专利名称：一种分散固相萃取方法测定茶叶中二十种农药残留量的制作方法
技术领域：
本发明涉及茶叶农药残留分析样品的前处理方法，是一种分散固相萃取方法，应用于茶叶农药残留分析中。
背景技术：
茶叶是我国重要的经济作物，也是全国人民的生活必需品。随着人们对食品安全质量要求日益提高，茶叶的安全质量问题已越来越为人们所重视。特别是近年来，发达国家和地区以保护健康为由，持续增加茶叶中农药残留的检测种类，并且不断降低检测物质的检出限量。这已成为当前我国茶叶出口最主要的技术性贸易壁垒。我国是茶叶消费大国，同时也是农药生产和使用大国，农药用量居世界首位，因饮用被农药污染的茶叶而发生农药急性中毒的事件已有发生。因此，茶叶中农药残留的正确检出，是确保我国农产品国际贸易和食品安全的迫切需要，同时也是实现农业强国和涌现一批世界明星级的农产品的需要。茶叶由许多不同属性物质组成，分析中所要检测的农药残留组分往往在样品中含量极低，可能还有多种组分共存，所以，如何进行有效的样品前处理，从茶叶中富集痕量目标组分往往成为能否对茶叶安全性进行有效检测的关键，它也是目前分析测试工作的瓶颈和国内外研究的薄弱环节。因此，需要针对样品前处理这一制约性难题开展攻关，特别是茶叶中超微量农药残留分析中的提取、净化、萃取、纯化或预分离。茶叶农药残留分析中，经典的样品前处理方法如索氏提取和液液萃取都存在一定的不足。这些方法步骤繁琐，不仅花费大量时间，而且有机溶剂用量大，萃取效率较低。同样的，现行国标方法中的茶叶提取净化过程使用了固相萃取的方法，这种方法也存在一些问题，如I、前处理过程复杂，耗时较长(I. 5-2小时)；2、净化过程所使用的固相萃取柱价格昂贵(120-150元/支)，且一次性使用，造成分析成本大幅提高；3、前处理过程中溶剂消耗量大(40-50晕升),对环境和分析操作者造成危害。本发明采用分散固相萃取法用于茶叶中痕量农药残留的前处理。方法原理是选择对不同种类的农药具有良好溶解性能的溶剂作为提取剂，净化吸附剂直接分散于待净化的提取液中，吸附基质中的干扰成分。这种方法的优点是不必进行固相萃取小柱的清洗活化平衡，以及样品的转移和旋转蒸发浓缩等步骤，操作简便，萃取效率高，回收率高，溶剂消耗量小，分析成本低，是一种绿色环保的样品前处理方法。本发明将这种前处理方法与液相色谱-质谱联用，应用到茶叶农药残留分析中。既发挥了色谱的高分离能力，又发挥了质谱的高鉴别能力，非常适用于多组分混合物的定性和定量分析。
发明内容
本发明目的就是针对茶叶样品前处理，提出了一种简单、易操作、重现性较好、灵敏度较高的分散固相萃取方法，用于茶叶中二十种农药残留量的快速检测。本发明的技术方案如下
一种茶叶中农药残留量测定的前处理方法，其特征是分散固相萃取法，方法步骤包括
1)、将碾细的茶叶试样置于10毫升具塞的聚丙烯离心管中，加入乙腈提取，振荡并离心，移取上清液至另一个离心管中，重复以上提取步骤，合并两次提取液，40摄氏度氮吹至干;
2)、向离心管中加入乙腈复溶，加入ODS试剂与PSA试剂，涡旋并离心，收集上清液；
3)、取上清液过O.22微米滤膜后，供液相色谱-质谱联用仪测定。本方法的优点
1、处理过程比较简单，大大缩短了萃取分析时间(2分钟)；
2、吸附剂只使用了少量的ODS与PSA，对目标物的净化效果较好，分析成本低(5-10元/次)，经济、实用；
3、相对于国标方法，本方法所消耗的溶剂量大大降低(7-10毫升)，对环境更加友好；
4、方法的萃取效率高，回收率高，减少了目标化合物的损失。因此，本方法简单、快速，大大降低了实验成本，适合于茶叶样品基质中痕量组分的测定，具有较强的应用价值。
