一种检测果蔬制品中硝酸盐和亚硝酸盐的样本前处理方法及使用其的检测方法
【专利摘要】本发明提供了一种检测果蔬制品中硝酸盐和亚硝酸盐的样本前处理方法，包括：取绞碎的待测果蔬制品1克，加入碳酸盐溶液定容至20毫升后混合，得到混合液；和将混合液的pH值调节至7至14后超声提取，超声提取后离心取上清液；其中碳酸盐溶液的配制方法为：取1.0mL浓度为1.0mol/L碳酸钠溶液和1.0mL浓度为1.0mol/L碳酸氢钠溶液用水定容至1000毫升。前处理过程中亚硝酸盐与硝酸盐的损失较小。本发明还提供了一种检测果蔬制品中硝酸盐和亚硝酸盐的方法，其检测的回收率及精密度较高，且无需使用Ag柱和Na柱即可排除氯离子对检测结果的影响。
【专利说明】一种检测果蔬制品中硝酸盐和亚硝酸盐的样本前处理方法 及使用其的检测方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种检测食品中硝酸盐和亚硝酸盐的样本前处理方法及使用其的检 测方法，尤其适用于果蔬制品中硝酸盐和亚硝酸盐含量的测定。
【背景技术】
[0002] 目前，常用于果蔬制品中亚硝酸盐与硝酸盐的检测方法为《GB 5009. 33- 2010食 品安全国家标准食品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定》中"第一法离子色谱法"的针对水果中 亚硝酸盐与硝酸盐的检测方法，其中提取方法为将样品匀浆后加水超声提取，再于75 °C水 浴中放置5分钟，用水稀释后离心取上清。这种提取方法对亚硝酸盐与硝酸盐的损失较大， 尤其是在亚硝酸盐与硝酸盐含量较低的情况下，使得检测的回收率及精密度较低。
【发明内容】
[0003] 本发明的目的是提供一种检测果蔬制品中硝酸盐和亚硝酸盐的样本前处理方法， 前处理过程中亚硝酸盐与硝酸盐的损失较小。
[0004] 本发明的另一个目的是提供一种检测果蔬制品中硝酸盐和亚硝酸盐的方法，其检 测的回收率及精密度较高。
[0005] 本发明提供了一种检测果蔬制品中硝酸盐和亚硝酸盐的样本前处理方法，包括： 取绞碎的待测果蔬制品1克，加入碳酸盐溶液定容至20毫升后混合，得到混合液；和将混合 液的pH值调节至7至14后超声提取，超声提取后离心取上清液；其中碳酸盐溶液的配制方 法为：取1· OmL浓度为1. Omol/L碳酸钠溶液和1. 〇mL浓度为1. 0 mol/L碳酸氢钠溶液用 水定容至1000毫升。
[0006] 在检测果蔬制品中硝酸盐和亚硝酸盐的样本前处理方法的一种示意性实施方式 中，超声提取的时长为10至20分钟。
[0007] 在检测果蔬制品中硝酸盐和亚硝酸盐的样本前处理方法的一种示意性实施方式 中，将混合液的pH值调节至12后进行超声提取。
[0008] 在检测果蔬制品中硝酸盐和亚硝酸盐的样本前处理方法的一种示意性实施方式 中，离心的转速为10000转/分钟，时长为10至15分钟。
[0009] 在检测果蔬制品中硝酸盐和亚硝酸盐的样本前处理方法的一种示意性实施方式 中，还包括，将上清液用碳酸盐溶液稀释后依次过〇· 22微米水相滤膜针头滤器和RP固相萃 取柱净化。
[0010] 在检测果蔬制品中硝酸盐和亚硝酸盐的样本前处理方法的一种示意性实施方式 中，上清液用碳酸盐溶液稀释的倍数为2倍。
[0011] 本发明还提供了一种检测果蔬制品中硝酸盐和亚硝酸盐的方法，包括：根据上述 样本前处理方法对待测果蔬制品进行前处理，得到待测液；和用离子色谱法对待测液中的 硝酸盐和亚硝酸盐进行检测。
[0012] 在检测果蔬制品中硝酸盐和亚硝酸盐的方法的一种示意性实施方式中，离子色谱 法中分离柱为阴离子交换色谱柱，检测器为电导检测器，抑制器为阴离子抑制器，柱温^ 30°C，流速为0· 7 mL/分钟，进样量为50 μ L。 '
