专利名称：一种干制羊胎盘的检测方法
技术领域：
本发明涉及一种羊胎盘的检测方法，尤其涉及一种干制羊胎盘的检测方法，属于生物制药技术领域。
背景技术：
羊胎盘富含孕育生命所必须的所有原始生命物质。其中含有丰富的蛋白质、十七种氨基酸、十四种微量元素、磷脂、脂多糖、维生素，还有与免疫功能和机体正常运转相关的多种活性多肽，其营养成分天然搭配的比例最接近人体需求。然而，目前的相关标准不是很完善(针对的是鲜品的检测)，无法实现对干制羊胎盘的可控性检测。现有的有关羊胎盘药材的标准及检测方法如只是简单的性状判断，无法对最终产品进行量化的检查，从而也无从严格控制产品的质量。这也导致市面上流通的羊胎盘产品掺假施假，且无法分辩的情况严重，如何能够得到真实的羊胎盘成为众多相关厂商要面临的一个现实问题。
发明内容
因此，本发明的目的是提供一种完善地、重现性好地干制羊胎盘的检测方法，能够有效地控制其质量，使干制羊胎盘的质量稳定、可控安全，从而能够更好地为人类所使用。针对上述目的，本发明的技术方案如下本发明提供一种干制羊胎盘的检测方法，所述检测方法包括以下步骤I)通过薄层色谱法鉴定所述干制羊胎盘；2)通过水分测定发测定所述干制羊胎盘中的水分；3)通过原子吸收分光光度法或电感耦合等离子体质谱法测定所述干制羊胎盘中的重金属含量；4)通过热浸法测定所述干制羊胎盘中的浸出物。优选地，在步骤I)中，具体步骤为制备供品溶液、羊胎盘对照药材溶液，亮氨酸和甘氨酸对照品后，分别吸取所述样品溶液、羊胎盘对照药材溶液，亮氨酸和甘氨酸对照品适量，点于同一硅胶G薄层板上，通过展开剂展开，取出，晾干，喷以I %茚三酮乙醇溶液，力口热至斑点显色清晰，即得。优选地，在步骤I)中，制备供品溶液、羊胎盘对照药材溶液，亮氨酸和甘氨酸对照品的具体步骤为将干制羊胎盘研成粉末，再取研制的粉末0. 2 1. OgJP 70%乙醇10mL，超声处理20分钟(超声波处理器的功率250W，频率40kHz)，滤过，取滤液lmL，作为供试品溶液，另羊胎盘对照药材lg，按照所述供试样品溶液的制备方法制成对照药材溶液样品溶液，再取亮氨酸对照品、甘氨酸对照品加70%乙醇制成每Iml各含0. 5mg的混合溶液，作为对照品溶液。优选地，在步骤I)中，分别吸取所述样品溶液、羊胎盘对照药材溶液、亮氨酸对照品和甘氣fe对照品各5 ii L。优选地，在步骤I)中，所述展开剂由正丁醇、甲醇、乙酸乙酯和乙酸组成，或由正丁醇、冰醋酸和水组成。更为优选地，所述展开剂由以下体积份数的2份正丁醇、2份甲醇、2份乙酸乙酯、4份乙酸组成，或由以下体积份数的4份正丁醇、I份冰醋酸、I份水组成。优选地，在步骤I)中，于105°C加热至斑点显色清晰。优选地，在步骤2)中，所述干制羊胎盘中的水分的质量百分比含量为0 10. 0 %。优选地，在步骤3)中，所述重金属为铅、镉、砷、汞、铜，所述铅的质量比为0 5ppm ;镉的质量比含量为0 0. 3ppm ;砷的质量比含量0 2ppm ;萊的质量比含量0
0.2ppm ;铜的质量比含量0 20ppm,所述ppm表示百万分之一。优选地，在步骤4)中，用稀乙醇(49. 5% -50. 5%重量体积百分比)作溶剂进行测定，所述干制羊胎盘中浸出物的质量百分比含量> 10.0%。本发明所述的干制羊胎盘能够用于制备调节内分泌的药物、防老抗皱的药物、提高强免疫能力的药物和调节神经的药物。其中，调节内分泌的药物能够刺激人体荷尔蒙的正常分泌，延缓更年期症状到来；防治男性性功能下降，促进性器官的正常活性，保持青春活力。其中，所述防老抗衰的药物能够延缓机体器官功能老化,改善皮肤微循环和新陈代谢，舒缓皱纹，淡化减退色斑和色素沉着，保持肌肤水分、弹性及光泽。其中，所述免疫能力增强的药物能够改善人体组织和细胞功能，刺激造血细胞功能，能使机体快速恢复活力，提高免疫，增强抵抗力。其中，调节神经的药物缓解神经衰弱的多梦、失眠、心悸、健忘、神志不宁、情绪不稳等症状，具有安神助眠，改善思维能力、记忆能力的作用。用法与用量l_2g，研未吞服(每日1-2次，还可搭配其它药材服用)。贮藏置通风干燥处，防蛀。本发明所述的干制羊胎盘呈类圆盘形，直径4 9cm，厚3 5cm。表面淡棕色至棕褐色，凹凸不平，具多数扁圆形突起，直径0. 7 1. 2cm。侧面中间有一条环状凹沟纹，凹沟纹上下面类似两个弯曲成圆形的羊角状叠加在一起。偶见脐带痕。质硬脆，切面呈海绵样构造，气渥。本发明的检测方法，对干制羊胎盘进行了鉴定，并测定了其中的水分含量、重金属含量及浸出物，并且稳定性、重复性好、操作方法简单，斑点Rf (比移值)适中，能够有效地控制干制羊胎盘的质量标准，使其质量稳定，安全可控。
