定方法进样，结果在与龙脑和异龙脑相同位置无色谱峰出现，表明阴性对照无干扰。
8、精密度试验取同一份对照品溶液，按含量测定下的色谱条件，连续进样5次，测定内标与异龙脑、龙脑峰面积，计算两者异龙脑和龙脑峰面积之和与内标峰面积的比值，结果RSD为0.29％，见表17。
表17精密度试验结果
9、稳定性试验取同一份对照品溶液，按含量测定色谱条件，间隔一定时间进样，测定内标与龙脑、异龙脑峰面积，计算龙脑和异龙脑峰面积之和与内标峰面积的比值，结果显示供试品溶液在8小时内稳定，见表18。
表18稳定性试验结果
9、重复性试验取同一批号(批号050401)样品6份，按含量测定方法测定并计算冰片含量，结果冰片平均含量为2.34mg/片，RSD为0.77％(n＝6)，见表19。
表19重复性性试验结果
10、回收率试验精密称取已知冰片含量的样品(批号050501)细粉适量，精密加入含冰片对照品6.7425mg的内标溶液50ml，按含量测定方法测定并计算含量，结果显示平均回收率为98.4％、RSD为0.96％(见表20)。
表20回收率试验结果
11、耐用性试验为保证方法的耐用性，分别用135℃和145℃的柱温条件测定样品，结果龙脑和异龙脑及内标物水杨酸甲酯色谱峰分离度均符合要求。
12、样品中冰片含量测定照气相色谱法(中国药典2005版一部附录VI E)测定。
色谱条件与系统适用性试验 HP-INNOWAX弹性石英毛细管柱(30m×0.53mm×0.32μm)；程序升温初始140℃，保持7分钟，以每分钟50℃升至220℃保持2分钟；载气流速每分钟1.5ml；理论板数按水杨酸甲酯峰计算，应不低于5000。
校正因子测定 取水杨酸甲酯适量，精密称定，加无水乙醇制成每1ml含0.20mg的溶液，作为内标溶液。另取冰片对照品适量，精密称定，加内标溶液溶解并稀释成每1ml含0.25mg的溶液，吸取2μl注入气相色谱仪，以龙脑和异龙脑峰面积之和为冰片峰面积，计算校正因子。
测定法 取本制剂10片，精密称定，研细，精密称取细粉适量(约含冰片12.5mg)，置平底烧瓶中，精密加入内标溶液50ml，水浴回流15分钟，放冷，滤过，取续滤液，作为供试品溶液；取2μl注入气相色谱仪，测定，按内标法计算，即得。
本制剂每片含冰片(C10H18O)不得低于2.0mg。
按上述方法测定供试品，结果见表21。
表21样品测定结果
根据测定结果和本制剂处方，暂将含量限度定为本制剂每片含冰片不得低于2.0mg。
具体实施例方式本发明的实施例1丹参255g、三七50g、冰片2.85g、交联聚乙烯吡咯烷酮170g、低取代羟丙纤维素71g、微晶纤维素71g、阿司帕坦10g、硬脂酸镁4g取丹参、三七加水煎煮三次，每次1小时，合并煎煮液，滤过，滤液浓缩，加入2倍量乙醇，静置24小时，滤过，回收乙醇，并浓缩至55～80℃相对密度为1.33～1.35的稠膏，真空干燥，粉碎，过80目筛，备用；取2.85g冰片溶于86.4ml95％乙醇中，制成冰片的饱和醇溶液，17.27gβ-环糊精溶于431.75ml55℃热水中，制成β-环糊精的饱和水溶液，将冰片饱和醇溶液加入在缓慢搅拌状态下的β-环糊精的饱和水溶液中，并继续搅拌30分钟，冷藏24小时，抽滤，滤渣用冷水冲洗，抽干后于40℃干燥，即得冰片包合物，备用；干浸膏粉与交联聚乙烯吡咯烷酮、低取代羟丙纤维素、微晶纤维素混合均匀，用95％乙醇制粒，干燥，干颗粒与阿司帕坦、硬脂酸镁、冰片包合物混合均匀，压制成1000片，包装，即得。本产品口服，一次2片，一日3次，28天为一个疗程。
本发明的实施例2所述质量控制方法包括以下内容性状药物为淡棕黄色至淡棕色片，片面有散在斑点；气芳香，味微苦。
鉴别(1)取本制剂8片，研细，加乙水无醇15ml，超声处理10分钟，滤过，滤液作为供试品溶液；另取冰片对照品，加无水乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典附录VIB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液15μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷∶乙酸乙酯＝17∶3为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
(2)取本制剂4片，研细，置离心管中，加入约40℃的稀氨溶液9ml，振摇使溶解，离心，取上清液，通过内径约0.7ml、柱高约5ml的D101型大孔吸附树脂柱，用水15ml洗脱，弃去水洗脱液，再用甲醇洗脱，弃去初洗脱液约0.4ml，收集续洗脱液约5ml，作为供试品溶液；另取三七皂苷R1对照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典附录VIB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液15μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇∶乙酸乙酯∶水＝4∶1∶5的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热约10分钟；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