[0013] 在检测果蔬制品中硝酸盐和亚硝酸盐的方法的一种示意性实施方式中，离子色谱 法中流动相包括：Α淋洗液为1. Ommol/L碳酸钠和1. 0 mmol/L碳酸氢钠的水溶液，Β淋洗 液为40mmol/L碳酸钠的水溶液；梯度时间程序为：〇· 〇分钟至18. 0分钟使用a淋洗液； IS. 1分钟至27· 0分钟使用B淋洗液；27. 1分钟至45. 0分钟使用A淋洗液。 '
[0014] 本发明提供的一种检测果蔬制品中硝酸盐和亚硝酸盐的样本前处理方法，前处理 过程中亚硝酸盐与硝酸盐的损失较小。
[0015] 本发明提供的一种检测果蔬制品中硝酸盐和亚硝酸盐的方法，其样本前处理过程 中亚硝酸盐与硝酸盐的损失较小，检测的回收率及精密度较高，且无需使用Ag柱和Na柱 即可排除氯离子对检测结果的影响。
【专利附图】
【附图说明】
[0016] 以下附图仅对本发明做示意性说明和解释，并不限定本发明的范围。
[0017] 图1是本发明第一实施例的检测待测果蔬制品的色谱图。
[0018] 图2是本发明第二实施例的检测待测果蔬制品的色谱图。
[0019] 图3是本发明第三实施例的检测待测果蔬制品的色谱图。
[0020] 图4是本发明第四实施例的检测待测果蔬制品的色谱图。
[0021] 图5是本发明第五实施例的检测待测果蔬制品的色谱图。
[0022] 图6是本发明第六实施例的检测待测果蔬制品的色谱图。
【具体实施方式】
[0023]为了对发明的技术特征、目的和效果有更加清楚的理解，现结合以下实施例说明 本发明的【具体实施方式】。
[0024] 第一实施例。
[0025] 一、待测果蔬制品和试剂： 待测果蔬制品：燕麦黄桃果粒； 碳酸盐溶液：取1· 〇mL浓度为1· Omol/L碳酸钠溶液和1. 〇mL浓度为1. 〇 mol/L碳酸 氢钠溶液用水定容至1〇〇〇毫升，即得到碳酸盐溶液； 标准溶液：移取亚硝酸盐和硝酸盐混合标准使用液，加水稀释，制成系列标准溶液，含 亚硝酸根离子浓度依次为 〇.〇〇mg/L、0. 01 mg/L、0. 05 mg/L、0.10 mg/L、0. 40 mg/L、〇_8〇 mg/L、l. 00 mg/L;硝酸根呙子浓度依次为 0·00 mg/L、0. 10 nig/L、0.50 mg/L、l_〇〇 mg/L、 4.00 mg/L、8· 00 mg/L、10.00 mg/L。
[0026] 二、步骤。
[0027] 1、样本前处理： a、 取经组织绞碎机绞碎且均匀的待测果蔬制品1克于5〇1^离心管中，加入碳酸盐溶液 定容至20毫升后漩涡混匀1分钟，得到混合液； b、 用氢氧化钠溶液将混合液的pH值调节至7后超声提取1〇分钟，超声提取后离心取 上清液，其中离心的转速为10000转/分钟，时长为10分钟； C、将上清液用碳酸盐溶液稀释2倍后先过0· 22微米水相滤膜针头滤器，再过RP固相 萃取柱(使用OnGuard II RP柱）并弃去前6mL，收集后面洗脱液，即得到待测液。
[0028] 2、用离子色谱法对待测液和标准溶液中的硝酸盐和亚硝酸盐进行检测，并根据标 准溶液的仪器检测结果绘制标准曲线，根据标准曲线及待测液的仪器检测结果计算得到待 测液中亚硝酸根离子及硝酸根离子浓度，其中： 检测参数为：分离柱为阴离子交换色谱柱Metrosep A Supp 5-250/4.0,检测器为电导 检测器，抑制器为阴离子抑制器，柱温为30?，流速为〇. 7 mL/分钟，进样量为50 μ L ; 流动相：Α淋洗液为1.0mmol/L碳酸钠和1.0 mmol/L碳酸氢钠的水溶液；Β淋洗液为 40 mmol/L碳酸钠的水溶液； 梯度时间程序为：〇· 〇分钟至1S. 〇分钟使用所述A淋洗液；18. 1分钟至27. 0分钟使用 所述B淋洗液；27. 1分钟至45. 0分钟使用所述A淋洗液。
