专利名称：一种小儿白贝止咳糖浆的综合检测方法
一种小儿白贝止咳糖浆的综合检测方法技术领域
本发明属于中药现代化领域，具体涉及一种小儿白贝止咳糖浆的检测方法。
背景技术：
中药成分复杂，特别是中药复方往往含多类、多种成分，构成了一个非常复杂的系 统。目前，新的有效部位中药制剂和现代复方中药制剂的研发不断增多，新的工艺及多种不 同提取方式并用于药品的研究及生产。
随着现代分析测试技术、设备仪器的迅猛发展，中药的含量测定、色谱鉴别成为检 测的重要手段。但目前一般只建立某一指标化学成分的含量测定或鉴别，针对上述多种新 工艺同时应用的情况，仅建立某单一成分的含量测定或鉴别在很大程度上带有较大的片面 性。
小儿白贝止咳糖浆具有清热解毒，化痰止咳的功效；用于痰火壅肺，咳痰黄稠或痰 中带血，胸胁胀痛，以及火热灼肺，痰阻气道所致咳嗽。
小儿白贝止咳糖浆为棕褐色粘稠液体；味甜。
其处方是白屈菜100g、瓜篓50g、清半夏20g、平贝母30g ；制法以上四味，平贝母、清半夏粉碎成粗粉，照流浸膏剂与浸膏剂项下的渗漉法，用 70%乙醇作溶剂浸溃24小时后进行渗漉，收集漉液600ml，浓缩成稠膏；另取白屈菜、瓜篓 加水煎煮二次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成稠膏状，取蔗糖650g制成单糖浆， 将上述稠膏加适量水搅匀，加入单糖浆，再加水至IOOOml混匀，即得。每瓶装100ml，每支 装IOml ； 口服六个月以内，一次I 5ml ;七至十二个月，一次5 15ml ； 一至三岁，一次 20ml ;三至六岁，一次20 25ml ;六至九岁，一次25 30ml ;九岁以上，一次30 50ml ; — 日3次。
方中君药白屈菜性凉，味苦，有镇痛止咳、平喘消肿之功，用于治疗慢性支气管炎、 百日咳等；臣药瓜萎甘寒清润，清热化痰，润肺下气，用于治疗痰热内结，咳嗽胸闷，痰黄粘 稠；臣药平贝母性寒质润，既可清热化痰，又可润燥止咳，为治热痰咳嗽及阴虚燥咳之良药； 佐药清半夏辛温而燥，燥湿化痰，用于治疗痰热犯肺，咳嗽痰黄，粘稠难咯；本品配伍精当， 共奏清热解毒、化痰止咳之功，临床主要用于治疗小儿痰热咳嗽。
小儿白贝止咳糖浆原来检测方法中做了白屈菜的薄层鉴别和理化鉴别，这样的 测检方法在很大程度上带有较大的片面性，需配合其它现代检测方法才能更全面的反映小 儿白贝止咳糖浆成份的含量。发明内容
本发明提供一种小儿白贝止咳糖浆的检测方法，以解决目前检测方法中存在的检 测方法不全面的问题。
本发明采取的技术方案是，包括如下鉴别方法、检查方法和含量测定方法(一)鉴别方法(1)取本品小儿白贝止咳糖浆5ml，用氢氧化钠试液调pH9 10，加乙醚3ml，振摇提取，取乙醚提取液，挥干，加水1ml、稀硫酸2 3滴使溶解，置两支试管中，其中一管加碘化铋钾试液I 2滴，生成橙红色沉淀；另一管加硅钨酸试液，生成白色沉淀；(2)取本品小儿白贝止咳糖浆5ml，加乙醇20ml振摇，滤过，滤液浓缩至近干，加乙醇 2ml使溶解，作为供试品溶液；另取白屈菜对照药材2g，同法制成对照药材溶液；照中国药典2010年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各2 μ 1，分别点于同一硅胶 G薄层板上，以正丁醇冰醋酸水=7:2:1. 5为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显一个橙黄色荧光斑点；(3)取本品小儿白贝止咳糖浆40ml，用10%氢氧化钠溶液调节pH值至10，用三氯甲烷 50 ml分2次振摇提取，合并三氯甲烷提取液.置水浴上蒸干，残渣加无水乙醇O. 5 ml使溶解，作为供试品溶液；另取平贝母对照药材2g，加氨水2ml，三氯甲烷20ml，超声处理15 分钟，放置过滤，滤液蒸干，残渣加三氯甲烷O. 5 ml使溶解，作为对照药材溶液；照中国药典2010年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各20μ 1，分别点于同一用2 %氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷乙酸乙酯甲醇冰=30 40 20 10, IO0C以下放置后的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(4)取本品20ml，用三氯甲烷振摇提取3次，每次20ml，合并三氯甲烷提取液，置水浴上蒸干，残渣加三氯甲烷Iml使溶解，作为供试品溶液；另取β-谷留醇对照品，加三氯甲烷制成每Iml中含5mg的溶液,作为对照品溶液；再取半夏对照药材Ig,加三氯甲烧20 ml,加热回流30分钟，滤过.滤液蒸干，残渣加三氯甲烷I ml使溶解，作为对照药材溶液；照中国药典2010年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述3种溶液各5 μ L，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯三氯甲烷丙酮=8 :5 :1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以20%高氯酸溶液，在110°C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品、对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(二)检查方法精密量取本品小儿白贝止咳糖浆20ml，置分液漏斗中，用水饱和的正丁醇振摇提取4 次，每次20ml，合并正丁醇液，置已干燥至恒重的蒸发皿中，蒸干，在105°C干燥3小时，置干燥器中冷却30分钟，迅速精密称定重量，即得；(三)含量测定方法(I)照中国药典2010年版一部附录VI D高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈0. 