(3)取本制剂3片，研细，置离心管中，加水3ml和稀盐酸2滴，振摇使溶解，加入乙酸乙酯3ml，振摇1分钟后离心2分钟，取上清液作为供试品溶液；另取丹参素钠对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典附录VIB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl、对照品溶液2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷∶丙酮∶甲酸＝25∶10∶4为展开剂，展开，取出，晾干，置氨蒸气中熏15分钟后，显淡黄色斑点，放置30分钟置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
检查崩解时限 取10ml刻度试管，装入2ml蒸馏水，置37℃水浴中，取本制剂1片，放入试管内，立即计时，应在1分钟内崩解，并不得有大于二号筛孔径的颗粒。
其他 应符合中国药典附录ID片剂项下有关的各项规定。
含量测定(1)丹参素钠 照中国药典附录VID高效液相色谱法测定色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇∶水∶冰醋酸＝8∶91∶1为流动相；检测波长为281nm；理论板数按丹参素钠峰计算应不低于2000。
对照品溶液的制备 取丹参素钠对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.16mg的溶液，相当于每1ml含丹参素0.144mg，即得。
供试品溶液的制备 取本制剂20片，研细，取约1.5g，精密称定，置100ml锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，称定重量，于功率50W、频率50KHz条件下超声处理10分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，以2000转/分的转速离心5分钟，取上清液，即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本制剂每片含丹参以丹参素C9H10O5计，不得少于0.50mg。
(2)冰片 照中国药典附录VI E气相色谱法测定色谱条件与系统适用性试验 30m×0.53mm×1μm的HP-INNOWAX弹性石英毛细管柱；程序升温初始140℃，保持7分钟，以每分钟50℃升至220℃保持2分钟；载气流速每分钟1.5ml；理论板数按水杨酸甲酯峰计算，应不低于5000。
校正因子测定 取水杨酸甲酯适量，精密称定，加无水乙醇制成每1ml含0.20mg的溶液，作为内标溶液；另取冰片对照品适量，精密称定，加内标溶液溶解并稀释成每1ml含0.25mg的溶液，吸取2μl注入气相色谱仪，计算校正因子。
测定法 取本制剂10片，精密称定，研细，精密称取约含冰片12.5mg的细粉适量，置平底烧瓶中，精密加入内标溶液50ml，水浴回流15分钟，放冷，滤过，取续滤液，作为供试品溶液；取2μl注入气相色谱仪，测定，按内标法计算，即得。
本制剂每片含冰片C10H18O不得低于2.0mg。
本发明的实施例3质量控制方法可以包括以下内容性状药物为淡棕黄色至淡棕色片，片面有散在斑点；气芳香，味微苦。
鉴别(1)取本制剂4片，研细，置离心管中，加入约40℃的稀氨溶液9ml，振摇使溶解，离心，取上清液，通过内径约0.7ml、柱高约5ml的D101型大孔吸附树脂柱，用水15ml洗脱，弃去水洗脱液，再用甲醇洗脱，弃去初洗脱液约0.4ml，收集续洗脱液约5ml，作为供试品溶液；另取三七皂苷R1对照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典附录VIB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液15μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇∶乙酸乙酯∶水＝4∶1∶5的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热约10分钟；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
(2)取本制剂3片，研细，置离心管中，加水3ml和稀盐酸2滴，振摇使溶解，加入乙酸乙酯3ml，振摇1分钟后离心2分钟，取上清液作为供试品溶液；另取丹参素钠对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典附录VIB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl、对照品溶液2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷∶丙酮∶甲酸＝25∶10∶4为展开剂，展开，取出，晾干，置氨蒸气中熏15分钟后，显淡黄色斑点，放置30分钟置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
检查应符合中国药典附录ID片剂项下有关的各项规定。
