一种分离检测阿奇霉素及其杂质的方法
【专利摘要】本发明公开了一种分离检测阿奇霉素及其杂质的方法，其包括下述步骤：将阿奇霉素样品溶于乙腈形成样品溶液，用液相色谱-质谱法分离检测阿奇霉素及其杂质，即可；其中，液相色谱-质谱法的条件如下：色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱，流动相A的配制：体积分数为0.3%的甲酸水溶液，用氨水调pH值至8.20；流动相B为乙腈与甲醇的体积比为3∶1的混合溶液，以流动相A与流动相B进行线性梯度洗脱；流速为1.0mL/min；紫外检测器的检测波长为210-215nm；经过紫外检测器后的流份的1/5～1/3进入质谱仪检测。本发明的方法检测灵敏度高，采用的色谱柱所设柱温低，操作简捷方便。
【专利说明】一种分离检测阿奇霉素及其杂质的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及药物检测领域，尤其涉及一种分离检测阿奇霉素及其杂质的方法。
【背景技术】
[0002] 阿奇霉素 （Azithromycin)是通过红霉素 A上9-酮基汚化后经贝克曼重排、还原、 N-甲基化反应合成得到的IS元氮杂大环内酯类化合物，最初是由普利瓦（Pliva)公司于 二十世纪七十年代末开发，后转让给辉瑞（Pfizer)公司，以Zithromax(希舒美）为商品名 在全球销售。阿奇霉素的抗菌机理与红霉素相似，通过与细菌细胞中核糖体50S亚基结合， 阻碍细菌转肽过程，抑制依赖于RNA的蛋白质的合成而达到抗菌作用。与红霉素比较，阿奇 霉素具有更广泛的抗菌谱，能抑制多种革兰阳性球菌、支原体、衣原体及嗜肺军团菌，尤其 是对一些重要的革兰阴性杆菌如流感嗜血杆菌等具有良好的抗菌活性，弥补了大环内酯类 对嗜血杆菌作用差的不足。
[0003]杂质检查是药品安全性评价的一个重要指标。由于阿奇霉素为半合成产品，起始 原料以及合成过程中容易产生较多杂质，加之对酸、碱、热、氧化等因素较敏感等原因，使得 对其杂质控制较其他抗生素品种更为复杂。目前国内外药典及文献报道，对阿奇霉素及其 杂质的测定多采用HPLC-UV (高效液相色谱-紫外检测）的方法，由于其结构属于大环内酯 类，紫外仅有末端吸收，因而检测灵敏度较低。美国药典（USPM版）对该项检查应用到了 电化学检测器，铝基质色谱柱（USP中L29色谱柱）或氧化锆色谱柱（ USp中L49色谱柱）， 此试验条件在国内也不易推广使用。欧洲药典（7. 0)所采用的方法柱温为6(rC，所设柱温 较高，对色谱柱的损耗很大，对绝大多数色谱柱来说已达到柱温极限。
[0004]阿奇霉素及其杂质的结构如式1及表1所示。
[0005]
[0006] 式 1
【权利要求】
1. 一种分离检测阿奇霉素及其杂质的方法，其特征在于，其包括下述步骤：将阿奇霉 素样品溶于乙腈中，或溶于流动相A与流动相B按体积比为70:30的溶液中，形成样品溶 液，用液相色谱-质谱法分离检测阿奇霉素及其杂质，即可； 其中，液相色谱-质谱法的条件如下：色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱；流动相 A的配制：体积分数为0. 3%的甲酸水溶液，用氨水调节其pH值至8. 20 ;流动相B为乙腈与 甲醇的体积比为3:1的混合溶液；以流动相A与流动相B按照下述体积比进行线性梯度洗 脱：0min: 70%A+30%B - 30min: 70%A+30%B - 50min: 45%A+55%B - 53min: 45%A+55%B - 65min: 3 0%A+70%B ;流速为1. OmL/min ;紫外检测器的检测波长为210-215nm ;经过紫外检测器后的流 份的1/5?1/3进入质谱仪检测。
2. 如权利要求1所述的分离检测阿奇霉素及其杂质的方法，其特征在于，所述的样品 溶液的质量浓度为〇. 5-2mg/mL，所述的样品溶液的进样量为5?20 μ L。
3. 如权利要求2所述的分离检测阿奇霉素及其杂质的方法，其特征在于，所述的样品 溶液的质量浓度为lmg/mL，所述的样品溶液的进样量为10 μ L。
4. 如权利要求1所述的分离检测阿奇霉素及其杂质的方法，其特征在于，所述的样品 溶液在进样前进行超声溶解。
5. 如权利要求1所述的分离检测阿奇霉素及其杂质的方法，其特征在于，所述的色谱 柱为规格5 μ m，4. 6mmX 250mm的十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱。
6. 如权利要求5所述的分离检测阿奇霉素及其杂质的方法，其特征在于，所述的色谱 柱为 SHISEIDO XBridge? Shield RP18 柱、CAPCELL PAK C18MG II 柱和 Waters XBridge? C18色谱柱中的一种。
7. 如权利要求1所述的分离检测阿奇霉素及其杂质的方法，其特征在于，所述的色谱 柱的柱温为35-45°C。
8. 如权利要求7所述的分离检测阿奇霉素及其杂质的方法，其特征在于，所述的色谱 柱的柱温为40°C。
9. 如权利要求1所述的分离检测阿奇霉素及其杂质的方法，其特征在于，所述的质 谱仪为Waters micromass ZQ质谱仪，其工作参数为喷雾高压：3kV;锥孔电压：30V;源温 l〇〇°C ;脱溶剂温度250°C ;全扫描范围m/z250?1000。
【文档编号】G01N30/06GK104297383SQ201310068514
【公开日】2015年1月21日 申请日期:2013年3月4日 优先权日:2013年3月4日
【发明者】李悦, 许卓妮, 沈舜义 申请人:上海医药工业研究院, 中国医药工业研究总院