专利名称：一种解痉、镇痛药及制备方法
技术领域：
本发明涉及一种组合药物，具体地说是一种治疗腹部平滑肌痉挛痛、头痛的组合药物及制备方法。
背景技术：
芍药甘草汤为国内中医领域众所周知的名方，中医临床主要用于治疗月经痛、子宫痉挛和胃痛等腹部平滑肌痉挛痛。
芍药甘草汤虽然具有独特的疗效，但其剂型仍为传统的汤剂。显然不能工业化生产，而是服用者自家煎煮。又因为是全材入药，药物活性成份不清，无疗效甚至有害的杂质混在其中。因此，对中草药进行药理分析，分离出药用活性物质，并通过规模化生产制成无杂质、剂量小、易流通、服用方便的现代药物，是中药发展的趋势。
为探讨芍药甘草汤的药物活性，我们在给大鼠灌服芍药甘草汤后，取服药大鼠血清，用HPLC和HPLC-MS等仪器检测服药动物血清，得出主要吸收入血的有效成份为甘草次酸(glycyrrhetinic acid，或glycyrrhetic acid)、甘草酸(glycyrrhizic acid，或glycyrrhizin)、芍药苷(paeoniflorin)和芍药苷代谢物(paeonimetaboline1，PM-1)经进一步实验证明，上述化合物中的甘草酸和甘草次酸为解痉抗炎的有效成份，而其中的甘草次酸又为口服化合物甘草酸的吸入血代谢产物，其解痉作用明显强于甘草酸，且甘草次酸血药浓度明显高于甘草酸。为此可以用甘草次酸作为组合药中解痉成份，上述实验还证明芍药苷和芍药苷代谢物是镇痛和镇静有效成份，虽然芍药苷代谢物镇痛作用强于芍药苷，但难于大量制备。而且芍药苷代谢物为芍药苷经肠内菌代谢后的吸入血的产物，因而可以用芍药苷作为药物中的镇痛成份。
发明内容
本发明的目的是用分析芍药甘草汤发现的具有解痉、镇痛的药物活性物质组合一种用于解痉、镇痛的药物。
本发明的另一个目的是给出一种以甘草和芍药为原料，制备上述药物的方法。
本发明药物的技术方案是由含有腹部平滑肌解痉有效量的甘草次酸和镇痛有效量的芍药苷及可药用的载体/或赋形剂组成。
按照本发明，该药物组合物可以制成通常的片剂(甘芍片)、胶囊(甘芍胶囊)及其他的固体剂型或针剂。制备固体剂型可加入淀粉等赋型材料。可加常规溶剂制成针剂。
本发明药物的制备方法是1、甘草次酸的制备甘草粗粉加水煮沸，滤取药液，加浓硫酸至不再析出沉淀，放置，滤取，棕色沉淀，水洗干燥，得甘草酸粗品。用丙酮回流提取，得丙酮提取液、放冷，搅拌下加入KOH乙醇液至弱碱性，放置，析出结晶，过滤的结晶(甘草酸三钾盐)，干燥，加冰醋酸热溶，放冷，析出结晶，过滤，得甘草酸单钾盐，加稀硫酸，加热，抽滤，水洗至中性，干燥，得白色甘草次酸粗品，再将其溶于热氯仿中，趁热过滤，将氯仿溶液放冷，过氧化铝层析柱，用氯仿洗脱，得甘草次酸，乙醇热溶，趁热倒入沸水中，放置，得结晶，过滤，即得药用甘草次酸结晶。
2、芍药苷提取取白芍药材加入乙醇溶液热回流或冷浸提取，将乙醇提取液浓缩，再加乙醇放至、过滤，再往乙醇滤液中加活性碳，搅拌，过滤，乙醇滤液浓缩至无醇味为止，所得上述提取物在大孔树脂上纯化，先用水洗至Mollious反应呈阴性，再用乙醇洗脱，分段收集乙醇洗脱液，减压浓缩、干燥得浅黄色芍药苷。
3、制剂制备将甘草次酸和芍药苷按重量1∶1至1∶2混合，再加入药用载体和/或赋形剂制成片、胶囊或针剂。
本发明的积极效果体现在首先是得到一种体积小、疗效好，无毒副作用，服用方便，平滑肌解痉镇痛药物，其次完成了一种从甘草芍药中提取治疗腹部平滑肌解痉镇痛的活性物质。本发明疗效的实验过程和结果如下1.对小鼠自发活动的影响将90只小鼠匀分9组，每组雌雄各半，按表1所示剂量和给药途径给药1次，第一组为罐胃对照组，罐胃0.2％CMC水混悬液10ml/kg。第6组为注射给药对照组，皮下注射生理盐水10ml/kg。1-5组小鼠于给药后1小时，6-9组于给药后30分钟，将小鼠置于自发活动观察仪内，记录5分钟内每只小鼠的自发活动次数。结果如表1所示，由表1可见，甘芍胶囊和甘芍注射液均有明显的抑制小鼠自发活动的作用。表1.甘芍胶囊和甘芍注射液对小鼠自发活动的影响(X±S)n＝10组别 剂量(mg/kg)小鼠活动次数(5min) 抑制率(％)1.