含量测定冰片 照中国药典附录VI E气相色谱法测定色谱条件与系统适用性试验 30m×0.53mm×1μm的HP-INNOWAX弹性石英毛细管柱；程序升温初始140℃，保持7分钟，以每分钟50℃升至220℃保持2分钟；载气流速每分钟1.5ml；理论板数按水杨酸甲酯峰计算，应不低于5000。
校正因子测定 取水杨酸甲酯适量，精密称定，加无水乙醇制成每1ml含0.20mg的溶液，作为内标溶液；另取冰片对照品适量，精密称定，加内标溶液溶解并稀释成每1ml含0.25mg的溶液，吸取2μl注入气相色谱仪，计算校正因子。
测定法 取本制剂10片，精密称定，研细，精密称取约含冰片12.5mg的细粉适量，置平底烧瓶中，精密加入内标溶液50ml，水浴回流15分钟，放冷，滤过，取续滤液，作为供试品溶液；取2μl注入气相色谱仪，测定，按内标法计算，即得。
本制剂每片含冰片C10H18O不得低于2.0mg。
本发明的实施例4质量控制方法可以包括以下内容性状药物为淡棕黄色至淡棕色片，片面有散在斑点；气芳香，味微苦。
鉴别(1)取本制剂8片，研细，加乙水无醇15ml，超声处理10分钟，滤过，滤液作为供试品溶液；另取冰片对照品，加无水乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典附录VIB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液15μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷∶乙酸乙酯＝17∶3为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
(2)取本制剂4片，研细，置离心管中，加入约40℃的稀氨溶液9ml，振摇使溶解，离心，取上清液，通过内径约0.7ml、柱高约5ml的D101型大孔吸附树脂柱，用水15ml洗脱，弃去水洗脱液，再用甲醇洗脱，弃去初洗脱液约0.4ml，收集续洗脱液约5ml，作为供试品溶液；另取三七皂苷R1对照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典附录VIB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液15μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇∶乙酸乙酯∶水＝4∶1∶5的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热约10分钟；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
含量测定丹参素钠 照中国药典附录VID高效液相色谱法测定色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇∶水∶冰醋酸＝8∶91∶1为流动相；检测波长为281nm；理论板数按丹参素钠峰计算应不低于2000。
对照品溶液的制备 取丹参素钠对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.16mg的溶液，相当于每1ml含丹参素0.144mg，即得。
供试品溶液的制备 取本制剂20片，研细，取约1.5g，精密称定，置100ml锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，称定重量，于功率50W、频率50KHz条件下超声处理10分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，以2000转/分的转速离心5分钟，取上清液，即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本制剂每片含丹参以丹参素C9H10O5计，不得少于0.50mg。
本发明的实施例5质量控制方法可以包括以下内容性状药物为淡棕黄色至淡棕色片，片面有散在斑点；气芳香，味微苦。
鉴别(1)取本制剂8片，研细，加乙水无醇15ml，超声处理10分钟，滤过，滤液作为供试品溶液；另取冰片对照品，加无水乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典附录VIB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液15μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷∶乙酸乙酯＝17∶3为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
(2)取本制剂3片，研细，置离心管中，加水3ml和稀盐酸2滴，振摇使溶解，加入乙酸乙酯3ml，振摇1分钟后离心2分钟，取上清液作为供试品溶液；另取丹参素钠对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典附录VIB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl、对照品溶液2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷∶丙酮∶甲酸＝25∶10∶4为展开剂，展开，取出，晾干，置氨蒸气中熏15分钟后，显淡黄色斑点，放置30分钟置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
