用于鉴别埃立克体种类的组合物和方法与流程

文档序号:12481169阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种用于鉴别感染受试者的埃立克体,若存在时的种类的方法,所述方法包括:

使从所述受试者得到的样品与第一群分离的肽接触,所述第一群分离的肽包含至少三个不同肽,其各自包含序列S-X2-K-E-X5-K-Q-X8-T-X10-X11-X12-X13-G-L-K-Q-X18-W-X20-G-X22-X23-X24-X25-X26-G-G-G-G-G-N-F-S-A-K-E-E-X39-A-E-T-R-X44-T-F-G-L-X49-K-Q-Y-D-G-A-X56-I-X58-E-N-Q-V-Q-N-K-F-T-I-S-N-C(SEQ ID NO:1)或其片段,其中X2是选自A和V的氨基酸;X5是选自E和D的氨基酸;X8是选自T和P的氨基酸;X10是选自T和V的氨基酸;X11是选自G和A的氨基酸;X12是选自L和V的氨基酸;X13是选自Y和F的氨基酸;X18是选自D和N的氨基酸;X20是选自D和N的氨基酸;X22是选自S和V的氨基酸;X23是选自A、S及T的氨基酸,X24是选自A和I的氨基酸;X25是选自T和P的氨基酸;X26是选自S、N及K的氨基酸;X39是任何氨基酸;X44是任何氨基酸;X49是任何氨基酸;X56是任何氨基酸;并且X58是任何氨基酸;

检测包含抗体及所述第一群中的一个或多个肽的第一组复合物的形成;

使所述样品与第二群分离的肽接触,所述第二群分离的肽包含至少三个不同肽,其各自包含序列F-S-A-K-E-E-X7-A-E-T-R-X12-T-F-G-L-X17-K-Q-Y-D-G-A-X24-I-X26-E-N-Q-V-Q-N-K-F-T-I-S-N-C(SEQ ID NO:2)或其片段,其中X7是任何氨基酸;X12是任何氨基酸;X17是任何氨基酸;X24是任何氨基酸;并且X26是任何氨基酸;及

检测包含抗体及所述第二群中的一个或多个肽的第二组复合物的形成,其中同时形成所述第一组和第二组复合物表明,所述受试者感染伊文氏埃立克体(E.ewingii),并且其中形成所述第一组复合物而未形成所述第二组复合物表明,所述受试者感染犬埃立克体(E.canis)和/或查菲埃立克体(E.chaffeensis)。

2.一种用于鉴别感染受试者的埃立克体,若存在时的种类的方法,所述方法包括:

使从所述受试者得到的样品与如权利要求1中所定义的第一群分离的肽接触;

检测包含抗体及所述第一群中的一个或多个肽的第一组复合物的形成;

使所述样品与第三群分离的肽接触,所述第三群分离的肽包含至少三个不同肽,其各自包含序列S-X2-K-E-X5-K-Q-X8-T-X10-X11-X12-X13-G-L-K-Q-X18-W-X20-G-X22-X23-X24-X25-X26-G-G-G-G-G-N-F-S-A-K-E-E-X39-A-X41-T-R-X44-T-F-G-X48-X49-K-Q-Y-D-G-A-X56-I-X58-E-N-Q-V-Q-N-K-F-T-I-S-N-C(SEQ ID NO:3)或其片段,其中X2是选自A和V的氨基酸;X5是选自E和D的氨基酸;X8是选自T和P的氨基酸;X10是选自T和V的氨基酸;X11是选自G和A的氨基酸;X12是选自L和V的氨基酸;X13是选自Y和F的氨基酸;X18是选自D和N的氨基酸;X20是选自D和N的氨基酸;X22是选自S和V的氨基酸;X23是选自A、S及T的氨基酸;X24是选自A和I的氨基酸;X25是选自T和P的氨基酸,X26是选自S、N及K的氨基酸;X39是任何氨基酸;X41是选自D和N的氨基酸;X44是任何氨基酸;X48是选自V和A的氨基酸;X49是任何氨基酸;X56是任何氨基酸;并且X58是任何氨基酸;及

检测包含抗体及所述第三群中的一个或多个肽的第三组复合物的形成,其中同时形成所述第一组和第三组抗体-肽复合物表明,所述受试者感染犬埃立克体和/或查菲埃立克体,并且其中形成所述第一组但未形成所述第三组抗体-肽复合物表明,所述受试者感染伊文氏埃立克体。

