专利名称：一种石蜡组织芯片取样方法
技术领域：
本发明涉及一种石蜡组织芯片取样方法，用于在石蜡组织上提取目的组织，制备组织 芯片，属于组织芯片技术领域。
背景技术：
组织芯片技术是基因芯片技术的发展和延伸，与细胞芯片、蛋白芯片、抗体芯片一样， 属于一种特殊生物芯片技术。组织芯片技术可以将数十个甚至上千个不同个体的临床组织 标本按预先设计的顺序排列在一张玻片上进行分析研究，是一种高通量、多样本的分析工 具。组织芯片技术使科研人员能同时对几百甚至上千种组织样本同时进行分析，进行某一
个或多个特定的基因，或与其相关的表达产物的研究。该技术可以与DNA、 RNA、蛋白质、 抗体等技术相结合，与传统的病理学技术、组织化学及免疫组化技术相结合，在基因、基 因转录和相关表达产物生物学功能三个水平上进行研究。这对人类基因组学的研究与发 展，尤其对基因和蛋白质与疾病关系的研究，疾病相关基因的验证、新药物的开发与筛选、 疾病的分子诊断，治疗过程的追踪和预后等方面具有实际意义和广阔的市场前景。
目前，美国Clontech和Stratagene等少数生物技术公司己开展了人及动物的组织芯 片产品开发和销售，但数量少、价格高、品种单一，满足不了医学科研和医药工业研发的 需要。2001年4月，美国LifeSpan生物科学公司建立了正常和疾病组织基因表达数据库。 美国Tissuelnformactics公司用动物组织芯片技术进行药物毒理筛选和寻找新药物作用 位点。此外，日本、英国等国正积极筹建国家临床组织病理数据库。
中国在组织芯片技术方面的研究进展迅速。2001年10月，中国国家科技部将组织芯 片技术列为"十五"国家科技攻关西部开发重大项目，并己在西安正式立项。该立项分成 7个子项目，包括组织芯片技术、组织芯片生物信息数据库、自动化组织芯片仪、自动分 析装置、组织芯片相关技术与试剂、组织芯片实际应用技术，为中国与世界相关技术同步 发展奠定了基础。
目前，组织芯片的制备主要依靠机械化芯片制备仪来完成。制备仪包括操作平台、特 殊的打孔采样装置和一个定位系统。打孔采样装置对供体组织蜡块进行采样，同时也可对 受体蜡块进行打孔，其孔径与采样直径相同，两者均可精确定位。制备仪的定位装置可使 穿刺针或受体蜡块线性移动，从而制备出孔径、孔距、孔深完全相同的组织微阵列蜡块。通过切片辅助系统将其转移并固定到硅化和胶化玻片上即成为组织芯片。根据样本直径 (0. 2 2. 0 mra)不同，在一张45 mmX25 ram的玻片上可以排列40 2000个以上的组织 标本。一般按照样本数目的多少，将组织芯片分为低密度芯片(〈200点)、中密度芯片(200 600点)和高密度芯片(〉600点)。常用组织芯片含有组织标本的数目在50 800个之间。 根据研究目的不同，芯片种类可以分成肿瘤组织芯片、正常组织芯片、单一或复合、特定 病理类型等数10种组织芯片。
但目前依据上述方法制备组织芯片有以下不足
第一，现有组织芯片制作成本很高。除特殊的仪器设备外(数十万元)，制作1个组 织芯片的费用在万元以上，每张切片单价在50 100元； 第二、制备组织芯片需专门的技术人员；
第三，制备组织芯片时需待所有蜡块标本收集齐全后才能进行，日常工作中不能随时 取样。
第四，现有组织芯片机器取样只能为圆形，对有些肿瘤组织不太适合。
发明内容
本发明的目的是提供一种成本低、操作简单且取样形状多样的石蜡组织芯片取样方法。
为了达到上述目的，本发明的技术方案是提供一种石蜡组织芯片取样方法，其特征在
于，具体步骤为
第一步将废弃的石蜡组织切片刀的刀口用砂轮打磨掉，在刀身中部两侧制作对称的
凹槽，将刀身的一端打磨出方形刀口，所述方形刀口深6mm,宽a为0.5-10mm; 第二步在石蜡组织标记目的区域，沿标记线垂直向下切得到所需组织。 进一步地，所述两侧的凹槽间设有丝线或布条。 所述目的区域为正方形、长方形或三角形。