检查崩解时限 取10ml刻度试管，装入2ml蒸馏水，置37℃水浴中，取本制剂1片，放入试管内，立即计时，应在1分钟内崩解，并不得有大于二号筛孔径的颗粒。
其他 应符合中国药典附录ID片剂项下有关的各项规定。
本发明的实施例6质量控制方法可以包括以下内容性状药物为淡棕黄色至淡棕色片，片面有散在斑点；气芳香，味微苦。
检查崩解时限 取10ml刻度试管，装入2ml蒸馏水，置37℃水浴中，取本制剂1片，放入试管内，立即计时，应在1分钟内崩解，并不得有大于二号筛孔径的颗粒。
其他 应符合中国药典附录ID片剂项下有关的各项规定。
含量测定(1)丹参素钠 照中国药典附录VID高效液相色谱法测定色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇∶水∶冰醋酸＝8∶91∶1为流动相；检测波长为281nm；理论板数按丹参素钠峰计算应不低于2000。
对照品溶液的制备 取丹参素钠对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.16mg的溶液，相当于每1ml含丹参素0.144mg，即得。
供试品溶液的制备 取本制剂20片，研细，取约1.5g，精密称定，置100ml锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，称定重量，于功率50W、频率50KHz条件下超声处理10分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，以2000转/分的转速离心5分钟，取上清液，即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本制剂每片含丹参以丹参素C9H10O5计，不得少于0.50mg。
(2)冰片 照中国药典附录VI E气相色谱法测定色谱条件与系统适用性试验 30m×0.53mm×1μm的HP-INNOWAX弹性石英毛细管柱；程序升温初始140℃，保持7分钟，以每分钟50℃升至220℃保持2分钟；载气流速每分钟1.5ml；理论板数按水杨酸甲酯峰计算，应不低于5000。
校正因子测定 取水杨酸甲酯适量，精密称定，加无水乙醇制成每1ml含0.20mg的溶液，作为内标溶液；另取冰片对照品适量，精密称定，加内标溶液溶解并稀释成每1ml含0.25mg的溶液，吸取2μl注入气相色谱仪，计算校正因子。
测定法 取本制剂10片，精密称定，研细，精密称取约含冰片12.5mg的细粉适量，置平底烧瓶中，精密加入内标溶液50ml，水浴回流15分钟，放冷，滤过，取续滤液，作为供试品溶液；取2μl注入气相色谱仪，测定，按内标法计算，即得。
本制剂每片含冰片C10H18O不得低于2.0mg。
权利要求
1.一种复方丹参口腔崩解片，其特征在于它是用丹参255g、三七50g、冰片2.85g和交联聚乙烯吡咯烷酮170g、低取代羟丙纤维素71g、微晶纤维素71g、阿司帕坦10g、硬脂酸镁4g制备而成的。
2.如权利要求1所述复方丹参口腔崩解片的制备方法，其特征在于取丹参、三七加水煎煮三次，每次1小时，合并煎煮液，滤过，滤液浓缩，加入2倍量乙醇，静置24小时，滤过，回收乙醇，并浓缩至55～80℃相对密度为1.33～1.35的稠膏，真空干燥，粉碎，过80目筛，备用；冰片用β-环糊精包合，备用；干浸膏粉与交联聚乙烯吡咯烷酮、低取代羟丙纤维素、微晶纤维素混合均匀，用95％乙醇制粒，干燥，干颗粒与阿司帕坦、硬脂酸镁、冰片包合物混合均匀，压片，包装，即得。
3.按照权利要求2所述复方丹参口腔崩解片的制备方法，其特征在于冰片包合物的制备方法为2.85g冰片溶于86.4ml95％乙醇中，制成冰片的饱和醇溶液，17.27gβ-环糊精溶于431.75ml55℃热水中，制成β-环糊精的饱和水溶液，将冰片饱和醇溶液加入在缓慢搅拌状态下的β-环糊精的饱和水溶液中，并继续搅拌30分钟，冷藏24小时，抽滤，滤渣用冷水冲洗，抽干后于40℃干燥，即得冰片包合物。
4.如权利要求1或2所述复方丹参口腔崩解片的质量控制方法，其特征在于所述质量控制方法主要包括性状、鉴别、检查以及含量测定项目中的部分或全部；其中鉴别包括对制剂中冰片、三七和丹参的薄层色谱鉴别；含量测定是对制剂中丹参和冰片的含量测定。
5.按照权利4所述复方丹参口腔崩解片的质量控制方法，其特征在于冰片的鉴别方法是以冰片对照品为对照，以环己烷∶乙酸乙酯＝17∶3为展开剂的薄层色谱法；三七的鉴别方法是以三七皂苷R1对照品为对照，以正丁醇∶乙酸乙酯∶水＝4∶1∶5的上层溶液为展开剂的薄层色谱法；丹参的鉴别方法是以丹参素钠对照品为对照，以三氯甲烷∶丙酮∶甲酸＝25∶10∶4为展开剂的薄层色谱法。
