专利名称：通用型病理组织细胞化学染色载玻片的制作方法
技术领域：
本实用新型涉及医药卫生用品技术领域，具体涉及一种病理染色载玻片。
背景技术：
病理组织和细胞学染色是临床病理诊断和基础研究不可或缺的关键技术。尽管随 着现代医学的迅猛发展，用于疾病诊断的新仪器、新方法层出不穷，病理诊断作为确认组织 病变的金标准在临床疾病确诊中的重要作用仍毋庸置疑，并且随着免疫学和分子生物学研 究的不断发展，新的诊断分子不断被发现，相应的抗体或探针随即上市，因此，作为研究、诊 断疾病的染色方法已从传统的化学染料(苏木素、伊红、银染等)拓展到针对特定抗原分子 的免疫染色(组织细胞分子标记如CD抗原、肿瘤分子抗原、细胞骨架蛋白等)、原位杂交等。 因而作为承载组织细胞的载玻片需求量极大，且以玻璃质地的载玻片最为常用。然而，多年 来在组织细胞染色中，滴加于组织表面的染色液、抗体液或杂交液因载玻片移动、加液量不 当、反复洗涤等原因，在抗体、染色液或杂交液孵育过程中，极易发生流失、渗漏，直接影响 了染色效果。因此，探寻经济、实用的组织细胞载玻片，尤其是针对稀有组织、贵重抗体、探 针等的孵育，对于优化实验操作、提高病理诊断准确率至关重要。从上世纪90年代以来，针对组织细胞染色时流失、渗漏问题，研究人员曾尝试使 用蜡笔在组织细胞周边划线方法，具有一定效果，但蜡笔线易于在漂洗过程中丢失；有人使 用指甲油、中性树脂等涂布于组织细胞周边，但在孵育过程中易于与液体发生作用，可能会 对染色或抗原抗体结合或RNA-探针的结合产生不利影响；最后，研究人员研究出组织化学 染色专用笔，对于解决以上液体流失、渗漏具有明显的效果，但价格较为昂贵。以北京中杉 生物公司一支国产小号普通组化笔为例，价格需要450元，因此，通过在组织细胞周边画圈 解决液体流失、渗漏需要从其他环节上尝试进一步改良。
实用新型内容针对病理组织染色中以上长时间不尽人意的问题，本实用新型提出一种通用型病 理组织细胞化学染色载玻片，使其能够有效减少免疫染色液渗漏以及消耗，显著避免染色 过程中因染色液分布不均造成的假阳性或假阴性，以大大提高常规免疫组织和细胞化学、 原位杂交等染色可重复性。本实用新型的技术方案如下一种通用型病理组织细胞化学染色载玻片，其是以玻璃材质为基片；在所述基片 承载组织切片的承载面的可承载区域的中间位置制有一的椭圆型凹槽，所述凹槽的表面积 为所述可承载区域面积的1/9-1/10，深度为0. 2-0. 5mm ；在所述椭圆型凹槽内表面涂抹有 防脱片剂。在所述基片的承载面的一端制有一段用于标记的磨砂面，为非承载区域，所述磨 砂面的长度为整个基片长度的1/5-1/4。本实用新型是从载玻片入手寻找其解决方案第一、是基于常规载玻片以玻璃材质为主，最好选用具有磨砂边缘的载玻片，便于标记。第二、通过比较观察常见病理组织 (肝、肺、脾、肾、心、下丘脑、海马、肠道组织、肠系膜淋巴结等)，结合加液量要求，在可承载 区域制备组织凹槽，并确定适用于各种组织的组织槽尺寸。第三、改变过去在载玻片上大面 积涂抹防脱片剂(如多聚赖氨酸)方法，仅在组织槽内进行防脱片处理。可见，上述结构的载玻片是以常规玻璃载玻片为原料，经济且实用，无须使用组化 笔等划线方法，且仅需在组织槽内使用微量防脱片剂，不仅确保组织在切片位置固定整齐， 还大大节约实验试剂，有效缩短切片洗涤过程，染色时间缩短。因此，本载玻片能够有效减少免疫染色液渗漏以及消耗，可显著避免染色过程中 因染色液分布不均造成的假阳性或假阴性，大大提高常规免疫组织和细胞化学染色可重复 性。经使用证实，在滴加20μ 1 25μ 1染色液、抗体液或杂交液孵育后，无染色液渗 漏，染色重复性好。此载玻片适用于常规病理HE染色、免疫组织细胞染色、原位杂交染色等 各种临床病理诊断和基础实验研究，具有广泛的应用前景。