[0029] 3、按照如下公式计算待测果蔬制品中亚硝酸根离子或硝酸根离子的含量： X= (CXVXfXIOOO) / (MX1000)； 式中： x--待测果蔬制品中亚硝酸根离子或硝酸根离子的含量，单位为毫克每千克（mg/ kg)； C--待测液中的亚硝酸根离子或硝酸根离子浓度，单位为毫克每升（mg/L); V--待测液的体积，单位为毫升(mL); f--用碳酸盐溶液稀释上清液的稀释倍数； Μ--待测果蔬制品的取样量，单位为克（g); 说明：待测果蔬制品中测得的亚硝酸根离子含量乘以换算系数1. 5,即得亚硝酸盐(按 亚硝酸钠计)含量；待测果蔬制品中测得的硝酸根离子含量乘以换算系数1. 37,即得硝酸盐 (按硝酸钠计）含量。结果保留两位有效数字。本实施例的检测结果参见图1。
[0030] 第二实施例。
[0031 ] 一、待测果蔬制品和试剂： 待测果蔬制品：草莓果酱； 碳酸盐溶液：与第一实施例所述碳酸盐溶液相同； 标准溶液：与第一实施例所述标准溶液相同。
[0032] 二、步骤：与第一实施例所述步骤相同。本实施例的检测结果参见图2。
[0033] 第三实施例。
[0034] 一、待测果蔬制品和试剂： 待测果蔬制品：桑椹椰果果粒； 碳酸盐溶液：与第一实施例所述碳酸盐溶液相同； 标准溶液：与第一实施例所述标准溶液相同。
[0035] 二、步骤。
[0036] 1、样本前处理： a、取经组织绞碎机绞碎且均匀的待测果蔬制品1克于50mL离心管中，加入碳酸盐溶液 定容至20毫升后漩涡混勻1. 5分钟，得到混合液； b、 用氢氧化钠溶液将混合液的pH值调节至12后超声提取15分钟，超声提取后离心取 上清液，其中离心的转速为10000转/分钟，时长为13分钟； c、 将上清液用碳酸盐溶液稀释2倍后先过0· 22微米水相滤膜针头滤器，再过RP固相 萃取柱(使用OnGuard II RP柱）并弃去前6mL收集后面洗脱液，即得到待测液。
[0037] 2、与第一实施例所述步骤2相同。
[0038] 3、与第一实施例所述步骤3相同。本实施例的检测结果参见图3。
[0039] 第四实施例。
[0040] 一'、待测果蔬制品和试剂： 待测果蔬制品：大麦芦荟果酱； 碳酸盐溶液：与第一实施例所述碳酸盐溶液相同； 标准溶液：与第一实施例所述标准溶液相同。
[0041] 二、步骤：与第三实施例所述步骤相同。本实施例的检测结果参见图4。
[0042] 第五实施例。
[0043] 一、待测果蔬制品和试剂： 待测果蔬制品：椰果果粒； 碳酸盐溶液：与第一实施例所述碳酸盐溶液相同； 标准溶液：与第一实施例所述标准溶液相同。
[0044] 二、步骤。
[0045] 1、样本前处理： a、 取经组织绞碎机绞碎且均匀的待测果蔬制品1克于50mL离心管中，加入碳酸盐溶液 定容至20毫升后漩涡混匀2分钟，得到混合液； b、 用氢氧化钠溶液将混合液的pH值调节至14后超声提取2〇分钟，超声提取后离心取 上清液，其中离心的转速为10000转/分钟，时长为15分钟； c、 将上清液用碳酸盐溶液稀释2倍后先过0. 22微米水相滤膜针头滤器，再过RP固相 萃取柱(使用OnGuard II RP柱）并弃去前6mL收集后面洗脱液，即得到待测液。
[0046] 2、与第一实施例所述步骤2相同。
[0047] 3、与第一实施例所述步骤3相同。本实施例的检测结果参见图5。
[0048] 第六实施例。
[0049] 一、待测果蔬制品和试剂： 待测果蔬制品：黄桃果酱； 碳酸盐溶液：与第一实施例所述碳酸盐溶液相同； 标准溶液：与第一实施例所述标准溶液相同。
[0050] 二、步骤：与第五实施例所述步骤相同。本实施例的检测结果参见图6。
[0051 ] 检出限验证。