6.按照权利要求4或5所述复方丹参口腔崩解片的质量控制方法，其特征在于具体的鉴别方法包括以下项目的部分或全部(1)取本制剂8片，研细，加乙水无醇15ml，超声处理10分钟，滤过，滤液作为供试品溶液；另取冰片对照品，加无水乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典附录VIB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液15μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷∶乙酸乙酯＝17∶3为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(2)取本制剂4片，研细，置离心管中，加入约40℃的稀氨溶液9ml，振摇使溶解，离心，取上清液，通过内径约0.7ml、柱高约5ml的D101型大孔吸附树脂柱，用水15ml洗脱，弃去水洗脱液，再用甲醇洗脱，弃去初洗脱液约0.4ml，收集续洗脱液约5ml，作为供试品溶液；另取三七皂苷R1对照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典附录VIB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液15μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇∶乙酸乙酯∶水＝4∶1∶5的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热约10分钟；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(3)取本制剂3片，研细，置离心管中，加水3ml和稀盐酸2滴，振摇使溶解，加入乙酸乙酯3ml，振摇1分钟后离心2分钟，取上清液作为供试品溶液；另取丹参素钠对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典附录VIB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl、对照品溶液2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷∶丙酮∶甲酸＝25∶10∶4为展开剂，展开，取出，晾干，置氨蒸气中熏15分钟后，显淡黄色斑点，放置30分钟置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
7.按照权利4所述复方丹参口腔崩解片的质量控制方法，其特征在于丹参的含量测定方法是以丹参素钠对照品为对照，以甲醇∶水∶冰醋酸＝8∶91∶1为流动相的高效液相色谱法；冰片的含量测定方法是以冰片对照品为对照的气相色谱法。
8.按照权利要求4或7所述复方丹参口腔崩解片的质量控制方法，其特征在于具体的含量测定方法包括以下项目的部分或全部(1)丹参素钠 照中国药典附录VID高效液相色谱法测定色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇∶水∶冰醋酸＝8∶91∶1为流动相；检测波长为281nm；理论板数按丹参素钠峰计算应不低于2000；对照品溶液的制备 取丹参素钠对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.16mg的溶液，相当于每1ml含丹参素0.144mg，即得；供试品溶液的制备 取本制剂20片，研细，取约1.5g，精密称定，置100ml锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，称定重量，于功率50W、频率50KHz条件下超声处理10分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，以2000转/分的转速离心5分钟，取上清液，即得；测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本制剂每片含丹参以丹参素C9H1005计，不得少于0.50mg；(2)冰片 照中国药典附录VI E气相色谱法测定色谱条件与系统适用性试验 30m×0.53mm×1μm的HP-INNOWAX弹性石英毛细管柱；程序升温初始140℃，保持7分钟，以每分钟50℃升至220℃保持2分钟；载气流速每分钟1.5ml；理论板数按水杨酸甲酯峰计算，应不低于5000；校正因子测定 取水杨酸甲酯适量，精密称定，加无水乙醇制成每1ml含0.20mg的溶液，作为内标溶液；另取冰片对照品适量，精密称定，加内标溶液溶解并稀释成每1ml含0.25mg的溶液，吸取2μl注入气相色谱仪，计算校正因子；测定法 取本制剂10片，精密称定，研细，精密称取约含冰片12.5mg的细粉适量，置平底烧瓶中，精密加入内标溶液50ml，水浴回流15分钟，放冷，滤过，取续滤液，作为供试品溶液；取2μl注入气相色谱仪，测定，按内标法计算，即得；本制剂每片含冰片C10H180不得低于2.0mg。