4%磷酸 =20:80为流动相，检测波长为289nm ;理论板数按原阿片碱峰计算应不低于12000 ；对照品溶液的制备精密称取原阿片碱对照品适量，加甲醇制成每Iml含70μ g的溶液，即得；供试品溶液的制备取 本品小儿白贝止咳糖浆5 0ml，加氨试液调节pH值至10，用乙酸乙酯提取5次，每次25ml，合并提取液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，并转移至IOml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得;(2)照中国药典2010年版一部附录VI D高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈水二乙胺 =70:30 :0. 03为流动相，检测波长为289nm ;蒸发光散射检测器检测，理论板数按贝母素甲峰计算应不低于2000 ；对照品溶液的制备取贝母素甲、贝母素乙对照品适量，加甲醇制成质量浓度分别为O.75g/L、0. 89g/L的混合溶液，作为贮备液，精密量取贮备液制成每ImL含贝母素甲60 μ g、 含贝母素乙70 μ g的混合溶液，即得；供试品溶液的制备精密取本品小儿白贝止咳糖浆25mL，置分液漏斗中，加氨水2mL， 用三氯甲烷提取4次，20ml/次，提取液蒸干，残渣用甲醇溶解并转移至IOml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得。
(3)照中国药典2010年版一部附录VA紫外一可见分光光度法对照品溶液的制备精密称取在105°C干燥至恒重的精氨酸对照品250mg，置50ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，作为储备液；精密量取上述储备液Iml和3ml，分别置 50ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得；供试品溶液的制备精密量取本品小儿白贝止咳糖浆10ml，置50ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得；测定法精密量取对照品溶液，供试品溶液各1ml，分别置25ml量瓶中，另以水作为空白溶液，分别加PH8. O磷酸盐缓冲溶液O. 5ml, 2%茚三酮溶液O. 5ml，摇匀，置沸水浴中煮沸 15分钟，取出，迅速放冷，加水稀释至刻度，摇匀，在570nm的波长处测定吸光度，按外标两点法计算，即得。
本发明优点是规范了小儿白贝止咳糖浆的检测方法，通过增加对正丁醇提取物的称重，建立对君药白屈菜和臣药平贝母、瓜萎的鉴别和含量测定，以及清半夏鉴别的，与原理化鉴别和君药白屈菜的鉴别共同使用，能更全面的检测该药物的成分，了解其含量和稳定性，也有助于说明药物的药用物质基础。
具体实施方式
小儿白贝止咳糖浆由吉林草还丹药业有限公司按背景技术中处方和工艺生产提供。
包括如下鉴别方法、检查方法和含量测定方法(一)鉴别方法(1)取本品小儿白贝止咳糖浆5ml，用氢氧化钠试液调pH9 10，加乙醚3ml，振摇提取，取乙醚提取液，挥干，加水1ml、稀硫酸2 3滴使溶解， 置两支试管中，其中一管加碘化铋钾试液I 2滴，生成橙红色沉淀；另一管加硅钨酸试液，生成白色沉淀；(2)取本品小儿白贝止咳糖浆5ml，加乙醇20ml振摇，滤过，滤液浓缩至近干，加乙醇 2ml使溶解，作为供试品溶液；另取白屈菜对照药材2g，同法制成对照药材溶液；照中国药典2010年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各2 μ 1，分别点于同一硅胶 G薄层板上，以正丁醇冰醋酸水=7:2:1. 5为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显一个橙黄色荧光斑点；(3)取本品小儿白贝止咳糖浆40ml，用10%氢氧化钠溶液调节pH值至10，用三氯甲烷 50 ml分2次振摇提取，合并三氯甲烷提取液.置水浴上蒸干，残渣加无水乙醇O. 5 ml使溶解，作为供试品溶液；另取平贝母对照药材2g，加氨水2ml，三氯甲烷20ml，超声处理15 分钟，放置过滤，滤液蒸干，残渣加三氯甲烷O. 5 ml使溶解，作为对照药材溶液；照中国药典2010年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各20μ 1，分别点于同一用2 %氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷乙酸乙酯甲醇水=30 40 20 10, IO0C以下放置后的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(4)取本品20ml，用三氯甲烷振摇提取3次，每次20ml，合并三氯甲烷提取液，置水浴上蒸干，残渣加三氯甲烷Iml使溶解，作为供试品溶液；另取β-谷留醇对照品，加三氯甲烷制成每Iml中含5mg的溶液,作为对照品溶液；再取半夏对照药材Ig,加三氯甲烧20 ml,加热回流30分钟，滤过.