对照 0.2％CMC po 144.8±22.52.安定 5po 56.8±23.1***60.73.甘芍胶囊 300 po 45.2±9.9***68.84. 150 po 53.5±20.8**63.15. 75 po 73.5±22.5*49.26.生理盐水 10ml/kg im 132.7±36.77甘芍注射液 60 sc 50.4±12.9***62.08. 30 sc 64.3±16.5**51.59. 15 sc 71.4±13.6*注与阴性对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01，***p＜0.0012.对腹腔注射醋酸所致小鼠扭体反应和腹腔渗出性炎症反应的影响本实验小鼠分组和给药同于实验1。1-5组小鼠于给药后1小时，6-9组于给药30分钟，给小鼠尾静脉注射依文氏蓝(2％，5ml/kg)，于注射依文氏蓝2分钟后，向小鼠腹腔注射1％醋酸10ml/kg。记录每只小鼠于注射醋酸后10分钟内扭体次数，然后立即将小鼠拉断颈椎处死，剖腹用生理盐水4ml/鼠冲洗腹腔渗出染料。用光电比色计(620nm)测定测定染料渗出量。结果见表2。表2.苷芍胶囊和甘芍注射液对醋酸所致小鼠扭体反应和腹腔渗出性炎症的影响。(X±S)，n＝10。组别 剂量 腹腔内透入的染 扭体次数 抑制率(mg/kg) 料量μg/ml 10min ％1.对照 0.2％CMC po 56±815.6±2.92.阿司匹林400 po 33±11**4.7±2.2***69.93.甘芍胶囊300 po 26±8***3.1±0.9**80.14.150 po 28±8***5.3±1.9*66.05.75 po 33±3**6.1±1.6*60.96.对照 生理盐水10(ml，kg)im 57±11 14.1±2.47.甘芍注射液 60 im 27±5***3.7±1.6***70.88 30 im 32±3**5.0±1.2**64.59 15 im 35±4*6.0±1.5*57.5注与各自对照组比较，*p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001。
3.甘芍胶囊解痉试验—对离体大鼠小肠平滑肌活动的影响材料与方法动物 Wistar大鼠，体重250±20g，雌、雄兼用。
药品 不同浓度的芍药甙、甘草次酸，甘芍注射剂由吉林天然药物研究所植化室提；氯化乙酰胆碱(1g/支，北京市东环联合化工厂)；硫酸阿托品注射液(规格0.5mg/mL，河南省开封制药厂)。
仪器 Powerlab/8s数据记录分析仪及相关附件(澳大利亚埃德公司产品)；YSD-4G型药理生理实验多用仪及其恒温水浴装置(安徽蚌埠无线电二厂产品)。
方法 大鼠禁食48小时后处死，打开腹腔，在小肠上部剪取一段肠管置于盛有台氏液的培养皿中，沿肠壁轻轻分离掉肠系膜，用台氏液将肠管内冲洗干净后，剪成数条2cm左右的小段备用。通过与YSD-4G型药理生理实验多用仪相连的水银接点温度计调解、控制恒温水浴槽的温度，使其恒定在37±0.5℃，麦氏浴管内台氏液体积约为50mL，台氏液液面高度与水浴槽的液面高度基本相同，空气通入量控制在50个气泡左右/分钟，选取一段小肠，一端用线扎紧固定在通气管的弯钩上，另一端与装满水的毛细玻璃管相连接。当离体肠管收缩时，毛细玻璃管内水柱上升.液面上升的幅度与离体肠管收缩强度相关。稳定20分钟，将毛细管内液面调至“0”位，随后向麦氏浴管内加入0.001％的氯化乙酰胆碱0.1ml，使肠管发生痉挛并处于紧张收缩状态，在肠管收缩最明显处，分三种方法给药①加入台氏液1mL；②加入阿扎品1mL；③随后加入不同浓度的甘草次酸，芍药甙，甘芍注射剂.观察药物的解痉作用。每完成一步，更换新的肠管和营养液，稳定20分钟后再进行下一步骤。
实验结果甘草次酸和甘芍注射剂对氯化乙酰胆碱所致大鼠肠管痉挛性活动均有不同程度的抑制作用，甘芍注射剂的解痉作用更为明显。但芍药苷解痉作用不明显(表3).
