山莨菪根的薄层检测方法
【专利摘要】本发明提供了山莨菪根的薄层检测方法，它包括如下操作步骤：(1)供试品溶液制备：取待检药材，粉碎，加入氨水和三氯甲烷，静置后，回流或超声提取，过滤，滤液蒸干后，加甲醇溶解，即得供试品溶液；(2)将供试品溶液点样于硅胶板，以甲苯-丙酮-无水乙醇-浓氨试液＝15:10:7:2或三氯甲烷-甲醇-氨水＝17:2:1为展开剂，碘化铋钾试液为显色剂，依次展开、显色后，检视即可。本发明硅胶薄层方法，能够有效将山莨菪根中的多种成分分离，特别是山莨菪根中的指标成分樟柳碱、东莨菪碱和阿托品等，说明本发明硅胶薄层色谱对山莨菪根的检测有较好的特异性，为山莨菪根的快速检测提供了依据。
【专利说明】山首着根的薄层检测方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及山畏着根的薄层检测方法。
【背景技术】
[0002] 山畏着 Anisodus tanguticus (Maxim. ) Pascher 或铃链子Anisodus Iuridus Link et化to为茄科山畏着属植物，野生分布于海拔2 800?4 200m的山坡及草坡阳处，目前 尚有少量栽培。四川甘孜州和阿巧州的野生山畏着或铃链子资源极为丰富，藏医常W种子 和根入药，其根的藏药名为"唐冲那保"或"唐冲纳波"，已收入2014年版《四川省藏药材标 准》，具有止痛解痊、镇静镇梅、止咳平喘等功效。现代研究表明，山畏着根主要含畏着焼类 生物碱，如棒柳碱、山畏着碱、东畏着碱、阿巧品等，具有调节植物神经功能奈乱，兴奋循环 和呼吸中枢，调节免疫功能，解除平滑肌痊李，封闭M和a受体，活化目受体，活跃和疏通 微循环，增强人工膜的流动性等药理活性。
[0003] 前期研究发现，由于受产地生态环境等的影响，不同来源的山畏着根的生物碱类 成分含量差异较大。因此，本发明拟采用娃胶薄层色谱建立对山畏着根的快速检测方法。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的在于提供山畏着根的薄层检测方法。
[0005] 具体地，本发明提供了山畏着根的薄层检测方法，它包括如下操作步骤：
[0006] (1)供试品溶液制备：
[0007] 取待检药材，粉碎，加入氨水和H氯甲焼，静置后，回流或超声提取，过滤，滤液蒸 干后，加甲醇溶解，即得供试品溶液；
[0008] (2)将供试品溶液点样于娃胶板，W甲苯-丙丽-无水己醇-浓氨试液= 15:10:7:2或H氯甲焼-甲醇-氨水=17:2:1为展开剂，楓化饿钟试液为显色剂，依次展 开、显色后，检视即可。
[0009] 进一步地，步骤（1)中，氨水：药材> 2 ;lml/g。
[0010] 更进一步地，步骤（1)中，氨水：药材=2?2. 5 ;lml/g。
[0011] 本发明一个【具体实施方式】中，氨水：药材=2 ;lml/g。
[0012] 进一步地，步骤（1)中，H氯甲焼：药材> 25: Iml/g。
[0013] 更进一步地，步骤（1)中，H氯甲焼：药材=25?50: Iml/g。
[0014] 本发明为薄层检测方法，主要用于定性分析，故提取方法中无需注重有效成分是 否提取完全。步骤（1)中的静置和提取时间，亦可采用常规的静置和提取时间，本发明一个
【具体实施方式】中，静置时间在0.化W上，回流提取时间为1?化。
[0015] 进一步地，步骤（2)中，所述娃胶板为娃胶G板。
[0016] 进一步地,显色后的供试品溶液娃化板上,存在与硫酸阿巧品对应的斑点，该待检 药材即为山畏着根。
[0017] 本发明娃胶薄层方法，能够有效将山畏着根中的多种成分分离，特别是山畏着根 中的指标成分棒柳碱、东畏着碱和阿巧品等，说明本发明娃胶薄层色谱对山畏着根的检测 有较好的特异性，为山畏着根的快速检测提供了依据。
【专利附图】
【附图说明】
[001引图1甲苯-丙丽-己醇-浓氨试液（15 ; 10 ;7 ;2)展开色谱；1.氨漠酸棒柳碱对 照品；2.氨漠酸东畏着碱对照品；3.硫酸阿巧品对照品；4.样品2点样品9 ;6.样品10 [001引 图2 S氯甲焼-甲醇-氨水（17 ;2 ;1)展开色谱：标注同图1 [0020] 图3二甲苯-丙丽-无水己醇-二己胺巧0:40:10:0. 6)展开色谱：标注同图1 [002。 图4娃胶G薄层板（美国进口 ME服预制板），1.氨漠酸棒柳碱对照品；
[0022] 2.氨漠酸东畏着碱对照品；3.硫酸阿巧品对照品；4.样品2点样品9 ;6.样品 10
[0023] 图5娃胶G薄层板（青岛海洋预制板），标注同图4
[0024] 图6不同批号样品的检测图谱；11.硫酸阿巧品对照品；12.氨漠酸东畏着碱对照 品；13.氨漠酸棒柳碱对照品；1.样品1 ;2.样品2 ;3.样品3 ;4.样品4点样品5 ;6.样 品6 ;7.样品7 ;8.样品8 ;9.样品9 ;10.样品10
[00巧]图7不同批号样品的检测图谱；12.硫酸阿巧品对照品；13.氨漠酸东畏着碱对照 品；14.氨漠酸棒柳碱对照品；1.样品11 ;2.样品12 ;3.样品13 ;4.样品14 ;5.样品15 ; 6.样品16 ;7.样品17 ;8.样品18 ;9.样品19 ;10.样品20 ;21.样品21
