专利名称：减少来自测量系统外部的成分的干扰的方法
技术领域：
本发明涉及i) 一种减少来自测量系统外部的成分、特别是污染所述测量系统的水溶性聚硅氧烷和/或表面活性剂对所述测量系统的干扰的方法，所述方法特征在于，在使用载有对分析物具有高亲和性的物质或载有分析物的胶乳颗粒的胶乳凝集免疫测定(胶乳免疫凝集测定)中，在聚硅氧烷化合物的存在下进行胶乳免疫凝集反应，ii) 一种用于所述减少干扰的方法中的试剂，和iii)具有减少的干扰的胶乳凝集免疫测定法。
背景技术：
胶乳免疫凝集测定(胶乳池度测定免疫凝集法)(latex turbidimetricimmunoagglutination method)(下文中也称为LTIA法)通常在临床检验领域中用作生物样品中分析物(下文中也称为靶成分)的测量(测定)方法。LTIA法是这样的一种测量方法，其使用，例如，载有针对靶成分的抗体的胶乳颗粒(下文中也称为载有抗体的胶乳颗粒)，以便利用光学方法(例如，测量透射光的池度测定法(turbidimetric method)、测量散射光的池度法(nephelometric method))等来检测由于抗原(即，祀成分)与载有抗体的胶乳颗粒的结合所产生的胶乳颗粒的凝集程度(浊度)。已知表面活性剂类物质干扰包括LTIA法在内的免疫学测量系统。某种表面活性剂在免疫学测量系统中的存在可能引起问题，如抑制抗原-抗体反应本身并且解离通过抗原-抗体反应形成的抗原-抗体的结合。LTIA法是一种均质测量法，其中抗原-抗体反应在一个液相中进行，并且导致组成测量系统的物质，如载有抗体的胶乳颗粒，在测量过程中持续暴露于表面活性剂的环境，并且因此，由于表面活性剂，这可能导致对测量系统的干扰以复合方式发生，诸如引起分析物本身结构的改变，形成与分析物的复合物，对载有抗体的胶乳颗粒的非特异性吸附，和由胶乳颗粒载有的抗体和封闭蛋白的分离。当在血液(全血、血清或血浆)用作生物样品的情形中，从受试者采集血液时，可以将预防性成分(下文中也称为采血管处理剂)施用于采血管的内壁和盖上，以防止血液(血块)粘在采血管的内壁并在采血管和盖部分中起泡，并且防止获取血清的不充分的凝固和血清层与血细胞层的不充分分离。某种聚硅氧烷化合物本身被用作采血管处理剂，并且在一些情形中，被用作用于将除聚硅氧烷化合物外的其他采血管处理剂施用到内壁和盖上的介质。已经有一些关于来自施用到采血管内壁上的成分对LTIA法的干扰的报道。非专利文献I报道当用LTIA法测量用商购微量采血管得到的测量样品时观察到测量值减小。非专利文献I指出由采血管内壁释放出的水溶性聚硅氧烷是一种起因物质，并且描述了用多种LTIA试剂测量添加了水溶性聚硅氧烷的测量样品的测量结果。在非专利文献I中，还考虑当表面活性剂(Brij (注册商标)35, Tween (注册商标)20, Triton (注册商标)X-100)添加到测量样品时的干扰，并且报道了如与在水溶性聚硅氧烷的情形中一样观察到测量值的减小。非专利文献2报道了将用多种采血管得到的测量样品用多种LTIA试剂测量，并且在测量用微量采血管得到的测量样品时，如非专利文献I的情形一样，观察到测量值的减小，并且也指出在该情形中，由采血管内壁释放的水溶性聚硅氧烷是起因物质。在从较成人具有较小体重的新生儿采集血液时，通常使用微量采血管。即使使用微量采血管，在一些情形中，也不能容易地采集到预定量的血液，这导致采集的血液少于预定的量。