滤液蒸干，残渣加三氯甲烷I ml使溶解，作为对照药材溶液；照中国药典2010年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述3种溶液各5 μ L，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯三氯甲烷丙酮=8 :5 :1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以20%高氯酸溶液，在110°C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品、对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(二)检查方法精密量取本品小儿白贝止咳糖浆20ml，置分液漏斗中，用水饱和的正丁醇振摇提取4 次，每次20ml，合并正丁醇液，置已干燥至恒重的蒸发皿中，蒸干，在105°C干燥3小时，置干燥器中冷却30分钟，迅速精密称定重量，即得；本品含正丁醇提取物不得少于1. 8% ;(三)含量测定方法(O照中国药典2010年版一部附录VI D高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈0. 4%磷酸 =20:80为流动相，检测波长为289nm ;理论板数按原阿片碱峰计算应不低于12000 ；对照品溶液的制备精密称取原阿片碱对照品适量，加甲醇制成每Iml含70μ g的溶液，即得；供试品溶液的制备取本品小儿白贝止咳糖浆5 0ml，加氨试液调节pH值至10，用乙酸乙酯提取5次，每次25ml，合并提取液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，并转移至IOml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得;(2)照中国药典2010年版一部附录VI D高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试验以十八 烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈水二乙胺 =70:30 :0. 03为流动相，检测波长为289nm ;蒸发光散射检测器检测，理论板数按贝母素甲峰计算应不低于2000 ；对照品溶液的制备取贝母素甲、贝母素乙对照品适量，加甲醇制成质量浓度分别为O.75g/L、0. 89g/L的混合溶液，作为贮备液，精密量取贮备液制成每ImL含贝母素甲60 μ g、含贝母素乙70 μ g的混合溶液，即得；供试品溶液的制备精密取本品小儿白贝止咳糖浆25mL，置分液漏斗中，加氨水2mL， 用三氯甲烷提取4次，20ml/次，提取液蒸干，残渣用甲醇溶解并转移至IOml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得。
(3)照中国药典2010年版一部附录VA紫外一可见分光光度法对照品溶液的制备精密称取在105°C干燥至恒重的精氨酸对照品250mg，置50ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，作为储备液；精密量取上述储备液Iml和3ml，分别置 50ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得；供试品溶液的制备精密量取本品小儿白贝止咳糖浆10ml，置50ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得；测定法精密量取对照品溶液，供试品溶液各1ml，分别置25ml量瓶中，另以水作为空白溶液，分别加PH8. O磷酸盐缓冲溶液O. 5ml, 2%茚三酮溶液O. 5ml， 摇匀，置沸水浴中煮沸 15分钟，取出，迅速放冷，加水稀释至刻度，摇匀，在570nm的波长处测定吸光度，按外标两点法计算，即得。
权利要求
1.一种小儿白贝止咳糖浆的检测方法，包括如下鉴别方法(1)取本品小儿白贝止咳糖浆5ml，用氢氧化钠试液调pH9 10，加乙醚3ml，振摇提取，取乙醚提取液，挥干，加水1ml、稀硫酸2 3滴使溶解，置两支试管中，其中一管加碘化铋钾试液I 2滴，生成橙红色沉淀；另一管加硅钨酸试液，生成白色沉淀；(2)取本品小儿白贝止咳糖浆5ml，加乙醇20ml振摇，滤过，滤液浓缩至近干，加乙醇 2ml使溶解，作为供试品溶液；另取白屈菜对照药材2g，同法制成对照药材溶液；照中国药典2010年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各2 μ 1，分别点于同一硅胶 G薄层板上，以正丁醇冰醋酸水=7:2:1. 5为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显一个橙黄色荧光斑点；其特征在于还包括如下鉴别方法、检查方法和含量测定方法(一)鉴别方法(3)取本品小儿白贝止咳糖浆40ml，用10%氢氧化钠溶液调节pH值至10，用三氯甲烷 50 ml分2次振摇提取，合并三氯甲烷提取液.置水浴上蒸干，残渣加无水乙醇O. 5 ml使溶解，作为供试品溶液；另取平贝母对照药材2g，加氨水2ml，三氯甲烷20ml，超声处理15 分钟，放置过滤，滤液蒸干，残渣加三氯甲烷O. 