一种石菖蒲提取物中成分的检测方法与流程

文档序号:11109020阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种石菖蒲提取物中成分的检测方法,其包含如下步骤:将石菖蒲提取物经液相色谱检测,即可;其中,液相色谱的参数如下:填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶;流动相为甲醇和磷酸二氢钾水溶液;所述的磷酸二氢钾水溶液的pH为3.5~4.5,浓度为4.5~5.5mmol/L;梯度洗脱。

2.如权利要求1所述的检测方法,其特征在于,所述的磷酸二氢钾水溶液使用无机酸调节pH,较佳地采用磷酸调节pH,所述的磷酸二氢钾水溶液的pH较佳地为4.0;

和/或,所述的磷酸二氢钾水溶液的浓度为5mmol/L。

3.如权利要求1所述的检测方法,其特征在于,所述的梯度洗脱的梯度为:初始梯度为所述的磷酸二氢钾水溶液占所述的流动相的体积百分数为97%-100%;最终梯度为所述的磷酸二氢钾水溶液占所述的流动相的体积百分数为20%。

4.如权利要求1所述的检测方法,其特征在于,所述的梯度洗脱的梯度为:初始梯度为所述的磷酸二氢钾水溶液占所述的流动相的体积百分数为97%-100%;第二梯度为所述的磷酸二氢钾水溶液占所述的流动相的体积分数由97%-100%变化至75%;第三梯度为所述的磷酸二氢钾水溶液占所述的流动相的体积分数由75%变化至40%;第四梯度为所述的磷酸二氢钾水溶液占所述的流动相的体积分数由40%变化至20%;最终梯度为所述的磷酸二氢钾水溶液占所述的流动相的体积百分数为20%。

5.如权利要求4所述的检测方法,其特征在于,所述的初始梯度的洗脱时间为15min;所述的第二梯度的洗脱时间为10min;所述的第三梯度的洗脱时间为25min;所述的第四梯度的洗脱时间为10min;所述的最终梯度的洗脱时间为10min-20min,较佳地为20min。

6.如权利要求1所述的检测方法,其特征在于,所述液相色谱的参数还包括:柱温为25-35℃,较佳地为30℃;

和/或,所述的流动相的流速为0.4-0.6ml/min,较佳地为0.5ml/min;

和/或,检测波长较佳地为210nm。

7.如权利要求1所述的检测方法,其特征在于,所述的检测方法的步骤为:

(1)制备对照品溶液:取α-细辛醚,β-细辛醚对照品和乙酰胺、胍基钠和胍基甲酸单体化合物对照品适量,精密称定,分别用甲醇制成每1ml含0.005mg对照品的溶液;

(2)制备供试品溶液:取石菖蒲提取物适量,精密称定,置容量瓶中,加水制成每1ml含5mg石菖蒲提取物的溶液;

(3)检测:分别精密吸取所述的对照品溶液与所述的供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即可。

8.如权利要求1所述的检测方法,其特征在于,所述的石菖蒲提取物采用如下制备方法获得:将经水提醇沉的石菖蒲药材提取物的上清液,用大孔吸附树脂吸附,洗脱树脂,得洗脱液,即可。

9.如权利要求8所述的检测方法,其特征在于,所述的水提醇沉的步骤为将石菖蒲药材和水混合提取后,收集提取液;向所述提取液中加醇类溶剂,沉降,收集上清液,即为所述的经水提醇沉的石菖蒲药材提取物的上清液。

10.如权利要求8或9所述的检测方法,其特征在于,所述的水提的步骤中,水的用量为石菖蒲质量的6~10倍,较佳地为6~8倍,更佳地为8倍;

和/或,提取的温度为90℃~100℃;

和/或,提取时间为30~120分钟,较佳地为60~120分钟;

和/或,提取次数为1~4次,较佳地为2~3次,更佳地为3次;

和/或,所述的醇沉的步骤中,醇类溶剂为乙醇,较佳地为95%乙醇,百分数为体积百分数;

和/或,醇类溶剂的加入量为在所述的醇类溶剂与所述的浓缩液的混合溶液中,加入至含有65~80%的醇类溶剂,较佳地为含有65~75%的醇类溶剂,百分数为体积百分数;

和/或,所述的醇沉的时间为加入醇类溶剂后沉降8~12小时;

较佳地,在所述的醇沉的步骤之前,将所述的水提的提取液减压浓缩;较佳地,将所述的水提的提取液浓缩至1mL/1g石菖蒲药材~2mL/1g石菖蒲药材为止,更佳地浓缩至1mL/1g石菖蒲药材。

11.如权利要求8所述的检测方法,其特征在于,所述的用大孔吸附树脂吸附的步骤中,大孔吸附树脂为D101大孔吸附树脂,较佳地为D101大孔吸附树脂柱;

和/或,D101大孔吸附树脂柱的径高比为1∶4~1∶12,较佳地为1∶8~1∶12;

和/或,用大孔吸附树脂吸附的上样流速为1~2BV/h,较佳地为1~1.5BV/h;

和/或,大孔吸附树脂的用量为0.5mL树脂/1g石菖蒲药材~1mL树脂/1g石菖蒲药材,较佳地为0.6mL树脂/1g石菖蒲药材;

较佳地,在所述的用大孔吸附树脂吸附的步骤之前,将上清液浓缩至干并和水混合溶解;水的用量较佳地为0.2mL/1g石菖蒲药材~0.5mL/1g石菖蒲药材;所述的浓缩较佳地为减压浓缩。

12.如权利要求8所述的检测方法,其特征在于,所述的洗脱树脂的步骤中,树脂洗脱剂为水;

和/或,树脂洗脱剂的用量为4~6倍树脂体积,较佳地为5倍树脂体积。

13.如权利要求8所述的检测方法,其特征在于,还包含以下步骤:将树脂洗脱液用活性炭吸附,洗脱活性炭,收集活性炭洗脱液,干燥,即可;

较佳地,在所述的树脂洗脱液用活性炭吸附之前,将所述的树脂洗脱液减压浓缩;

较佳地,将所述的树脂洗脱液浓缩至0.2mL/1g石菖蒲药材~0.5mL/1g石菖蒲药材为止。

14.如权利要求13所述的检测方法,其特征在于,所述的活性炭为活性炭柱,径高比为1∶4~1∶12,较佳地为1∶8~1∶12;

和/或,所述的活性炭吸附的上样流速为1~2BV/h,较佳地为1~1.5BV/h;和/或,活性炭的用量为0.5mL活性炭/1g石菖蒲药材~1mL活性炭/1g石菖蒲药材,较佳地为0.6mL活性炭/1g石菖蒲药材。

15.如权利要求13所述的检测方法,其特征在于,在所述的洗脱活性炭的步骤中,活性炭洗脱剂为水和乙醇水溶液;所述的洗脱活性炭较佳地用水洗脱活性炭后再用乙醇水溶液洗脱活性炭;

和/或,乙醇水溶液较佳地为体积分数为30%的乙醇水溶液;

和/或,水的用量为3~5倍活性炭体积,较佳地为4倍活性炭体积;

和/或,乙醇水溶液的用量为3~5倍活性炭体积,较佳地为4倍活性炭体积;

和/或,所述的收集活性炭洗脱液为收集30%乙醇水溶液的活性炭洗脱液;

和/或,所述的干燥为减压浓缩后干燥。

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