9.按照权利4所述复方丹参口腔崩解片的质量控制方法，其特征在于所述质量控制方法包括性状药物为淡棕黄色至淡棕色片，片面有散在斑点；气芳香，味微苦；鉴别(1)取本制剂8片，研细，加乙水无醇15ml，超声处理10分钟，滤过，滤液作为供试品溶液；另取冰片对照品，加无水乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典附录VIB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液15μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷∶乙酸乙酯＝17∶3为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(2)取本制剂4片，研细，置离心管中，加入约40℃的稀氨溶液9ml，振摇使溶解，离心，取上清液，通过内径约0.7ml、柱高约5ml的D101型大孔吸附树脂柱，用水15ml洗脱，弃去水洗脱液，再用甲醇洗脱，弃去初洗脱液约0.4ml，收集续洗脱液约5ml，作为供试品溶液；另取三七皂苷R1对照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典附录VIB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液15μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇∶乙酸乙酯∶水＝4∶1∶5的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热约10分钟；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(3)取本制剂3片，研细，置离心管中，加水3ml和稀盐酸2滴，振摇使溶解，加入乙酸乙酯3ml，振摇1分钟后离心2分钟，取上清液作为供试品溶液；另取丹参素钠对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典附录VIB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl、对照品溶液2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷∶丙酮∶甲酸＝25∶10∶4为展开剂，展开，取出，晾干，置氨蒸气中熏15分钟后，显淡黄色斑点，放置30分钟置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；检查崩解时限 取10ml刻度试管，装入2ml蒸馏水，置37℃水浴中，取本制剂1片，放入试管内，立即计时，应在1分钟内崩解，并不得有大于二号筛孔径的颗粒；其他 应符合中国药典附录ID片剂项下有关的各项规定；含量测定(1)丹参素钠 照中国药典附录VID高效液相色谱法测定色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇∶水∶冰醋酸＝8∶91∶1为流动相；检测波长为281nm；理论板数按丹参素钠峰计算应不低于2000；对照品溶液的制备 取丹参素钠对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.16mg的溶液，相当于每1ml含丹参素0.144mg，即得；供试品溶液的制备 取本制剂20片，研细，取约1.5g，精密称定，置100ml锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，称定重量，于功率50W、频率50KHz条件下超声处理10分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，以2000转/分的转速离心5分钟，取上清液，即得；测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本制剂每片含丹参以丹参素C9H1005计，不得少于0.50mg；(2)冰片 照中国药典附录VI E气相色谱法测定色谱条件与系统适用性试验 30m×0.53mm×1μm的HP-INNOWAX弹性石英毛细管柱；程序升温初始140℃，保持7分钟，以每分钟50℃升至220℃保持2分钟；载气流速每分钟1.5ml；理论板数按水杨酸甲酯峰计算，应不低于5000；校正因子测定 取水杨酸甲酯适量，精密称定，加无水乙醇制成每1ml含0.20mg的溶液，作为内标溶液；另取冰片对照品适量，精密称定，加内标溶液溶解并稀释成每1ml含0.25mg的溶液，吸取2μl注入气相色谱仪，计算校正因子；测定法 取本制剂10片，精密称定，研细，精密称取约含冰片12.5mg的细粉适量，置平底烧瓶中，精密加入内标溶液50ml，水浴回流15分钟，放冷，滤过，取续滤液，作为供试品溶液；取2μl注入气相色谱仪，测定，按内标法计算，即得；本制剂每片含冰片C10H180不得低于2.0mg。
全文摘要
本发明提供了一种复方丹参口腔崩解片及制备方法和质量控制方法，它是用丹参255g、三七50g、冰片2.85g和适量辅料制备而成的；与现有技术相比，本发明口腔崩解片能在口腔中迅速崩解，服用方便，吸收更快，生物利用度更高，消化道粘膜刺激作用小，其制备工艺有利于工业化大生产；改剂成为口腔崩解片，能充分发挥其剂型优势，有利于患者用药。此外，本发明质量控制方法精密度高，重现性好，可操作性强，回收率较高，提高了复方丹参制剂的质量控制标准，从而保证了该制剂的临床疗效。
文档编号G01N30/90GK1827125SQ20061020035
公开日2006年9月6日 申请日期2006年4月17日 优先权日2006年4月17日
发明者陈法贵, 王天兴, 徐丽君 申请人:浙江大德药业集团有限公司