一种用连续流动法测定烟草或烟草制品中总植物碱的方法
【专利摘要】本发明提供一种用连续流动法测定烟草或烟草制品中总植物碱的方法。该方法采用硫氰酸钾和二氯异氰尿酸钠在线生成氯化氰，氯化氰与所述烟草或烟草制品中的总植物碱(以烟碱计)反应，使烟碱的吡啶环断开，进而与对氨基苯磺酸发生反应，反应产物用比色计在460nm处测定，该方法包括：采用缓冲溶液A和缓冲溶液B将反应体系的pH值控制在6.0～7.5之间；其中，缓冲溶液A的配制为：称取磷酸氢二钠、磷酸三钠至烧杯中，用水溶解，然后转入1L容量瓶中，用水定容至刻度；缓冲溶液B的配制为：称取对氨基苯磺酸、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠和柠檬酸钠至烧杯中，用水溶解，然后转入1L容量瓶中，用水定容至刻度。
【专利说明】一种用连续流动法测定烟草或烟草制品中总植物碱的方法
【技术领域】
[0001]本发明属于烟草化学成分检测【技术领域】，具体涉及一种用连续流动法测定烟草或烟草制品中总植物碱的方法。
【背景技术】
[0002]烟碱是烟草的重要成分，无烟碱也就称不上烟草。在烟草常规分析中，通常通过测定烟草中总植物碱的含量来获知烟碱的含量信息。烟草行业目前发布的关于烟草中总植物碱测定的标准有:GB/T23225-2008 “烟草及烟草制品总植物碱的测定光度法”、YC/T160-2002 “烟草及烟草制品总植物碱的测定连续流动法”以及YC/T468-2013 “烟草及烟草制品总植物碱的测定连续流动(硫氰酸钾)法”。
[0003]连续流动法属于仪器分析方法，适合大批量进样，目前应用较为广泛。YC/T160-2002 “烟草及烟草制品总植物碱的测定连续流动法”的测定原理是采用氰化钾和氯胺T在线生成氯化氰，使烟碱的吡啶环断开，进而与对氨基苯磺酸发生反应，反应产物在460nm波长处用比色计进行测定。氰化钾虽然较为稳定，但它是一种剧毒的物质，位于有毒化学品前列。对于氰化钾的使用，存在诸多顾忌，其销售渠道把关很严，很多实验室购买周期很长甚至无法买到，使用者还需要在公安机关备案等等。由于该方法对反应适宜的酸碱环境有要求，因此该方法是通过缓冲溶液A和缓冲溶液B来控制反应的酸碱环境。在该方法中由于缓冲溶液B的缓冲能力不强，如一些化学分析实验室用水的pH在5.0?6.0之间，该缓冲溶液B的缓冲能力达不到测试需要。该方法实际使用水的pH要求要高于GB6682/T-2008 “分析实验室用水规格和试验方法”中一级水的要求，为了达到该方法的用水要求，化学分析实验室需要对一级水进行再处理，使该方法实际使用具有一定的局限性。
[0004]YC/T468_2013“烟草及烟草制品总植物碱的测定连续流动(硫氰酸钾)法”的测定原理是采用硫氰酸钾和二氯异氰尿酸钠在线生成氯化氰，使烟碱的吡啶环断开，进而与对氨基苯磺酸发生反应，反应产物在460nm波长处用比色计进行测定。相较于YC/T160-2002，YC/T468-2013不使用氰化钾，提高了总植物碱测定的操作安全性。在YC/T468-2013中对反应适宜的酸碱环境也有要求，同样是通过缓冲溶液A和缓冲溶液B来控制反应的酸碱环境，虽然能够有效控制反应的酸碱环境，但是该方法缓冲溶液A和缓冲溶液B配制时化学品用量较大，同样对该方法的使用带来不便。
【发明内容】
[0005]为了克服现有技术的缺陷，本发明提供一种用连续流动法测定烟草或烟草制品中总植物碱的方法。该方法改变了 YC/T468-2013中的缓冲溶液A和缓冲溶液B，建立了一种新的缓冲体系，减少配制缓冲溶液A和缓冲溶液B时化学品的使用量，同时保证了同YC/T468-2013方法测试结果的一致性。
[0006]本发明是采用如下技术方案来实现的。
[0007]—种用连续流动法测定烟草或烟草制品中总植物碱的方法，该方法采用硫氰酸钾和二氯异氰尿酸钠在线生成氯化氰，氯化氰与所述烟草或烟草制品中的总植物碱(以烟碱计)反应，使烟碱的吡啶环断开，进而与对氨基苯磺酸发生反应，反应产物用比色计在460nm处测定，该方法包括:
[0008]采用缓冲溶液A和缓冲溶液B将反应体系的pH值控制在6.0?7.5之间；
[0009]其中，缓冲溶液A的配制为:称取磷酸氢二钠60.5-83.0g，优选为71.6g ;磷酸三钠10.1-20.2g，优选为15.2g至烧杯中，用水溶解，然后转入IL容量瓶中，用水定容至刻度；