表3.甘草次酸，芍药苷和甘芍注射剂对大鼠离体肠管收缩运动的影响。(X±S)，n＝3。组别 肠管收缩幅度 抑制率浴槽内药物浓度(g/ml) mm ％氯化乙酰胆碱 4 25±3.0阿托品 106±1.0 76甘草次酸 408±2.0 682012±2.0521016±1.736
524±2.0 4氯化乙酰胆碱 420±1.0阿托品 10 7±1.0 65芍药苷 40 19±3.0 520 20±2.0 010 20±2.0 0氯化乙酰胆碱 424±2阿托品 10 6±275甘芍注射剂剂 40 6±27520 8±26710 12±2 58520±1 172.5 23±1 4实施例1、甘草次酸制备甘草粗粉加水煮沸3次，滤取药液，加浓硫酸至不再析出沉淀，放置，滤取，棕色沉淀，水洗干燥，得甘草酸粗品。用丙酮回流提取3次，得丙酮提取液、放冷，搅拌下加入20％的KOH乙醇液至弱碱性，放置，析出结晶，过滤的结晶(甘草酸三钾盐)，干燥，加冰醋酸热溶，放冷，析出结晶，过滤，得甘草酸单钾盐，加5％硫酸，加热10小时，抽滤，水洗至中性，干燥，得白色甘草次酸粗品，再将其溶于热氯仿中，趁热过滤，将氯仿溶液放冷，过氧化铝层析柱，用氯仿洗脱，得甘草次酸，乙醇热溶，趁热倒入1/2体积沸水中，放置，得结晶，过滤，即得药用甘草次酸结晶。
2、芍药苷提取取白芍药材用3-8倍量30％-60％乙醇热回流或冷浸提取2次，将乙醇提取液浓缩至相对密度1.1(50℃)，再用95％乙醇加至醇浓度为70％-90％，放置过夜，过滤，再往乙醇滤液中加入1％-2％的(M/V)活性碳，搅拌，过滤，乙醇滤液浓缩至无醇味为止，所得上述提取物在D101、D201两种大孔树脂上纯化，先用水洗至Mollious反应呈阴性，再用10％-30％乙醇洗脱，收集10％-30％乙醇洗脱液，减压浓缩、干燥得浅黄色芍药苷。3、制剂及其制备(1)甘芍胶囊(片剂)处方芍药苷(纯度90％) 153g甘草次酸(纯度95％)97g淀粉 适量制成 1000粒(片)制法将芍药苷和甘草次酸与适量淀粉充分混匀，装入胶囊或制粒压片。每1粒胶囊或每1片剂中含药0.25g。
适应症腹部平滑机痉挛痛(月经痛，子宫痉挛痛，胃溃疡所致胃肠痉挛痛)及头痛。
用法和用量疼痛时1次口服1-2粒(片)。(2.)甘芍注射液芍药苷(纯度90％) 30g甘草次酸(纯度95％)20g1，2-丙二醇 适量制成2ml安瓶注射剂 1000支制法将芍药苷和甘草次酸溶入溶解于适量丙二醇内，过滤，分装，灭菌即得.每1支含药物50mg。
适应症腹部平滑机痉挛痛(月经痛，子宫痉挛痛，胃溃疡所致胃肠痉挛痛及头痛。
用法和用量用时将1支甘芍注射剂药液稀释于500ml生理盐水中，静脉滴注。每次1-2支。
权利要求
1.一种解痉、镇痛的药物，其特征是由含有腹部平滑肌解痉有效量的甘草次酸和镇痛有效量的芍药苷及可药用的载体/或赋形剂组成。
2.根据权利要求1的一种解痉、镇痛的药物，其特征是用从植物甘草中提出的甘草次酸和从芍药中提取的芍药苷加载体和/或赋形剂制成的片、胶囊或针剂。
3.一种解痉、镇痛药物的制备方法，其特征是(1)、甘草次酸的制备甘草粗粉加水煮沸，滤取药液，加浓硫酸至不再析出沉淀，放置，滤取，棕色沉淀，水洗干燥，得甘草酸粗品。用丙酮回流提取，得丙酮提取液、放冷，搅拌下加入KOH乙醇液至弱碱性，放置，析出结晶，过滤的结晶(甘草酸三钾盐)，干燥，加冰醋酸热溶，放冷，析出结晶，过滤，得甘草酸单钾盐，加稀硫酸，加热，抽滤，水洗至中性，干燥，得白色甘草次酸粗品，再将其溶于热氯仿中，趁热过滤，将氯仿溶液放冷，过氧化铝层析柱，用氯仿洗脱，得甘草次酸，乙醇热溶，趁热倒入沸水中，放置，得结晶，过滤，即得药用甘草次酸结晶。(2)、芍药苷提取取白芍药材加入乙醇溶液热回流或冷浸提取，将乙醇提取液浓缩，再加乙醇放至、过滤，再往乙醇滤液中加活性碳，搅拌，过滤，乙醇滤液浓缩至无醇味为止，所得上述提取物在大孔树脂上纯化，先用水洗至Mollious反应呈阴性，再用乙醇洗脱，分段收集乙醇洗脱液，减压浓缩、干燥得浅黄色芍药苷。(3)、制剂制备将甘草次酸和芍药苷按重量1∶1至1∶2混合，再加入药用载体和/或赋形剂，制成片、胶囊或针剂。
全文摘要
一种解痉、镇痛药及制备方法，是根据芍药甘草汤的治病机理，从甘草中提取药物活性物质甘草次酸和从芍药中提取活性物质芍药苷，并取各自的有效量与可药用的载体和/或赋型剂组合成体积小、易贮存、服用方便、无毒副作用，具有和芍药甘草汤相同疗效的现代药物。
文档编号G01N30/90GK1449761SQ0210946
公开日2003年10月22日 申请日期2002年4月10日 优先权日2002年4月10日
发明者王本祥, 张连珠, 陈声武, 李海日 申请人:吉林天药科技股份有限公司