20种农药标准溶液的多反应监测(MRM)色谱图(10微克/千克)如图I-图20 :
图I.西玛津标准溶液的多反应监测色谱图 图2.阿特拉津标准溶液的多反应监测色谱图 图3.莠灭津标准溶液的多反应监测色谱图 图4.特丁津标准溶液的多反应监测色谱图 图5.扑灭津标准溶液的多反应监测色谱图 图6.睛菌唑标准溶液的多反应监测色谱图 图7.三唑酮标准溶液的多反应监测色谱图 图8.戊唑醇标准溶液的多反应监测色谱图 图9.三唑磷标准溶液的多反应监测色谱图 图10.丙环唑标准溶液的多反应监测色谱图 图11.苯醚甲环唑标准溶液的多反应监测色谱图 图12.灭多威标准溶液的多反应监测色谱图 图13.异丙威标准溶液的多反应监测色谱图 图14.西维因标准溶液的多反应监测色谱图 图15.克百威标准溶液的多反应监测色谱图 图16.速灭磷标准溶液的多反应监测色谱图 图17.甲硫威标准溶液的多反应监测色谱图 图18.百治磷标准溶液的多反应监测色谱图 图19.抗蚜威标准溶液的多反应监测色谱图 图20.敌百虫标准溶液的多反应监测色谱图。
具体实施例方式利用本方法测定茶叶中的20种农药残留物。
称取I克碾细的茶叶试样，精确至O. 01克，至于10毫升具塞的聚丙烯离心管中，加入3毫升乙腈，振荡3分钟，以4000转/分钟离心3分钟，移取上清液至另一个离心管中，再向残渣中加入3毫升乙腈，重复以上提取步骤，合并两次提取液；40摄氏度氮吹至干，准确移取I毫升乙腈复溶，加入150毫克ODS试剂与50毫克PSA试剂，于涡旋混合器上涡旋90秒，4000转/分钟离心3分钟，取上清液过O. 22微米滤膜后，供液相色谱-质谱联用仪测定。色谱条件色谱柱Waterssymmetry C8 column (150 X 2· I 毫米)；柱温40 摄
氏度；流速0. 2毫升/分钟；进样量10微升；流动相Α相水(含O. 1%甲酸)；Β相甲醇
(含O. 1%甲酸)。梯度洗脱条件见表I :
表I液相色谱梯度洗脱条件
权利要求
1.茶叶中农药残留量测定的前处理方法，其特征是基质分散固相微萃取法，方法步骤为称取I克试样，精确至O. Ol克，置于10毫升具塞的聚丙烯离心管中，加入3毫升乙腈，振荡3分钟，以4000转/分钟离心3分钟，移取上清液至另一个离心管中，再向残渣中加入3毫升乙腈，重复以上步骤，合并两次提取液；40摄氏度氮吹至干，准确移取I. 00毫升乙腈复溶，加入150毫克ODS试剂与50毫克PSA试剂，于涡旋混合器上涡旋90秒，4000转/分钟离心3分钟，取上清液过O. 22微米滤膜后，供液相色谱-质谱联用仪测定。
全文摘要
本发明提出了一种分散固相萃取方法测定茶叶中二十种农药残留量。茶叶样品前处理方法为分散固相萃取法，操作步骤包括称取1克试样，精确至0.01克，置于10毫升具塞的聚丙烯离心管中，加入3毫升乙腈，振荡3分钟，以4000转/分钟离心3分钟，移取上清液至另一个离心管中，再向残渣中加入3毫升乙腈，重复以上步骤，合并两次提取液；40摄氏度氮吹至干，准确移取1.00毫升乙腈复溶，加入150毫克ODS试剂与50毫克PSA试剂，于涡旋混合器上涡旋90秒，4000转/分钟离心3分钟，取上清液过0.22微米滤膜后，供液相色谱-质谱联用仪测定。本方法大大缩短了前处理时间，减少了试剂消耗量，降低了分析成本，提高了分析灵敏度，可应用于茶叶农药残留检测。
文档编号G01N30/06GK102636593SQ20121010055
公开日2012年8月15日 申请日期2012年4月9日 优先权日2012年4月9日
发明者张玉, 徐晖, 王帅, 薛渭宏 申请人:华中师范大学