本发明的原理是在科研工作中，常常需要了解与某一疾病或不同疾病相关的基因或
蛋白产物等，现有单张切片检测单个指标的方法工作量大，成本高，费时费力，而且较难
获得阳性结果，只有采用组织芯片技术才有可能达到目的；现有组织芯片技术价格高昂， 需要专门的设备和技术熟练的人员，不能常规使用；结合病理科技术工作的实践经验，将 废弃的病理切片刀经改造后，制备成0.5mm至10mm宽的平口刀，在石蜡组织上提取边长 为0.5-10mm的正方形、长方形或三角形小组织块，用于制备组织芯片。
本发明具有廉价、方便、快速、取材多样、节约组织量、随时收集随时取样的优点，能普及至每一个病理科及相关研究单位，促进组织芯片技术得以更广泛地推广；同时利用
废弃的切片刀制备取样刀，来源充分，变废为宝。
图1为废弃的石蜡组织切片刀示意图； 图2为本发明采用的切片刀主视图； 图3为本发明采用的切片刀侧视图； 图4为图3中局部放大图5为正方形目的区域示意图； 图6为三角形目的区域示意图7为长方形目的区域示意图。
具体实施例方式
下面结合实施例来具体说明本发明。
实施例1
如图1所示，为废弃的石蜡组织切片刀示意图，用砂轮将废弃的石蜡组织切片刀的刀
口3用砂轮打磨掉，在刀身中部两侧制作对称的凹槽l，将刀身的一端打磨出方形刀口2， 所述方形刀口2深6mm，宽a为0.5mm;两侧的凹槽1间设有丝线，便于握刀使用。如图2 所示，为本发明采用的切片刀主视图，图3为其侧视图，图4为图3中局部放大图。
在石蜡组织标记目的区域4沿标记线垂直向下切得到所需组织。所述目的区域为边长 为5mm的主方形。如图5所示，为正方形目的区域示意图。根据目的区域4的大小，选用 宽度a为5mm的自制平口刀，沿标记线，垂直向下切，当有一突破感时，表明组织切断， 直至四个方向均与周围组织分离，此时用刀轻轻向上挑，或用小镊子钳夹，小组织即与原 石蜡组织脱离。因为机器取样均为圆形，若要将此长方形内的目的组织均包含在内，则要 占用更多的组织，因此，此种取样方法更节约石蜡组织。
将小组织放入印pendorf管或其它容器，做好标记，存放。待收集更多的样本后，用 于制作石蜡组织芯片。
实施例2
类似于实施例l,区别在于，目的区域为边长为lmm的三角形，如图6所示，为三角 形目的区域示意图，选用宽度a为10mm的自制平口刀进行取样。所述两侧的凹槽1间设 有布条。
实施例3
5类似于实施例l，区别在于，目的区域为长为3mm、宽为2mm的长方形，如图7所示， 为长方形目的区域示意图，选用宽度a为2mm和3mm的自制平口刀进行取样。
权利要求
1、一种石蜡组织芯片取样方法，其特征在于，具体步骤为第一步将废弃的石蜡组织切片刀的刀口(3)用砂轮打磨掉，在刀身中部两侧制作对称的凹槽(1)，将刀身的一端打磨出方形刀口(2)，所述方形刀口(2)深6mm，宽a为0.5-10mm；第二步在石蜡组织标记目的区域(4)，沿标记线垂直向下切得到所需组织。
2、 如权利要求l所述的石蜡组织芯片取样方法，其特征在于，所述两侧的凹槽(1) 间设有丝线或布条。
3、 如权利要求1所述的石蜡组织芯片取样方法，其特征在于，所述目的区域(4)为 正方形、长方形或三角形。
全文摘要
本发明提供了一种石蜡组织芯片取样方法，其特征在于，具体步骤为第一步将废弃的石蜡组织切片刀的刀口用砂轮打磨掉，在刀身中部两侧制作对称的凹槽，将刀身的一端打磨出方形刀口，所述方形刀口深6mm，宽a为0.5-10mm；第二步在石蜡组织标记目的区域，沿标记线垂直向下切得到所需组织。本发明具有廉价、方便、快速、取材多样、节约组织量、随时收集随时取样的优点。
文档编号G01N1/06GK101666718SQ20091019616
公开日2010年3月10日 申请日期2009年9月23日 优先权日2009年9月23日
发明者君 侯, 侯英勇, 刘亚岚, 卢韶华, 晨 徐, 谭云山 申请人:复旦大学附属中山医院