以下，结合附图来详细说明本发明的实施方案，其中图1为本发明所述的干制羊胎盘的表观性状图，图1-1，1-2为干制羊胎盘的正面表观性状图，图1-3，1+4为干制羊胎盘的侧面表观性状图；图2为本发明所述的干制羊胎盘不同颜色粉末的显微特征鉴别图；图3为本发明所述的10批干制羊胎盘通过薄层色谱法鉴别的试验结果图，图中1-10分别代表批号1-10的干制羊胎盘制备的供试品溶液，图中11为羊胎盘对照药材制备的羊胎盘对照药材溶液，图中12为甘氨酸制备的甘氨酸对照品；图4为本发明所述的10批干制羊胎盘，于相同湿度55% (RH%)环境下，不同温度下通过薄层色谱法鉴别的试验结果图，图4-1为于4°C环境下展开的试验结果图，图4-2为于29°C环境下展开的试验结果图，图中1-10分别代表批号1-10的干制羊胎盘制备的供试品溶液，图中11为羊胎盘对照药材制备的羊胎盘对照药材溶液，图中12为甘氨酸制备的甘氨酸对照品；图5为本发明所述的10批干制羊胎盘，于相同温度27°C环境下，不同湿度下通过薄层色谱法鉴别的试验结果图，图5-1为于湿度32% (RH%)环境下展开的试验结果图，图5-2为于湿度88% (RH%)环境下展开的试验结果图，图中1-10分别代表批号1-10的干制羊胎盘制备的供试品溶液，图中11为羊胎盘对照药材制备的羊胎盘对照药材溶液，图中12为甘氨酸对照品。
具体实施例方式实施例1本发明所述的干制羊胎盘的性状及其粉末的显微特征鉴定1.本发明所述的干制羊胎盘性状本发明所述的干制羊胎盘为牛科动物绵羊Ovis aries L.的干燥胎盘。将新鲜羊胎盘除去羊膜和脐带，反复冲洗至干净后，干燥。主产于我国青海，宁夏，新疆，西藏，河北等地。本发明所述的干制羊胎盘性状仅根据样品实物描述。本发明所述的干制羊胎盘呈类扁平圆盘形，中间有一条环带状凹沟纹，凹沟纹上下面类似两个弯曲成圆形的羊角叠加在一起。表面褐色至棕褐色，粗糙，具多个偏圆形突起。质硬脆，切面呈海绵样构造。有腥气，味微咸。实物图，如图1所示。2.本发明所述的干制羊胎盘粉末的显微特征鉴定通过OLYMPUS BX-41显微数码摄像系统(日本奥林巴斯公司)鉴定本发明所述的干制羊胎盘粉末，其呈黄褐色至灰褐色。肌纤维无色或淡黄色，常碎断，纤维细小，有的肌纤维束上可见黄棕色或红棕物，如图2所示。实施例2本发明所述的干制羊胎盘薄层色谱鉴别本方法简单，重复性好，斑点Rf值适中。具体说明如下1.实验条件与方法取所述干制羊胎盘研制成粉末，再取研制的粉末IgJP 70%乙醇10mL，超声处理20分钟(超声波处理器于功率250W，频率40kHz超声)，滤过，滤液作为供试品溶液。另取羊胎盘对照药材lg，同法制成对照药材溶液。再取亮氨酸对照品、甘氨酸对照品加70%乙醇制成每ImL各含0.5mg的混合溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述三种溶液各5yL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-水(4 I I)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试液，在105°C加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。结果如图3所示。2.方法学考察2.1不同温度的比较
