专利名称：人IgG和类风湿因子吸附装置及相关的人血清中IgM抗体检测方法
技术领域：
本发明涉及免疫学技术领域，更具体地，涉及提高免疫检测准确率的装置技术领 域，特别是指一种人IgG和类风湿因子吸附装置及相关的人血清中IgM抗体检测方法。
背景技术：
IgM型抗体的检测，在不同程度上受到特异IgG和类风湿因子(RF)的干扰。特别 是在孕期TORCH系列(弓形虫、风疹病毒、巨细胞病毒、单纯疱诊病毒等)IgM抗体检测中， 由于存在较多IgG和类风湿因子，IgM的检测更易受到干扰。 造成IgM ELISA(间接法)检测不准确的主要原因是血清中存在特异性的IgG抗 体和IgM型RF，具体原因如下 ①既往感染患者和慢性患者血清中，特异性IgG抗体与待检样本中的特异性IgM 的竞争吸附造成假阴性； ②RF造成假阳性1 5%的人群可以检出IgM型类风湿因子(RF) ， RF是抗IgG 的抗体，IgM-RF是主要类型，RF可和IgG，尤其是凝集或变性的IgG反应。当血清中同时存 在特异性IgG和RF时，特异性IgG首先与包被抗原结合，RF再与上述的IgG结合；而后RF 与酶标二抗结合，产生显色反应，形成假阳性。 因此采用有效方法消除类风湿因子干扰，对IgM型抗体检测的准确性至关重要。 有人用G蛋白吸收、高速离心分离IgM和IgG，再加入羊抗人IgG以及使用含尿素的洗涤液 等方法消除IgM检测中类风湿因子等的非特异性干扰。操作比较繁复、时间所需较长。传 统吸附剂的主要成分是抗人IgG的羊抗体；为了增加RF和IgG的吸附效果和效率，吸附剂 中往往添加了大量的加速剂，增加了待检测的特异性IgM被非特性吸附。也有使用普通的 IgG作为吸附物质；但是吸附RF的能力较差。而现有的Torch-IgM吸附方式，都是将样品 (待检血清)稀释、IgG/RF吸附的主要成分集成在一种液体中，并且吸附反应和检测反应也 是在一个孔内完成的，因此对IgG和RF的清除效果不佳。 然而，临床检测需要一种简便的、快速的吸附人IgG和类风湿因子的装置，从而简 便快速地消除人IgG和类风湿因子的干扰，快速实现相关检测。
发明内容
本发明的主要目的就是针对以上存在的问题与不足，提供一种人IgG和类风湿因 子吸附装置及相关的人血清中IgM抗体检测方法，该人IgG和类风湿因子吸附装置能特异 性吸附人IgG和类风湿因子，从而简便快速地消除人IgG和类风湿因子的干扰，便于快速准 确地实现相关检测，适于大规模推广应用，为简便快速地进行大规模临床检测提供保障。
为了解决上述目的，在本发明的第一方面，提供了一种人IgG和类风湿因子吸附 装置，其特点是，包括微孔板，所述微孔板包括至少一微孔，所述至少一微孔中包被有用于 特异吸附人IgG和类风湿因子的物质。
较佳地，所述微孔板是聚苯乙烯微孔板或聚丙烯微孔板。
较佳地，所述微孔的数目为1 1536。
更佳地，所述微孔的数目为96。 更进一步地，所述微孔大小均一，并整齐排布成8孔X 12孔。 较佳地，所述微孔板还包括底座，所述微孔可拆卸设置在所述底座上。 更佳地，8个所述微孔排列组合成一条微孔条。使得操作更加方便灵活。 较佳地，所述物质为人IgG的抗体、葡萄球菌A蛋白或G蛋白。 较佳地，所述物质包括羊抗人IgG的抗体和变性/凝集的人IgG。 更佳地，所述的变性/凝集的人IgG是戊二醛交联变性(形成多聚体)的人IgG。 在本发明的第二方面，还提供了一种人血清中IgM抗体检测方法，其特点是，采用
上述的人IgG和类风湿因子吸附装置，包括步骤 (1)将人血清置于所述IgG和类风湿因子吸附装置的所述微孔中以除去所述人血 清中含有的人IgG和类风湿因子； (2)将经过步骤(1)处理的人血清转移出来进行IgM抗体检测。
较佳地，在步骤(l)中，所述人血清在所述微孔中于37t:放置半小时。
较佳地，在步骤(2)中，所述IgM抗体检测采用ELISA方法。
本发明的有益效果在于 1、本发明通过将特异吸附人IgG和类风湿因子的物质包被在微孔板的微孔中，从 而临床检测时仅需将需检测临床血清样品加入微孔板的微孔中，吸附适当时间，取出样品 进行检测即可，本发明能特异性吸附人IgG和类风湿因子，方便快速，从而简便快速地消除 人IgG和类风湿因子的干扰，便于快速准确地实现相关检测，适于大规模推广应用，为简便 快速地进行大规模临床检测提供保障。 2、本发明将戊二醛交联变性的人IgG作为吸附剂的主要配方，使其吸附能力更强。 3、本发明采用固相二步法代替传统的液相一步法，将传统液相一步法中的样品稀 释、IgG/RF吸附和检测反应由 一个体系分解成两个体系，非常便利，且消除了不同反应步骤 的相互干扰；提高了试剂盒的准确性。
具体实施例方式
