专利名称：一种高稳定性增强化学发光底物的制作方法
技术领域：
本发明涉及化学发光分析技术，为一种超微量分析方法，属于国际专利分类GO1N21/17“光学手段测试分析”技术领域。
背景技术：
化学发光分析技术是现代微量分析方法之一，由于其灵敏度高，简便快速，线性好，有效期长，安全无害(无放射性和致畸物污染)等特点而成为取代放免和酶联的重要技术。以辣根过氧化物酶标记的化学分析法是在免疫反应完成后，加入HRP底物H2O2，在碱性条件下，HRP催化H2O2，使发光底物鲁米诺发生化学反应而发光。但现有的该项技术一是H2O2随放置时间的延长而逐渐被破坏，二是产生的光信号不稳定，对检测结果造成偏差。
发明内容
本发明的目的，在于克服上述不足，提供一种高稳定性的增强化学发光底物及其检测方法。
本发明的技术方案如下。
一种高稳定性增强化学发光底物，该底物由特定比例的鲁米诺、增强剂对碘苯酚、协同增强剂四苯硼钠，氧化剂过氧化脲和H2O2，分别配制成的A液和B液组成。等量的A液和B液与免疫反应后的催化剂(如辣根过氧化物酶)标记物接触，通过化学反应生成一种激发态的产物，它在回到基态的过程中，释放出的能量转变成光子从而产生发光现象。其优点是具有发光灵敏度高、稳定性好、结果准确、使用方便和成本低等。适用于全自动、半自动和手工分析。可广泛用于临床检验，生物学研究，法医鉴定，农牧业及环境科学中对核酸及抗原抗体等生物大分子的检测。
化学发光免疫分析方法因对环境无污染、对人体无毒无害等综合优势和潜力，成为目前体外诊断试剂检测方法中的佼佼者。
本发明的目的是进一步提高化学发光免疫分析底物的稳定性，为产品的工业化生产和使用带来更大的方便性和灵活性。
附图为0～4小时测定同一系列校准品剂量-反应曲线稳定性的示意图。
附图的时间取值及计算结果如下0miny＝-0.9755x+1.2635 150miny＝-0.9055x+1.1964R2＝0.998 R2＝0.997230miny＝-0.9205x+1.2034 180miny＝-0.909x+1.2062R2＝0.9977 R2＝0.997760miny＝-0.9151x+1.2052 240miny＝-0.9094x+1.2093R2＝0.9972 R2＝0.997890miny＝-0.9068x+1.198R2＝0.99具体实施方式
底物液制备0.5mol/L pH8.6的硼酸缓冲液分别配制A液和B液A液含鲁米诺3.0mg/ml，增强剂对碘苯酚0.25mg/ml，协同增强剂四苯硼钠0.5mg/ml；B液含过氧化脲0.4g/ml，H2O20.1g/ml。
贮存稳定性高。A液和B液分别贮存。2～8℃保存有效期2年。
反应稳定性高。在HRP标记的免疫反应后样品管(孔)中加入等量混合的A液和B液，0～4小时测定的同一系列校准品剂量-反应曲线稳定(附图)；0～4小时同样品测定值变异系数小于5％，其对应的发光值变异系数(CV％)小于15％，参见附表0～4小时测定的同样品测定值及其对应发光值稳定性。
附表
权利要求
1.一种高稳定性增强化学发光底物，其特征在于该化学发光底物由A、B两种液体组成，并且在在辣根过氧化物酶标记的免疫反应后被加入样品管中等量混匀；用硼酸缓冲液分别配制A液和B液A液含鲁米诺和鲁米诺增强剂对碘苯酚和协同增强剂四苯硼钠，B液含氧化剂过氧化脲和H2O2。
2.一种高稳定性增强化学发光底物的检测方法，其特征在于检测方法包括以下步骤化学发光底物A液和B液的组成成分及制备；A液和B液分别贮存；临用前A液和B液等量混合，在辣根过氧化物酶标记的免疫反应后加入样品管孔中。
3.按照权利要求1所述的高稳定性增强化学发光底物及其检测方法，其特征在于其贮存稳定性，A液和B液分别贮存，2～8℃保存有效期2年；其反应稳定性4小时，包括在辣根过氧化物酶标记的免疫反应后样品管孔中加入等量混合的A液和B液其发光值的稳定性和被测物浓度值的稳定性。
全文摘要
本发明涉及一种高稳定性增强化学发光底物，该高稳定性增强化学发光底物由A液和B液组成，并且在辣根过氧化物酶标记的免疫反应后被加入混匀。其中A液中含有鲁米诺、增强剂对碘苯酚和协同增强剂四苯硼钠；B液中含有过氧化脲和H
文档编号G01N21/76GK1687751SQ20051007182
公开日2005年10月26日 申请日期2005年5月25日 优先权日2005年5月25日
发明者段虎 申请人:段虎