[0010]缓冲溶液B的配制为:称取对氨基苯磺酸5.5-8.0g,优选为7.0g ;磷酸氢二钠60.5-83.0g，优选为71.6g ;磷酸二氢钠5.0-7.0g，优选为6.2g和柠檬酸钠10.0-12.lg，优选为11.8g至烧杯中，用水溶解，然后转入IL容量瓶中，用水定容至刻度。
[0011]上述的磷酸氢二钠、磷酸三钠、磷酸二氢钠、柠檬酸钠可以为常规存在形式，例如磷酸氢二钠以12个结晶水形式存在，磷酸三钠以12个结晶水形式存在，磷酸二氢钠以2个结晶水形式存在，柠檬酸钠以2个结晶水形式存在。
[0012]优选地，上述方法中，缓冲溶液A与缓冲溶液B的用量比为1:2至1:1 (体积比)，优选为3:4(体积比)；
[0013]优选地，上述方法还包括:
[0014]样品的制备为:按YC/T31制备烟草试样，并测定其水分含量，然后使用5%醋酸对烟草试样进行萃取，过滤，得滤液。
[0015]优选地，上述方法还包括:
[0016]标准溶液的配制为:
[0017]称取烟碱或烟碱盐以5%的醋酸溶解，配制成至少5个工作标准液，所配制的标准溶液中烟碱含量浓度范围为0.5?7% ;
[0018]优选地，上述方法还包括:
[0019]解毒液A的配制为:称取Ig柠檬酸、1g硫酸亚铁至烧杯中，用水溶解，然后转入IL容量瓶中，用水定容至刻度；该解毒液A的主要作用是降低未参与反应的氯化氰的毒性，该解毒液A与YC/T160-2002 (氰化钾法)中的解毒液A相同。
[0020]解毒液B的配制为:称取1g碳酸钠至烧杯中，用水溶解，然后转入IL容量瓶中，用水定容至刻度；该解毒液B的主要作用是降低未参与反应的氯化氰的毒性，该解毒液B与YC/T160-2002 (氰化钾法)解毒液B相同。
[0021]硫氰酸钾溶液的配制为:称取硫氰酸钾至烧杯中，用水溶解，然后转入250mL容量瓶中，用水定容，该溶液浓度范围为0.09?0.21mol/L，优选为0.12mol/L。
[0022]二氯异氰尿酸钠溶液的配制为:称取二氯异氰尿酸钠至烧杯中，用水溶解，然后转入250mL容量瓶中，用水定容，该溶液浓度范围为0.02?0.06mol/L，优选为0.04mol/L。
[0023]优选地，上述方法中，硫氰酸钾溶液和二氯异氰尿酸钠溶液浓度比为2.5:1至
3.5:1，优选为 3:1。
[0024]优选地,上述方法还包括:
[0025]使用连续流动分析仪进行检测，然后根据下式计算样品中的总植物碱:
[0026]
【权利要求】
1.一种用连续流动法测定烟草或烟草制品中总植物碱的方法，该方法采用硫氰酸钾和二氯异氰尿酸钠在线生成氯化氰，氯化氰与所述烟草或烟草制品中的总植物碱(以烟碱计)反应，使烟碱的吡啶环断开，进而与对氨基苯磺酸发生反应，反应产物用比色计在460nm处测定，该方法包括: 采用缓冲溶液A和/或缓冲溶液B将反应体系的pH值控制在6.0~7.5之间；其中，缓冲溶液A的配制为:称取磷酸氢二钠60.5-83.0g,优选为71.6g ;磷酸三钠10.1-20.2g，优选为15.2g至烧杯中，用水溶解，然后转入IL容量瓶中，用水定容至刻度；缓冲溶液B的配制为:称取对氨基苯磺酸5.5-8.0g,优选为7.0g、磷酸氢二钠60.5-83.0g，优选为71.6g、磷酸二氢钠5.0-7.0g，优选为6.2g和柠檬酸钠10.0-12.lg，优选为11.8g至烧杯中，用水溶解，然后转入IL容量瓶中，用水定容至刻度。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，缓冲溶液A与缓冲溶液B的用量比为1:2至1:1，优选为3:4。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述方法还包括: 样品的制备为:按YC/T31制备烟草试样，并测定其水分含量，然后使用5%醋酸对烟草试样进行萃取，过滤，得滤液。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其特征在于，所述方法还包括: 标准溶液的配制为:称取烟碱或烟碱盐以5%的醋酸溶解，配制成至少5个工作标准液，所配制的标准溶液中烟碱含量浓度范围为0.5~7%。