图1示出了组织槽滴加染色液或抗体液前承载组织的切片示意图；图2示出了组织槽滴加染色液或抗体液后承载组织的切片示意具体实施方式
为了使本实用新型的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合附图对本实用 新型作进一步的详细描述参见图1，本专用载玻片的制备过程如下首先制备常规病理组织载玻片，以玻璃材质为基片1，基片1的长度为76mm，宽度 为25mm，在基片的承载面的一端制一段用于标记的磨砂面2，为非承载区域，磨砂面2的长 度为19mm。然后在基片的承载面上，距无磨砂面一端25mm处通过机械方法制备表面积为 15謹X 10mm、深度为0. 5謹的椭圆型凹槽3。最后，对椭圆型凹槽3进行防脱片处理，涂抹微量防脱片剂，即形成一张适用于多 种组织或细胞病理染色的承载玻片。病理组织细胞染色实验结果小鼠组织免疫组织化学染色稀释抗体(一抗、二抗)溶液4(见图1和图2)滴加 于0. 5mm深的椭圆型凹槽内，允许总体积20μ 1 25μ 1，在切片5(见图1和图2)移动、孵 育过程中，抗体稀释液未发生扩散、流失，每次孵育结束后，上样抗体溶液无明显减少，染色 结果满意。在相同条件下，重复以上实验过程，染色效果保持不变。 小鼠组织HE染色选用与上述相同的载玻片，将目的肺组织置于组织槽内，按常 规方法分别以苏木素和伊红染色，洗涤，效果与浸泡切片染色无差异。小鼠组织原位杂交染色选用与上述相同的载玻片，将目的肝组织置于组织槽内， 按常规方法行原位组织杂交，效果满意，杂交液消耗减少，杂交结果亦重复性良好。综上所述，通用型病理组织化学染色载玻片因其对染色溶液的良好承载能力，有效减少染色实验溶液类消耗，提高染色重复性，具有良好的开发前景，尤其对珍贵组织、昂 贵抗体等免疫染色，此种防漏载玻片无疑是一种理想的选择。
权利要求一种通用型病理组织细胞化学染色载玻片，其是以玻璃材质为基片；其特征在于在所述基片承载组织切片的承载面的可承载区域的中间位置制有一的椭圆型凹槽，所述凹槽的表面积为所述可承载区域面积的1/9 1/10，深度为0.2 0.5mm；在所述椭圆型凹槽的内表面涂抹有防脱片剂。
2.根据权利要求1所述的通用型病理组织细胞化学染色载玻片，其特征在于在所述 基片的承载面的一端制有一段用于标记的磨砂面，为非承载区域，所述磨砂面的长度为整 个基片长度的1/5-1/4。
3.根据权利要求2所述的通用型病理组织细胞化学染色载玻片，其特征在于所 述基片的长度为76mm，宽度为25mm，所述磨砂面的长度为19mm ；椭圆型凹槽的表面积为 15mmX 10mm、深度为0. 5mm，其中心距无磨砂面一端的距离为25mm。
专利摘要本实用新型涉及一种通用型病理组织细胞化学染色载玻片，其是以玻璃材质为基片；在所述基片的承载组织切片的承载面的可承载区域的中间位置处制有一椭圆型凹槽，所述凹槽的表面积为所述可承载区域面积的1/9-1/10，深度为0.2-0.5mm；在所述椭圆型凹槽内表面涂抹有防脱片剂。在所述基片的承载面的一端制有一段用于标记的磨砂面，为非承载区域，所述磨砂面的长度为整个基片长度的1/5-1/4。此种载玻片可以有效减少免疫染色液渗漏以及消耗，显著避免染色过程中因染色液分布不均造成的假阳性或假阴性，大大提高常规免疫组织和细胞化学染色的可重复性，是病理染色的理想组织细胞承载物，在基础研究和临床免疫病理诊断中具有广泛的应用前景。
文档编号G01N1/31GK201740686SQ20102024343
公开日2011年2月9日 申请日期2010年6月30日 优先权日2010年6月30日
发明者杨策, 王正国, 蒋建新 申请人:中国人民解放军第三军医大学第三附属医院