取点样后的薄层板，分别在4°C和29°C的温度环境下进行展开，结果均能达到鉴别要求，图谱显示，在低温条件下，斑点分离更加清晰，效果更好。该方法对不同温度的适应性较好，如图4。2. 2不同湿度的比较取点样后的薄层板，分别在32%和88%的湿度中展开。结果表明该方法对不同湿度环境适应性较好，主斑点清晰，结果如图5所示。实施例3本发明所述的干制羊胎盘的水分含暈的测定照水分测定法(《中国药典》2010年版一部附录IX H第一法)测定，见表I。表1.水分测定结果(n = 2)
权利要求
1.一种干制羊胎盘的检测方法，所述检测方法包括以下步骤 1)通过薄层色谱法鉴定所述干制羊胎盘； 2)通过水分测定发测定所述干制羊胎盘中的水分； 3)通过原子吸收分光光度法或电感耦合等离子体质谱法测定所述干制羊胎盘中的重金属含量； 4)通过热浸法测定所述干制羊胎盘中的浸出物。
2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，在步骤I)中，通过薄层色谱法鉴定所述干制羊胎盘的具体步骤为制备供试品溶液、羊胎盘对照药材溶液，亮氨酸对照品和甘氨酸对照品后，分别吸取所述样品溶液、羊胎盘对照药材溶液，亮氨酸对照品和甘氨酸对照品适量，点于同一硅胶G薄层板上，通过展开剂展开，取出，晾干，喷以I %茚三酮乙醇溶液，力口热至斑点显色清晰，即得； 优选地，所述展开剂由正丁醇、甲醇、乙酸乙酯和乙酸组成，或由正丁醇、冰醋酸和水组成。
3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，在步骤I)中，制备供品溶液、羊胎盘对照药材溶液和甘氨酸对照品的具体步骤为将干制羊胎盘研成粉末，再取研制的粉末0.2 1§，加70%乙醇10mL，超声处理20分钟，滤过，滤液作为供试品溶液；另取羊胎盘对照药材lg，按照所述供试样品溶液的制备方法制成对照药材溶液；再取亮氨酸对照品、甘氨酸对照品加70%乙醇制成每ImL各含0. 5mg的混合溶液，作为对照品溶液。
4.根据权利要求2或3所述的检测方法，其特征在于，在步骤I)中，分别吸取所述样品溶液、羊胎盘对照药材溶液，亮氨酸对照品和甘氨酸对照品各5 y L。
5.根据权利要求4所述的检测方法，其特征在于，在步骤I)中，所述展开剂由以下体积份数的2份正丁醇、2份甲醇、2份乙酸乙酯、4份乙酸组成，或由以下体积份数的4份正丁醇、I份冰醋酸、I份水组成。
6.根据权利要求2至5中任一项所述的检测方法，其特征在于，在步骤I)中，于105°C加热至斑点显色清晰。
7.根据权利要求2至6中任一项所述的检测方法，其特征在于，在步骤2)中，所述干制羊胎盘中的水分的质量百分比含量为0 10. 0%。
8.根据权利要求2至7中任一项所述的检测方法，其特征在于，在步骤3)中，所述重金属为铅、镉、砷、萊、铜,所述铅的质量比含量为0 5ppm ;镉的质量比含量为0 0. 3ppm ;砷的质量比含量为0 2ppm ;萊的质量比含量为0 0. 2ppm ;铜的质量比含量为0 20ppm。
9.根据权利要求2至8中任一项所述的检测方法，其特征在于，在步骤4)中，用稀乙醇作溶剂进行测定，所述干制羊胎盘中浸出物的质量百分比含量> 10. 0%，优选地，所述稀乙醇的为重量体积百分比为49. 5% -50. 5%的稀乙醇。
全文摘要
本发明提供一种干制羊胎盘的检测方法，所述检测方法包括以下步骤1)通过薄层色谱法鉴定所述干制羊胎盘；2)通过水分测定发测定所述干制羊胎盘中的水分；3)通过原子吸收分光光度法或电感耦合等离子体质谱法测定所述干制羊胎盘中的中金属含量；4)通过热浸法测定所述干制羊胎盘中的浸出物。本发明的检测方法，对干制羊胎盘进行了鉴定，并测定了其中的水分含量、重金属含量及浸出物，并且稳定性、重复性好、操作方法简单，斑点Rf适中，能够有效地控制干制羊胎盘的质量标准，使其质量稳定，安全可控；所述干制羊胎盘能够用于调节内分泌、防老抗皱、提高强免疫能力和调节神经。
文档编号G01N21/84GK103063796SQ20111032752
公开日2013年4月24日 申请日期2011年10月24日 优先权日2011年10月24日
发明者郭德 申请人:青海金本生物科技实业股份有限公司