专利名称：一种大米中拟除虫菊酯类农药残留的检测方法
技术领域：
本发明涉及粮食中农药残留的检测方法，具体涉及一种大米中拟除虫菊酯类农药 残留的检测方法。
背景技术：
大米是我国日常食用的主要食物，它的质量安全与否与人们的身心健康密切相 关。大米中农药残留包括有机磷类和拟除虫菊酯类等，拟除虫菊酯类农药包括氯菊酯、氯氰 菊酯、联苯菊酯、氯氟氰菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊酯和甲氰菊酯等。菊酯类的检测方法如“进 出口食品中多种菊酯类农药残留量测定方法”，ST/T1157-2008，就公开了大米用氯化钠，水 和正己烷-丙酮(1+1)混合溶剂浸泡、均质和离心提取，提取条件为先加氯化钠和水浸泡 0. 5h，再加正己烷-丙酮(1+1)混合溶剂以10000r/min均质0. 5min，然后以4000r/min离 心分相提取3min，有机相在45°C以下水浴减压浓缩至近干；有机相用正己烷溶解得到提取 液，提取液在弗罗里硅净化柱用正己烷-乙醚(7+3)混合溶剂淋洗净化，净化条件为流速 3mL/min的条件下洗脱，洗脱液在45°C以下水浴减压浓缩至约lmL，再加ImL正己烷溶解得 净化液；净化液用气相色谱法定性和定量测定菊酯类农药残留，气相色谱条件DB-5石英 毛细管柱，柱温70°C (Imin)以20°C /min速率程序升温至270°C (Imin)，接着以1°C /min 速率程序升温至285°C (Imin)，再以20°C /min速率程序升温至300°C (保留15min)，在进 样口温度270°C，测定器温度325°C，不分流进量，进样量为1 μ 1，进样0. 75min后用氮气吹 扫的方式。访方法提取缺点为提取时间少，提取率较低，净化过程菊酯类农药损失量较多， 气相色谱柱温升温程序复杂，操作难度大，操作要求高，该方法费时费力，操作步骤复杂，定 量回收率较低。赵煜等的“毛细管气相色谱法测定稻谷中13种有机磷类和菊酯类农药的 残留量”，现代科学仪器，2006，3，则公开了稻谷用水浸泡30min，加乙腈均质2min，滤液用氯 化钠静置分相10分钟，有机相在75-78°C氮吹近干；有机相用正己烷溶解得到提取液，提取 液在弗罗里硅净化柱依次用正己烷_丙酮混合溶剂淋洗净化三次，各次洗脱液在40°C水浴 上氮吹干浓缩至4mL以下，再用正己烷定浴至4mL，混合得到净化液供气谱测定；气相色谱 条件DB-17柱或HP-17柱，柱温150°C (2min)以6°C /min速率程序升温至270°C (保留 25min)，进样口温度200°C，测定器温度320°C，分流进量；访方法没有明确具体的进样量 和进样多长时间后用氮气吹扫的方式，虽简化了提取过程，但提取率也较低，气相色谱条件 仍复杂，操作难度大，操作要求高，定量回收率也较低。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种提取率较高，气相色谱条件简捷，操作要 求较低，定量回收率较高，稳定性好的大米中拟除虫菊酯类农药残留的检测方法。