3.如权利要求1或2所述的方法,其中SEQ ID NO:1中的X39是K。

4.如权利要求1或2所述的方法,其中SEQ ID NO:1中的X44是K或R,并且SEQ ID NO:1中的X49是E或D。

5.如权利要求1或2所述的方法,其中SEQ ID NO:1中的X56是K或Q,并且SEQ ID NO:1中的X58是E或T。

6.如权利要求1或2所述的方法,其中SEQ ID NO:1的所述片段包含SEQ ID NO:1中的至少20、25、30、35或40个连续氨基酸。

7.如权利要求1或2所述的方法,其中SEQ ID NO:1的所述片段包含SEQ ID NO:1的氨基酸33至71。

8.如权利要求1或2所述的方法,其中所述第一群中的每个肽都包含序列SEQ ID NO:1。

9.如权利要求1所述的方法,其中SEQ ID NO:2中的X7是K。

10.如权利要求1所述的方法,其中SEQ ID NO:2中的X12是K或R,并且SEQ ID NO:2中的X17是E或D。

11.如权利要求1所述的方法,其中SEQ ID NO:2中的X24是K或Q,并且SEQ ID NO:2中的X26是E或T。

12.如权利要求1所述的方法,其中SEQ ID NO:2的所述片段包含SEQ ID NO:2中的至少15、20、25、30或35个连续氨基酸。

13.如权利要求1所述的方法,其中所述第二群中的每个肽都包含序列SEQ ID NO:2。

14.如权利要求2所述的方法,其中SEQ ID NO:3中的X39是K。

15.如权利要求2所述的方法,其中SEQ ID NO:3中的X44是K或R,并且SEQ ID NO:3中的X49是E或D。

16.如权利要求2所述的方法,其中SEQ ID NO:3中的X56是K或Q,并且SEQ ID NO:3中的X58是E或T。

17.如权利要求2所述的方法,其中SEQ ID NO:3的所述片段包含SEQ ID NO:3中的至少20、25、30、35或40个连续氨基酸。

18.如权利要求2所述的方法,其中SEQ ID NO:3的所述片段包含SEQ ID NO:3的氨基酸33至71。

19.如权利要求2所述的方法,其中所述第三群中的每个肽都包含序列SEQ ID NO:3。

20.一种用于鉴别感染受试者的埃立克体,若存在时的种类的方法,所述方法包括:

使从所述受试者得到的样品与如权利要求1中所定义的第一群分离的肽接触;

检测包含抗体及所述第一群中的一个或多个肽的第一组复合物的形成;

使所述样品与如权利要求1中所定义的第二群分离的肽接触;及

检测包含抗体及所述第二群中的一个或多个肽的第二组复合物的形成;

使所述样品与如权利要求2中所定义的第三群分离的肽接触;及

检测包含抗体及所述第三群中的一个或多个肽的第三组复合物的形成,其中同时形成所述第一组和第二组复合物但未形成所述第三组表明,所述受试者感染伊文氏埃立克体,并且其中同时形成所述第一组和第三组复合物但未形成所述第二组表明,所述受试者感染犬埃立克体和/或查菲埃立克体。

21.如前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述样品用至少一种分析进一步分析以确定所述感染种类是犬埃立克体还是查菲埃立克体。

22.如权利要求21所述的方法,其中所述至少一种分析是间接免疫荧光分析(IFA)、斑点印迹分析、侧向流分析、ELISA或蛋白质印迹。

23.如前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述检测步骤中的至少一个包括:(i)进行ELISA分析;(ii)执行侧向流分析;(iii)进行凝集分析;(iv)进行蛋白质印迹、狭缝印迹或斑点印迹分析;(v)进行波长位移分析;(vi)使所述样品通过分析或离心转子;或(vii)执行微阵列分析。

24.如前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述样品是来自人类、犬科或猫科受试者。

25.如前述权利要求中任一项所述的方法,其中所述样品是血液、血清、血浆、脑脊髓液、组织提取物、尿液或唾液样品。

26.如权利要求25所述的方法,其中所述样品是全血样品。

27.如前述权利要求中任一项所述的方法,所述方法另外包括报告检测结果。

28.一种试剂盒,包括:

如权利要求1中所定义的第一群分离的肽;

如权利要求1中所定义的第二群分离的肽;

如权利要求2中所定义的第三群分离的肽;及

有关使用所述第一、第二及第三群肽鉴别生物样品中埃立克体,若存在时的种类的说明书。

29.如权利要求28所述的试剂盒,其中所述说明书包含有关使生物样品依序与所述第一、第二及第三群肽接触的指导。

30.如权利要求28所述的试剂盒,另外包括一种或多种标记试剂。

31.如权利要求28所述的试剂盒,其中所述第一、第二和/或第三群肽被固定在固体支撑物上。

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