[0052] 按照《GB/T 50〇9· 1-2003食品卫生检验方法-理化部分-总则》中的附录A的 "A. 2检出限"中的要求，验证第一至第六实施例的检测方法的检出限，结果如下所示： 第一实施例：亚硝酸盐为0. 〇13mg/kg，硝酸盐为0. 014mg/kg ; 第二实施例：亚硝酸盐为0. 〇13mg/kg，硝酸盐为0. 013mg/kg ; 第三实施例：亚硝酸盐为0. 〇13mg/kg，硝酸盐为0· 015mg/kg ; 第四实施例：亚硝酸盐为〇· 〇13mg/kg，硝酸盐为0. 015mg/kg ; 第五实施例：亚硝酸盐为〇· 〇13mg/kg，硝酸盐为0. 014mg/kg ; 第六实施例：亚硝酸盐为0. 〇13mg/kg，硝酸盐为0. 014mg/kg。
[0053] 回收率验证。
[0054] 方法：在果蔬制品中添加硝酸根或亚硝酸根标准品，得到加标样本，用第一至第六 实施例及《GB 5009. 33- 2010食品安全国家标准食品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定》中"第 一法离子色谱法"的检测方法对加标样本进行三次平行检测并计算平均回收率。结果如下 表所示。
[0055]
【权利要求】
1. 一种检测果蔬制品中硝酸盐和亚硝酸盐的样本前处理方法，其特征在于，包括： 取绞碎的待测果蔬制品1克，加入碳酸盐溶液定容至20毫升后混合，得到混合液；和 将所述混合液的pH值调节至7至14后超声提取，所述超声提取后离心取上清液； 其中所述碳酸盐溶液的配制方法为：取1. OmL浓度为1. Omol/L碳酸钠溶液和1. OmL浓 度为1. 0 mol/L碳酸氢钠溶液用水定容至1000毫升。
2. 如权利要求1所述的检测果蔬制品中硝酸盐和亚硝酸盐的样本前处理方法，其中所 述超声提取的时长为10至20分钟。
3. 如权利要求1所述的检测果蔬制品中硝酸盐和亚硝酸盐的样本前处理方法，其中将 所述混合液的pH值调节至12后进行所述超声提取。
4. 如权利要求1所述的检测果蔬制品中硝酸盐和亚硝酸盐的样本前处理方法，其中所 述离心的转速为10000转/分钟，时长为10至15分钟。
5. 如权利要求1所述的检测果蔬制品中硝酸盐和亚硝酸盐的样本前处理方法，其中还 包括，将所述上清液用所述碳酸盐溶液稀释后依次过〇. 22微米水相滤膜针头滤器和RP固 相萃取柱净化。
6. 如权利要求5所述的检测果蔬制品中硝酸盐和亚硝酸盐的样本前处理方法，其中所 述上清液用所述碳酸盐溶液稀释的倍数为2倍。
7. -种检测果蔬制品中硝酸盐和亚硝酸盐的方法，其特征在于，包括： 根据权利要求1所述的样本前处理方法对待测果蔬制品进行前处理，得到待测液；和 用离子色谱法对所述待测液中的硝酸盐和亚硝酸盐进行检测。
8. 如权利要求7所述的检测果蔬制品中硝酸盐和亚硝酸盐的方法，其中所述离子色 谱法中分离柱为阴离子交换色谱柱，检测器为电导检测器，抑制器为阴离子抑制器，柱温为 30°C，流速为0. 7 mL/分钟，进样量为50 μ L。
9. 如权利要求7所述的检测果蔬制品中硝酸盐和亚硝酸盐的方法，其中所述离子色谱 法中流动相包括：Α淋洗液为1.0mm〇l/L碳酸钠和1.0 mmol/L碳酸氢钠的水溶液，Β淋洗 液为40 mmol/L碳酸钠的水溶液；梯度时间程序为：0. 0分钟至18. 0分钟使用所述A淋洗 液；18. 1分钟至27. 0分钟使用所述B淋洗液；27. 1分钟至45. 0分钟使用所述A淋洗液。
【文档编号】G01N30/02GK104297356SQ201310305991
【公开日】2015年1月21日 申请日期:2013年7月19日 优先权日:2013年7月19日
【发明者】崔晓青, 姜芳, 刘江梅, 缪艳红, 刘艳玲 申请人:内蒙古蒙牛乳业（集团）股份有限公司