本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为一种大米中拟除虫菊酯类农药残 留的检测方法，包括下述步骤1)提取在25克大米中加入50毫升乙腈，用勻浆机高速勻浆2分钟，静置提取4小时，加入15毫升超纯水振荡后静置30分钟，过滤，滤液倒入加有4克氯化钠的离心管中， 振荡1分钟，以4000r/min离心分相6分钟，吸取有机相10毫升到第一带塞试管中，将第一 带塞试管放在水浴温度为80°C的氮吹仪上吹干，加入2ml正己烷为样品溶液，盖上管塞，待 净化；2)净化柱制备在10mm(id) X300mm玻璃层析柱中，底部加入2g无水硫酸钠，然 后加入Ig弗罗里硅土，最后在顶端加入2g无水硫酸钠，敲实得到弗罗里硅净化柱；3)净化弗罗里硅净化柱依次用5ml按体积比90 10的正己烷和丙酮混合液、 5ml正己烷溶剂润洗，弃去淋洗液，当溶剂液面到达净化柱吸附层表面时，立即将第一带塞 试管的样品溶液倒入净化柱淋洗净化，用干净的第二带塞试管接收洗脱液，再用5ml按体 积比90 10的正己烷和丙酮混合液洗第一带塞试管后再倒入净化柱淋洗净化，并重复一 次，将盛有淋洗液的第二带塞试管置于氮吹仪上，在水浴温度50°C条件下，氮吹蒸发至小于 2ml，用正己烷准确定容至2. 0ml，混勻为净化液，待测；4)检测上述净化液用气相色谱仪定性定量测定菊酯类农药残留，气相色谱条 件DB-1701色谱柱或HP-5色谱柱，柱前压17. 3psi，恒压，尾吹氮气，进样温度为260°C， 检测器温度为260°C，不分流进样，进样量为1 μ 1，进样0. 75min后氮气吹扫，吹扫流速 30ml/min，柱温程序为柱初温100°C，以40°C /min速率程序升温至260°C，继续恒温不超过 24min，得到所测的拟除虫菊酯类农药的保留时间；这样净化液中拟除虫菊酯类农药较短的 时间内分离和检测完成。拟除虫菊酯类农药为氯菊酯、氯氰菊酯、联苯菊酯、氯氟氰菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊 酯和甲氰菊酯。步骤4中气相色谱条件为DB-1701色谱柱，测定后保留时间为7. 524min是联 苯菊酯，保留时间为8. 433min是甲氰菊酯，保留时间为10. 332min是氯氟氰菊酯，保留 时间为10. 85 Imin是氯菊酯，保留时间为14. 508-15. 740min是氯氰菊酯，保留时间为 18. 473-19. 697min是氰戊菊酯，保留时间为23. 261min是溴氰菊酯。DB-1701色谱柱检测 拟除虫菊酯类农药的优点定性较佳，能同时对多种农药进行分离。步骤4中气相色谱条件为HP-5色谱柱，测定后保留时间为6.209min是联 苯菊酯，保留时间为6. 322min是甲氰菊酯，保留时间为7. 041min是氯氟氰菊酯，保 留时间为8. 039min是氯菊酯，保留时间为9. 197-9. 548min是氯氰菊酯，保留时间为 11. 025-11. 522min是氰戊菊酯，保留时间为12. 993min是溴氰菊酯。HP-5色谱柱检测拟除 虫菊酯类农药的优点是定性较佳，检测时间较短。与现有技术相比，本发明的优点在于一种大米中拟除虫菊酯类农药残留的检测 方法，经乙腈4小时提取，拟除虫菊酯类农药提取较充分，超纯水振荡后静置30分钟，拟 除虫菊酯类农药分离较好，离心分相6分钟，分相较好，这样提取率较高；用正己烷+丙酮 (90 10)淋洗净化，可以达到较好洗下拟除虫菊酯类农药；检测时柱温以40°C/min速率 程序升温至260°C，且进样温度为260°C，检测器温度也为260°C，这样气相色谱仪操作简 便，气相色谱条件简捷，拟除虫菊酯类农药较短的时间内分离和检测完成，而测定值仍较准 确；因此本发明是一种提取率较高，气相色谱条件简捷，操作要求较低，定量回收率较高的 大米中拟除虫菊酯类农药残留的检测方法。
图1为实施例1的拟除虫菊酯类农药色谱图；图2为实施例2的拟除虫菊酯类农药色谱图。