【具体实施方式】
[0026] 实施例1本发明山畏着根薄层检测方法
[0027] (1)供试品溶液制备
[0028] 称取待检药材（过H号筛）2. Og,置具塞锥形瓶中，加入4ml氨水使湿润，加IOOml H氯甲焼，密塞，称定重量，静置比，加热回流化，放冷，，滤过，滤液水浴蒸干，残渣加甲醇 溶解，即得供试品溶液。
[002引 似供试品的展开
[0030] 照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述对照品溶液， 点于娃胶G薄层板上，W甲苯-丙丽-无水己醇-氨水（15:10:7:2)为展开剂，展开，取出， 瞭干，喷W楓化饿钟试液，日光下检视即可。
[0031] 采用上述方法检测时，可W硫酸阿巧品为对照，若供试品薄层板上有对照品相应 斑点，即可判定为合格的山畏着根药材。
[0032] 实施例2本发明山畏着根薄层检测方法
[0033] (1)供试品溶液制备
[0034] 称取待检药材（过H号筛）2. Og,置具塞锥形瓶中，加入5ml氨水使湿润，加50ml H氯甲焼，密塞，称定重量，静置0.化，加热回流比，放冷，，滤过，滤液水浴蒸干，残渣加甲 醇溶解，即得供试品溶液。
[00对 似供试品的展开
[0036] 照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述对照品溶液， 点于娃胶G薄层板上，W甲苯-丙丽-无水己醇-氨水（15:10:7:2)为展开剂，展开，取出， 瞭干，喷W楓化饿钟试液，日光下检视即可。
[0037] 采用上述方法检测时，可W硫酸阿巧品为对照，若供试品薄层板上有对照品相应 斑点，即可判定为合格的山畏着根药材。
[0038] 实施例3方法学考察
[0039] (1)不同展开剂的考察
[0040] 展开剂1 ;甲苯-丙丽-无水己醇-氨水（15:10:7:。
[00川展开剂2 氯甲焼-甲醇-氨水（17:2:1)
[0042] 展开剂3:二甲苯-丙丽-无水己醇-二己胺巧0:40:10:0. 6)
[0043] 分别用上述展开剂对供试品薄层板进行展开，显色剂：楓化饿钟试液。
[0044] 结果表明，展开剂1、2展开效果相似，均能有效地将较多斑点分离，且能够显示阿 巧品对照斑点（见图1、2)。而展开剂3无法有效地将供试品展开，不能用于娃胶薄层色谱 检测（见图3)。
[004引另外，展开剂1中Rf在0.2?0.8,较为合适，展开剂2的Rf值快接近0. 8，本发明 后期试验中选择展开剂1进行考察，但不表示展开剂2不能适用于对山畏着根的检测，从图 2可W看出，展开剂2同样能够有效将各成分有效分离。
[0046] (2)不同来源的娃胶G板的考察
[0047] 用不同来源的薄层板对原标准方法进行试验，展开剂；甲苯-丙丽-无水己醇-浓 氨试液（15 ; 10 ;7 ;2)，显色剂：楓化饿钟试液。
[0048] 结果表明，各种薄层板耐用性良好，见图4-5。
[0049] (3)对不同批次的样品进行检测
[0050] 供实验用样品信息见表1。
[00川表1样品信息
[0052]
【权利要求】
1. 山莨菪根的薄层检测方法，其特征在于：它包括如下操作步骤： (1) 供试品溶液制备： 取待检药材，粉碎，加入氨水和三氯甲烷，静置后，回流或超声提取，过滤，滤液蒸干后， 加甲醇溶解，即得供试品溶液； (2) 将供试品溶液点样于硅胶板，以甲苯-丙酮-无水乙醇-浓氨试液=15:10:7:2或 三氯甲烷-甲醇-氨水=17:2:1为展开剂，碘化铋钾试液为显色剂，依次展开、显色后，检 视即可。
2. 根据权利要求1所述的薄层检测方法，其特征在于：步骤（1)中，氨水：药材> 2 : lml/g〇
3. 根据权利要求2述的薄层检测方法，其特征在于：步骤⑴中，氨水：药材=2? 2. 5 : lml/g。
4. 根据权利要求1所述的薄层检测方法，其特征在于：步骤⑴中，三氯甲烷：药材 ^ 25:lml/g〇
5. 根据权利要求4所述的薄层检测方法，其特征在于：步骤⑴中，三氯甲烷：药材= 25 ?50: lml/g。
6. 根据权利要求1所述的薄层检测方法，其特征在于：步骤（1)中，静置时间在0.5h以 上。
7. 根据权利要求1所述的薄层检测方法，其特征在于：步骤（1)中，回流提取时间为 1 ?2h。
8. 根据权利要求1所述的薄层检测方法，其特征在于：步骤（2)中，所述硅胶板为硅胶 G板。
9. 根据权利要求1所述的薄层检测方法，其特征在于：显色后的供试品溶液硅胶板上， 存在与硫酸阿托品对应的斑点，该待检药材即为山莨菪根。
10. 根据权利要求1或9所述的薄层检测方法，其特征在于：所述山莨菪根源自于茄科 植物山直菪 Anisodus tanguticus (Maxim.) Pascher 或铃，当子 Anisodus luridus Link et Otto的干燥根。
【文档编号】G01N30/90GK104237448SQ201410528354
【公开日】2014年12月24日 申请日期:2014年10月9日 优先权日:2014年10月9日
【发明者】马逾英, 蒋运斌, 苟琰, 袁茂华 申请人:成都中医药大学