在这样的情形中，测量样品中的采血管处理剂的浓度增加，并且预测对测量系统的干扰是突出的。非专利文献I中所考虑的表面活性剂在包括ELISA在内的免疫学测量方法中用作防止非特异性反应的试剂和清洁剂，并且还通常在临床测定所用的生化自动化分析仪中用作以下各项的清洁剂用于分散或搅拌测量样品和试剂的探头；试剂的流动通道；和重复使用的反应池。因此，在自动化分析仪中必须使用的LTIA试剂的情形中，必须注意由于在测量系统中混入表面活性剂引起的干扰。除了这样的情形外，没有关于避免来自这些表面活性剂的干扰的报道，特别是没有关于当用LTIA法测量通过微量采血管得到的测量样品时减少来自表面活性剂的干扰的方法的报道。引用列表非专利文献非专利文献I Japanese Journal of Medical Technology,卷 49, No. 10 (2000)，pp.1399-1403；非专利文献2 :0kayama Journal of Medical Technology,卷 40, No. 2 (2003),pp.6-10。发明概述技术问题本发明的目的是提供i)在使用载有对分析物具有高亲和性的物质或载有分析物的胶乳颗粒进行的胶乳凝集免疫测定中减少来自从测量系统外部混入的水溶性聚硅氧烷和/或表面活性剂对所述测量系统的干扰的方法，ii) 一种用于所述减少干扰的方法中的试剂，和iii)具有减少的干扰的胶乳凝集免疫测定法。问题的解决方案本发明人尝试验证各种观点，并且已经进行了广泛的研究来解决LTIA法中的问题，并且完全出乎意料地发现当在聚醚-改性的硅油存在下进行胶乳免疫凝集反应时，可以减少从测量系统外部混入并且来源于微量采血管的成分对测量系统的干扰，所述聚醚-改性的硅油被分类为与在非专利文献I和2中被认为是干扰的原因的水溶性聚硅氧烷相同的聚硅氧烷化合物。本发明人还出乎意料地发现当在聚醚-改性的硅油存在下进行胶乳免疫凝集反应时，也可以减少来自具有不同于水溶性聚硅氧烷的结构的表面活性剂(Brij (注册商标)35, Tween (注册商标)20, Triton (注册商标)X-100)的干扰,这使得完成了本发明。本发明包括下述(I) 一种减少从测量系统外部混入的水溶性聚硅氧烷和/或表面活性剂对所述测量系统的干扰的方法，其中在胶乳凝集免疫测定中，在聚硅氧烷化合物的存在下进行胶乳免疫凝集反应。(2)上述(I)的方法，其中所述聚硅氧烷化合物包含聚醚-改性的硅油。
(3)上述(I)或(2)的方法，其中通过允许胶乳试剂溶液包含所述聚硅氧烷化合物来提供所述聚硅氧烷化合物。(4)上述(I)至(3)的方法，其中允许胶乳试剂溶液包含所述聚硅氧烷化合物的步骤是基于封闭处理。(5)上述(I)至(4)的方法，其中在所述胶乳免疫凝集反应时所述聚硅氧烷化合物的浓度是O. 0001至I %。(6) 一种减少来自胶乳凝集免疫测定中混入的水溶性聚硅氧烷和/或表面活性剂的干扰的方法，所述方法包括下述步骤使得i)载有对分析物具有高亲和性的物质的胶乳颗粒和ii)聚硅氧烷化合物与包含来源于活体的所述分析物和所述混入的水溶性聚硅氧烷和/或表面活性剂的样品相接触；和测量所述分析物和所述胶乳颗粒的凝集反应。(7) 一种胶乳凝集免疫测定法，所述测定法包括下述步骤使得i)载有对分析物具有高亲和性的物质的胶乳颗粒和ii)聚硅氧烷化合物与包含来源于活体的所述分析物的样品相接触。