具体实施例方式以下结合附图实施例对本发明作进一步详细描述。实施例1一种大米中拟除虫菊酯类农药残留的检测方法，称取粉碎的大米25克到125ml试 剂瓶中，加入浓度都为lmg/kg的氯菊酯、氯氰菊酯、联苯菊酯、氯氟氰菊酯、氰戊菊酯、溴氰 菊酯和甲氰菊酯农药配制的混合标准液，添加水平为0. 05mg -kg"1大米，上述农药标准样品 均由农业部环境保护科研监测所提供，浓度均为100mg/kg，用色谱纯正己烷配制并稀释成 需要浓度。然后加入50毫升乙腈，用勻浆机高速勻浆2分钟，静置提取4小时，加入15毫 升超纯水振荡后静置30分钟，过滤，滤液倒入加有4克氯化钠的离心管中，振荡1分钟，以 4000r/min离心分相6分钟，吸取有机相10毫升到第一带塞试管中，将第一带塞试管放在 水浴温度为80°C的氮吹仪上吹干(近干即可)，加入2ml正己烷为样品溶液，盖上管塞，待 净化。净化柱制备在10mm(id) X300mm玻璃层析柱中，底部加入2g无水硫酸钠，然后加入 Ig弗罗里硅土，最后在顶端加入2g无水硫酸钠，敲实得到弗罗里硅净化柱；弗罗里硅净化 柱依次用5ml正己烷+丙酮(90 10)混合液、5ml正己烷溶剂润洗，弃去淋洗液，当溶剂 液面到达净化柱吸附层表面时，立即将第一带塞试管的样品溶液倒入净化柱淋洗净化，用 干净的第二带塞试管接收洗脱液，再用5ml正己烷+丙酮(90 10)混合液洗第一带塞试 管后再倒入净化柱淋洗净化，并重复一次，将盛有淋洗液的第二带塞试管置于氮吹仪上，在 水浴温度50°C条件下，氮吹蒸发至小于2ml，用正己烷准确定容至2. 0ml，混勻为净化液，待 测；净化液用气相色谱仪定性定量测定菊酯类农药残留，气相色谱条件DB-1701色谱柱， 柱前压17. 3psi，恒压，尾吹氮气，进样温度为260°C，检测器温度为260°C，不分流进样，进 样量为1 μ 1，进样0. 75min后氮气吹扫，吹扫流速30ml/min，柱温程序为柱初温100°C，以 400C /min速率程序升温至260°C，继续恒温24min，净化液中各拟除虫菊酯类农药可以在保 留时间内分离和检测完成；得到如图1所示的拟除虫菊酯类农药色谱图，根据分离后的保 留时间可以作出农药的定性，从图1中可以看出联苯菊酯1的保留时间为7. 524min，甲氰 菊酯2的保留时间为8. 433min,氯氟氰菊酯3的保留时间为10. 332min,氯菊酯4的保留 时间为10. 851min，氯氰菊酯5的保留时间为14. 508-15. 740min，氰戊菊酯6的保留时间为 18. 473-19. 697min，溴氰菊酯7的保留时间为23. 261min ；重复三次该实施例，根据外表法 面积得到如表1所示的平均定量回收率(即提取率)。实施例2与实施例1基本相同，所不同的只是各拟除虫菊酯类农药的浓度为0. lmg/kg, DB-1701色谱柱用HP-5色谱柱替代，且检测时间可以缩短为13min，得到如图2所示的拟 除虫菊酯类农药的色谱图，根据分离后的保留时间可以作出农药的定性，从图2中可以看 出联苯菊酯1的保留时间为6. 209min,甲氰菊酯2的保留时间为6. 322min,氯氟氰菊酯 3的保留时间为7. 041min，氯菊酯4的保留时间为8. 039min，氯氰菊酯5的保留时间为 9. 197-9. 548min，氰戊菊酯6的保留时间为11. 025-11. 522min，溴氰菊酯7的保留时间为