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其特征在于，所述方法还包括: 解毒液A的配制为:称取Ig柠檬酸、1g硫酸亚铁至烧杯中，用水溶解，然后转入IL容量瓶中，用水定容至刻度； 解毒液B的配制为:称取1g碳酸钠至烧杯中,用水溶解,然后转入IL容量瓶中,用水定容至刻度； 硫氰酸钾溶液的配制为:称取硫氰酸钾至烧杯中，用水溶解，然后转入250mL容量瓶中，用水定容，该溶液浓度范围为0.09~0.21mol/L，优选为0.12mol/L ； 二氯异氰尿酸钠溶液的配制为:称取二氯异氰尿酸钠至烧杯中，用水溶解，然后转入250mL容量瓶中，用水定容，该溶液浓度范围为0.02~0.06mol/L，优选为0.04mol/L ；优选地，上述方法中，硫氰酸钾溶液和二氯异氰尿酸钠溶液浓度比为2.5:1至3.5:1，优选为3:1。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其特征在于，所述方法还包括: 使用连续流动分析仪进行检测，然后根据下式计算样品中的总植物碱:
式中，X:样品的仪器观测值，单位毫克每毫升(mg/mL)； V:加入的萃取液体积，单位为毫升(mL)； m:样品质量，单位为克(g)； W:试样的水分百分含量，％ (质量分数)； 上式计算的总植物碱为以干基计的总植物碱的含量。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其特征在于，所述方法中连续流动分析仪的运行参数为:进样清洗比为1.5，进样频率48杯/小时，增益18-60，光强2.85伏。
8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法包括: (1)样品的制备:按YC/T31制备烟草试样，并测定其水分含量，然后使用5%醋酸对烟草试样进行萃取，过滤，得滤液备用； (2)标准溶液的配制: 称取烟碱或烟碱盐以5%的醋酸溶解，配制成至少5个工作标准液，所配制的标准溶液中烟碱含量浓度范围为0.5~7% ; (3)反应试剂的配制: 硫氰酸钾溶液的配制为:称取硫氰酸钾至烧杯中，用水溶解，然后转入250mL容量瓶中，用水定容，该溶液浓度范围为0.09~0.21mol/L，优选为0.12mol/L ； 二氯异氰尿酸钠溶液的配制为:称取二氯异氰尿酸钠至烧杯中，用水溶解，然后转入.250mL容量瓶中，用水定容，该溶液浓度范围为0.02~0.06mol/L，优选为0.04mol/L ；缓冲溶液A的配制:称取磷酸氢二钠60.5-83.0g,优选为71.6g、磷酸三钠.10.1-20.2g，优选为15.2g至烧杯中，用水溶解，然后转入IL容量瓶中，用水定容至刻度；缓冲溶液B的配制:称取对氨基苯磺酸5.5-8.0g,优选为7.0g、磷酸氢二钠.60.5-83.0g，优选为71.6g、磷酸二氢钠5.0-7.0g，优选为6.2g和柠檬酸钠10.0-12.lg，优选为11.8g至烧杯中，用水溶解，然后转入IL容量瓶中，用水定容至刻度； 解毒液A的配制为:称取Ig柠檬酸、1g硫酸亚铁至烧杯中，用水溶解，然后转入IL容量瓶中，用水定容至刻度； 解毒液B的配制为:称取1g碳酸钠至烧杯中,用水溶解,然后转入IL容量瓶中，用水定容至刻度； (4)使用连续流动分析仪在步骤(3)的反应体系下检测步骤(1)的滤液和步骤(2)的工作标准液； (5)根据下式计算样品中的总植物碱:
式中，X:样品的仪器观测值，单位毫克每毫升(mg/mL)； V:加入的萃取液体积，单位为毫升(mL)； m:样品质量，单位为克(g)； W:试样的水分百分含量，％ (质量分数)； 上式计算的总植物碱为以干基计的总植物碱的含量。
9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，缓冲溶液A与缓冲溶液B的用量比为1:2至1:1，优选为3:4，该用量比使得反应体系的pH值控制在6.0~7.5之间；优选地，硫氰酸钾溶液和二氯异氰尿酸钠溶液浓度比为2.5:1至3.5:1，优选为3:1。
10.根据权利要求8或9所述的方法，其特征在于，连续流动分析仪的运行参数为:进样清洗比为1.5，进样频率48杯/小时，增益18-60，光强2.85伏。
【文档编号】G01N21/31GK104132937SQ201410324273
【公开日】2014年11月5日 申请日期:2014年7月8日 优先权日:2014年7月8日
【发明者】张威, 刘楠, 马雁军, 胡清源, 邢军, 侯宏卫, 罗安娜, 何声宝, 王英元, 冯晓民 申请人:国家烟草质量监督检验中心