(8) 一种用于胶乳凝集免疫测定法的试剂盒，所述试剂盒包括第一试剂,所述第一试剂包含缓冲剂；和第二试剂，所述第二试剂包含载有对分析物具有高亲和性的物质的胶乳颗粒，其中所述第一试剂和所述第二试剂中的至少一种包含聚硅氧烷化合物。(9) 一种用于胶乳凝集免疫测定法的试剂，所述试剂包括i)缓冲剂；ii)聚硅氧烷化合物；和iii)载有对分析物具有高亲和性的物质的胶乳颗粒。发明的有益效果本发明提供一种减少由测量系统外部混入的水溶性聚硅氧烷和/或表面活性剂对LTIA测量系统的干扰的方法。即使利用LTIA法使用通过微量采血管采集的测量样品进行测量，本发明也能够准确测量。实施方案描述(聚硅氧烷化合物)聚醚改性的硅油可以优选地用作本发明的聚硅氧烷化合物。优选的聚醚改性的硅油包括烷基(具有I至3个碳原子)硅氧烷和聚氧化烯(优选在烯基中具有2至5个碳原子)的共聚物，并且特别优选二甲基硅氧烷和聚氧化烯的共聚物。聚氧化烯是指聚氧乙烯、聚氧丙烯以及聚氧乙烯与聚氧丙烯的无规或嵌段聚合物。这样的聚醚改性的硅油的实例包括由下述通式(I)表示的化合物[化学式I]
权利要求
1.一种减少从测量系统外部混入的水溶性聚硅氧烷和/或表面活性剂对所述测量系统的干扰的方法，其中在胶乳凝集免疫测定中，在聚硅氧烷化合物的存在下进行胶乳免疫凝集反应。
2.权利要求1的方法，其中所述聚硅氧烷化合物包含聚醚-改性的硅油。
3.权利要求1或2的方法，其中通过允许胶乳试剂溶液包含所述聚硅氧烷化合物来提供所述聚硅氧烷化合物。
4.权利要求1至3的方法，其中允许胶乳试剂溶液包含所述聚硅氧烷化合物的步骤是基于封闭处理。
5.权利要求1至4的方法，其中在所述胶乳免疫凝集反应时所述聚硅氧烷化合物的浓度是O. OOOl至1%。
6.一种减少来自胶乳凝集免疫测定中混入的水溶性聚硅氧烷和/或表面活性剂的干扰的方法，所述方法包括下述步骤 使得i)载有对分析物具有高亲和性的物质的胶乳颗粒和ii)聚硅氧烷化合物与包含来源于活体的所述分析物和所述混入的水溶性聚硅氧烷和/或表面活性剂的样品相接触；和 测量所述分析物和所述胶乳颗粒的凝集反应。
7.一种胶乳凝集免疫测定法，所述测定法包括下述步骤 使得i)载有对分析物具有高亲和性的物质的胶乳颗粒和ii)聚硅氧烷化合物与包含来源于活体的所述分析物的样品相接触。
8.一种用于胶乳凝集免疫测定的试剂盒，所述试剂盒包括 第一试剂，所述第一试剂包含缓冲剂；和 第二试剂，所述第二试剂包含载有对分析物具有高亲和性的物质的胶乳颗粒，其中 所述第一试剂和所述第二试剂中的至少一种包含聚硅氧烷化合物。
9.一种用于胶乳凝集免疫测定的试剂，所述试剂包含 i)缓冲剂；ii)聚硅氧烷化合物；和iii)载有对分析物具有高亲和性的物质的胶乳颗粒。
全文摘要
本发明的目的是提供一种在胶乳凝集免疫测定法中减少由测量系统外部混入的水溶性聚硅氧烷和/或表面活性剂对所述测量系统的干扰的方法。在聚硅氧烷化合物存在下进行胶乳免疫凝集反应可以减少从测量系统外部混入的来源于微量采血管的成分(水溶性聚硅氧烷)和/或表面活性剂对所述测量系统的干扰。
文档编号G01N33/543GK103038641SQ201180026269
公开日2013年4月10日 申请日期2011年3月31日 优先权日2010年3月31日
发明者高桥弘至, 高桥由纪, 斋藤和典 申请人:积水医疗株式会社