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12. 993min ；重复三次该实施例，根据外表法面积得到如表1所示的平均定量回收率。实施例3与实施例2基本相同，所不同的只是各拟除虫菊酯类农药的浓度为0. 5mg/kg。实际检测应用中按本发明的方法操作，无需加上述农药标准样品，具体检测方法 同实施例1或实施例2，在此不再列举实施例。对比例1按ST/T1157-2008方法测定，称粉碎的大米5克于离心管中，加入1克氯化钠和 15毫升超纯水，加入与实施例1相同的农药标准样品，充分混勻1分钟，浸泡半小时，再加 入15毫升正己烷-丙酮(1+1)混合溶剂，以lOOOOr/min均质半分钟，并以4000r/min离心 3分钟，将上层有机相转入浓缩瓶中，残渣中再加入15毫升正己烷-丙酮(1+1)混合溶剂 重复提取一次，合并有机相，45°C以下水浴减压浓缩至近干，待净化；净化柱依法制备，底部 垫了约5mm脱脂棉，浓缩瓶中用3ml正己烷洗二次，移入净化柱中，用IOOml正己烷-乙醚 (7+3)混合溶剂淋洗净化，收集洗脱液，45°C以下水浴减压浓缩至约1ml，再氮吹干，加入1 毫升正己烷溶解，供气相色谱测定，气相色谱条件为DB-5石英毛细管柱，柱温70°C (Imin) 以20°C /mm速率程序升温至270°C (Imin)，接着以1°C /min速率程序升温至285°C (Imin)， 再以20°C /min速率程序升温至300°C (保留15min)，在进样口温度270°C，测定器温度 325°C，不分流进量，进样量为1 μ 1，进样0. 75min后用氮气吹扫的方式，重复三次该对比 例，各拟除虫菊酯类农药的平均定量回收率如表1所示。对比例2按“赵煜等的毛细管气相色谱法测定稻谷中13种有机磷类和菊酯类农药的残留 量”方法测定与实施例1相同的拟除虫菊酯类农药，粉碎的大米20克于瓶中，加水20毫 升，加与实施例1相同的农药标准样品，浸泡30min，再加乙腈50毫升，均质2min，滤液滤 入装有7-15克的氯化钠的带塞量筒中，振荡1分钟，静置分相10分钟，取有机相10毫升 在75-78°C止氮吹近干，加入2ml正己烷溶解，移入净化柱中，用5ml正己烷+丙酮混合溶 剂淋洗净化三次，收集洗脱液，约40°C以下水浴氮吹至4ml以下，正己烷定容至4ml，供气相 色谱测定，气相色谱条件为DB-17柱或HP-17柱，柱温150°C (2min)以8°C/min速率程序 升温至250°C (保留5min)，在进样口温度200°C，测定器温度320°C，分流进量，进样量为？ μ 1，进样？ min后用氮气吹扫的方式，重复三次该对比例，各拟除虫菊酯类农药的平均定 量回收率如表1所示。上述实施例和对比例的大米为同批次大米随机选取。上述氮吹仪型号为DSY-III，市售，气相色谱仪型号为6890N，购自Agilent公司， 采用4 4^微电子捕获检测器，配々81161^7683自动进样器。表1 实施例1，2和对比例1，2的拟除虫菊酯类农药平均回收率表 相对标准偏差为1. 83-18. 68%。 表1中可以看出实施例1，2相对于对比例1，2回收较稳定，回收率较高。
权利要求