本发明人经过广泛而深入的研究，获得一种人IgG和类风湿因子吸附装置，该装 置能够简便、快捷地对临床血清中的人IgG和类风湿因子进行高效吸附，在此基础上完成 了本发明。 为了能够更清楚地理解本发明的技术内容，特举以下实施例详细说明。应理解，这 些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的 实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。
实施例1微孔板的包被 以每孔50ul羊抗人IgG的单克隆抗体和50ul戊二醛交联变性的人IgG用包被缓 冲液(NaCl 8. 0g、KH2P04 0. 2g、Na2HP04. 12H20 2. 9g、KCl 0. 2g，溶于1000ml水配置而成) 在4t:包被24小时，然后脱脂奶粉封闭24小时，洗涤，风干，消毒和密封备用。
实施例2对血清中的人IgG和类风湿因子(RF)吸附试验 将已经明确的阳性和阴性的临床检测血清样本50ul加入到上述包被的微孔板 中，37t:孵箱中温育30分钟，然后取出微孔板中的血清样本，进行检测；采用非吸附的血清 样本作对照；结果显示经过吸附的血清样本检测准确率为99. 2% ;而未经吸附的血清样 本检测准确率为78.6%。 综上所述，本发明的人IgG和类风湿因子吸附装置能特异性吸附人IgG和类风湿 因子，从而简便快速地消除人IgG和类风湿因子的干扰，便于快速准确地实现相关检测，适 于大规模推广应用，为简便快速地进行大规模临床检测提供保障。 在此说明书中，本发明已参照其特定的实施例作了描述。但是，很显然仍可以作出 各种修改和变换而不背离本发明的精神和范围。因此，说明书和附图
应被认为是说明性的 而非限制性的。
权利要求
一种人IgG和类风湿因子吸附装置，其特征在于，包括微孔板，所述微孔板包括至少一微孔，所述至少一微孔中包被有用于特异吸附人IgG和类风湿因子的物质。
2. 根据权利要求l所述的人IgG和类风湿因子吸附装置，其特征在于，所述微孔板是聚 苯乙烯微孔板或聚丙烯微孔板。
3. 根据权利要求1所述的人IgG和类风湿因子吸附装置，其特征在于，所述微孔的数目 为1 1536。
4. 根据权利要求3所述的人IgG和类风湿因子吸附装置，其特征在于，所述微孔的数目 为96。
5. 根据权利要求4所述的人IgG和类风湿因子吸附装置，其特征在于，所述微孔大小均 一，并整齐排布成8孔X12孔。
6. 根据权利要求l所述的人IgG和类风湿因子吸附装置，其特征在于，所述微孔板还包 括底座，所述微孔可拆卸设置在所述底座上。
7. 根据权利要求6所述的人IgG和类风湿因子吸附装置，其特征在于，8个所述微孔排 列组合成一条微孔条。
8. 根据权利要求1所述的人IgG和类风湿因子吸附装置，其特征在于，所述物质为人 IgG的抗体、葡萄球菌A蛋白或G蛋白。
9. 根据权利要求1所述的人IgG和类风湿因子吸附装置，其特征在于，所述物质包括羊 抗人IgG的抗体和变性/凝集的人IgG。
10. 根据权利要求9所述的人IgG和类风湿因子吸附装置，其特征在于，所述的变性/ 凝集的人IgG是戊二醛交联变性的人IgG。
11. 一种人血清中IgM抗体检测方法，其特征在于，采用根据权利要求l-10任一所述的 人IgG和类风湿因子吸附装置，包括步骤(1) 将人血清置于所述IgG和类风湿因子吸附装置的所述微孔中以除去所述人血清中 含有的人IgG和类风湿因子；(2) 将经过步骤(1)处理的人血清转移出来进行IgM抗体检测。
12. 根据权利要求ll所述的人血清中IgM抗体检测方法，其特征在于，在步骤(1)中， 所述人血清在所述微孔中于37t:放置半小时。
13. 根据权利要求ll所述的人血清中IgM抗体检测方法，其特征在于，在步骤(2)中， 所述IgM抗体检测采用ELISA方法。
全文摘要
本发明提供了一种人IgG和类风湿因子吸附装置，包括微孔板，微孔板包括至少一微孔，微孔中包被有用于特异吸附人IgG和类风湿因子的物质，较佳地，微孔板是聚苯乙烯微孔板或聚丙烯微孔板，微孔的数目为1～1536，微孔板还包括底座，微孔可拆卸设置在底座上，物质为羊抗人IgG的抗体和变性/凝集的人IgG，还提供了采用上述装置进行人血清中IgM抗体检测方法，本发明的人IgG和类风湿因子吸附装置能特异性吸附人IgG和类风湿因子，从而简便快速地消除人IgG和类风湿因子的干扰，便于快速准确地实现相关检测，适于大规模推广应用，为简便快速地进行大规模临床检测提供保障。
文档编号G01N33/545GK101706503SQ20091022227
公开日2010年5月12日 申请日期2009年11月12日 优先权日2009年11月12日
发明者张丽新, 雷震, 韦彦余 申请人:无锡博慧斯生物医药科技有限公司