5 ml使溶解，作为对照药材溶液；照中国药典2010年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各20μ 1，分别点于同一用2 %氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷乙酸乙酯甲醇水=30 40 20 10, IO0C以下放置后的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(4)取本品20ml，用三氯甲烷振摇提取3次，每次20ml，合并三氯甲烷提取液，置水浴上蒸干，残渣加三氯甲烷Iml使溶解，作为供试品溶液；另取β-谷留醇对照品，加三氯甲烷制成每Iml中含5mg的溶液,作为对照品溶液；再取半夏对照药材Ig,加三氯甲烧20 ml,加热回流30分钟，滤过.滤液蒸干，残渣加三氯甲烷I ml使溶解，作为对照药材溶液；照中国药典2010年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述3种溶液各5 μ L，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯三氯甲烷丙酮=8 :5 :1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以20%高氯酸溶液，在110°C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品、对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(二)检查方法精密量取本品小儿白贝止咳糖浆20ml，置分液漏斗中，用水饱和的正丁醇振摇提取4 次，每次20ml，合并正丁醇液，置已干燥至恒重的蒸发皿中，蒸干，在105°C干燥3小时，置干燥器中冷却30分钟，迅速精密称定重量，即得；(三)含量测定方法(I)照中国药典2010年版一部附录VI D高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈0. 4%磷酸 =20:80为流动相，检测波长为289nm ;理论板数按原阿片碱峰计算应不低于12000 ；对照品溶液的制备精密称取原阿片碱对照品适量，加甲醇制成每Iml含70μ g的溶液，即得；供试品溶液的制备取本品小儿白贝止咳糖浆5 0ml，加氨试液调节pH值至10，用乙酸乙酯提取5次，每次25ml，合并提取液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，并转移至IOml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得；(2)照中国药典2010年版一部附录VI D高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈水二乙胺 =70:30 :0. 03为流动相，检测波长为289nm ;蒸发光散射检测器检测，理论板数按贝母素甲峰计算应不低于2000 ；对照品溶液的制备取贝母素甲、贝母素乙对照品适量，加甲醇制成质量浓度分别为·O.75g/L、0. 89g/L的混合溶液，作为贮备液，精密量取贮备液制成每ImL含贝母素甲60 μ g、 含贝母素乙70 μ g的混合溶液，即得；供试品溶液的制备精密取本品小儿白贝止咳糖浆25mL，置分液漏斗中，加氨水2mL， 用三氯甲烷提取4次，20ml/次，提取液蒸干，残渣用甲醇溶解并转移至IOml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得；(3)照中国药典2010年版一部附录VA紫外一可见分光光度法对照品溶液的制备精密称取在105°C干燥至恒重的精氨酸对照品250mg，置50ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，作为储备液；精密量取上述储备液Iml和3ml，分别置 50ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得；供试品溶液的制备精密量取本品小儿白贝止咳糖浆10ml，置50ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得；测定法精密量取对照品溶液，供试品溶液各1ml，分别置25ml量瓶中，另以水作为空白溶液，分别加PH8. O磷酸盐缓冲溶液O. 5ml, 2%茚三酮溶液O. 5ml，摇匀，置沸水浴中煮沸 15分钟，取出，迅速放冷，加水稀释至刻度，摇匀，在570nm的波长处测定吸光度，按外标两点法计算，即得。
全文摘要
本发明涉及一种小儿白贝止咳糖浆的检测方法，属于中药现代化领域。通过增加对正丁醇提取物的称重，建立对君药白屈菜和臣药平贝母、瓜蒌的鉴别和含量测定，以及清半夏鉴别的，与原理化鉴别和君药白屈菜的鉴别共同使用，优点是规范了小儿白贝止咳糖浆的检测方法，能更全面的检测该药的成分，了解其含量和稳定性，也有助于说明药物的药用物质基础。
文档编号G01N21/82GK103063542SQ20131000007
公开日2013年4月24日 申请日期2013年1月1日 优先权日2013年1月1日
发明者殷金玲, 李坤, 徐德辉, 杨锡龙, 李雪, 李男男, 马伟才, 郭英侠, 宁超群, 樊艳霞 申请人:吉林草还丹药业有限公司