一种大米中拟除虫菊酯类农药残留的检测方法，其特征在于包括下述步骤1)提取在25克大米中加入50毫升乙腈，用匀浆机高速匀浆2分钟，静置提取4小时，加入15毫升超纯水振荡后静置30分钟，过滤，滤液倒入加有4克氯化钠的离心管中，振荡1分钟，以4000r/min离心分相6分钟，吸取有机相10毫升到第一带塞试管中，将第一带塞试管放在水浴温度为80℃的氮吹仪上吹干，加入2ml正己烷为样品溶液，盖上管塞，待净化；2)净化柱制备在10mm×300mm玻璃层析柱中，底部加入2g无水硫酸钠，然后加入1g弗罗里硅土，最后在顶端加入2g无水硫酸钠，敲实得到弗罗里硅净化柱；3)净化弗罗里硅净化柱依次用5ml按体积比90∶10的正己烷和丙酮混合液、5ml正己烷溶剂润洗，弃去淋洗液，当溶剂液面到达净化柱吸附层表面时，立即将第一带塞试管的样品溶液倒入净化柱淋洗净化，用干净的第二带塞试管接收洗脱液，再用5ml按体积比90∶10的正己烷和丙酮混合液洗第一带塞试管后再倒入净化柱淋洗净化，并重复一次，将盛有淋洗液的第二带塞试管置于氮吹仪上，在水浴温度50℃条件下，氮吹蒸发至小于2ml，用正己烷准确定容至2.0ml，混匀为净化液，待测；4)检测净化液用气相色谱仪定性定量测定菊酯类农药残留，气相色谱条件DB 1701色谱柱或HP 5色谱柱，柱前压17.3psi，恒压，尾吹氮气，进样温度为260℃，检测器温度为260℃，不分流进样，进样量为1μl，进样0.75min后氮气吹扫，吹扫流速30ml/min，柱温程序为柱初温100℃，以40℃/min速率程序升温至260℃，继续恒温不超过24min，得到所测的拟除虫菊酯类农药的保留时间。
2.如权利要求1所述的一种大米中拟除虫菊酯类农药残留的检测方法，其特征在于拟 除虫菊酯类农药为氯菊酯、氯氰菊酯、联苯菊酯、氯氟氰菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊酯和甲氰菊
3.如权利要求2所述的一种大米中拟除虫菊酯类农药残留的检测方法，其特征在于步 骤4中气相色谱条件为DB-1701色谱柱，测定后保留时间为7. 524min是联苯菊酯，保留时 间为8. 433min是甲氰菊酯，保留时间为10. 332min是氯氟氰菊酯，保留时间为10. 851min 是氯菊酯，保留时间为14. 508-15. 740min是氯氰菊酯，保留时间为18. 473-19. 697min是氰 戊菊酯，保留时间为23. 261min是溴氰菊酯。
4.如权利要求2所述的一种大米中拟除虫菊酯类农药残留的检测方法，其特征在于步 骤4中气相色谱条件为HP-5色谱柱，测定后保留时间为6. 209min是联苯菊酯，保留时间为 6. 322min是甲氰菊酯，保留时间为7. 041min是氯氟氰菊酯，保留时间为8. 039min是氯菊 酯，保留时间为9. 197-9. 548min是氯氰菊酯，保留时间为11. 025-11. 522min是氰戊菊酯， 保留时间为12. 993min是溴氰菊酯。
全文摘要
本发明公开了一种大米中拟除虫菊酯类农药残留的检测方法，经乙腈4小时提取，拟除虫菊酯类农药提取较充分，超纯水振荡后静置30分钟，拟除虫菊酯类农药分离较好，离心分相6分钟，分相较好，这样提取率较高；用正己烷+丙酮(90∶10)混合液淋洗净化，可以达到较好洗下拟除虫菊酯类农药；检测时柱温以40℃/min速率程序升温至260℃，且进样温度为260℃，检测器温度也为260℃，这样气相色谱仪操作简便，气相色谱条件简捷，拟除虫菊酯类农药较短的时间内分离和检测完成，而测定值仍较准确；因此本发明是一种提取率较高，气相色谱条件简捷，操作要求较低，定量回收率较高的大米中拟除虫菊酯类农药残留的检测方法。
文档编号G01N30/06GK101915809SQ20101022127
公开日2010年12月15日 申请日期2010年7月1日 优先权日2010年7月1日
发明者吴华新, 王冬群, 韩敏辉 申请人:王冬群;吴华新;韩敏辉