本发明涉及一种与碱性磷酸酶发生催化反应的化学发光底物，属于化学发光免疫分析检测的
技术领域：
。技术背景化学发光酶疫分析包含了免疫化学反应和化学发光反应两个部分。免疫分析系统是将酶标记在抗原或抗体上，经过抗原与抗体特异性反应形成抗原－抗体免疫复合物。化学发光分析系统是在免疫反应结束后，加入酶的发光底物，化学发光物质经酶催化后，形成一个处于激发态的中间体，会发射光子释放能量以回到稳定的基态，发光强度可以利用发光信号测量仪器进行检测。待测物质浓度因为与发光强度成一定的关系而实现检测目的。碱性磷酸酶在化学发光酶疫分析应用比较广泛，目前使用最多的发光底物是1，2－二氧环己烷，主要是AMPPD及其衍生物。此类物质大多为国外专利产品，价格昂贵、不易购买，且一般到达平台期时间长（＞10分钟）。碱性磷酸酶能催化二氢吖啶磷酸酯类化合物反应并产生化学发光，此种反应速度快，发光到达平台期时间短，但是灵敏度较低（≤10-6moL）。因此，亟待开发出一种配方简单、价格比国外产品便宜、到达平台期时间短、灵敏度高的化学发光底物，以提高临床免疫检测速度，缩短检测时间。技术实现要素：为了克服现有技术的不足，本发明公开了一种配方简单、价格比国外产品便宜、到达平台期时间短、灵敏度高的碱性磷酸酶的化学发光底物。本发明涉及的发光底物在和碱性磷酸酶混合后，被碱性磷酸酶催化产生不稳定的中间态化合物，此中间态化合物回归到基态时会发出450nm的光，发光底物中添加的表面活性剂，在中间态化合物周围形成胶束增加发光率，金属离子保持碱性磷酸酶的活性，提高催化效率，还原剂可维持发光底物的稳定。这些方式可以提高发光底物的灵敏度和稳定性。一种碱性磷酸酶催化的化学发光底物，其特征在于：它含有化合物Ⅰ：3,6-(二甲胺基)吖啶，化学结构式如下：进一步的，它还含有化合物Ⅱ：9-（3’-乙氧苯基硫代磷酸氧亚甲基）-10-甲基-9,10-二氢化吖啶二钾盐，化学结构式如下：进一步的，它还含有表面活性剂，所述表面活性剂优选TritonX-100、TritonX-405、吐温-80中的一种或多种，所述表面活性剂最优选的为TritonX-100。进一步的，它还含有还原剂，所述还原剂优选二硫苏糖醇（DTT）、β-巯基乙醇、亚硫酸钠、抗坏血酸中的一种或多种，所述还原剂最优选的为二硫苏糖醇（DTT）。进一步的，它还含有缓冲体系，所述缓冲体系优选Tris-盐酸缓冲体系或2-氨基-2-甲基-1-丙醇缓冲体系，所述缓冲体系最优选的为Tris-盐酸缓冲体系。进一步的，它还含有金属离子以维持碱性磷酸的活性，优选的锌离子、镁离子。进一步的，所述化合物Ⅰ的浓度为10mg/L～100mg/L，优选的浓度为25mg/L～50mg/L。进一步的，所述化合物Ⅱ的浓度为100mg/L～1g/L，优选的浓度为200mg/L～500mg/L。进一步的，所述表面活性剂的浓度为0.01%～0.1%，优选的浓度为0.01%～0.05%。进一步的，所述还原剂剂的浓度为0.1%～1%，优选的浓度为0.1%～0.5%。进一步的，所述缓冲体系的浓度为10mM/L～500mM/L，PH值为7.0～9.0，优选的浓度为50mM/L～200mM/L，PH值为8.0～8.5。进一步的，所述金属离子的浓度为1mM/L～10mM/L，优选的浓度为1mM/L～5mM/L。本发明一种与碱性磷酸酶发生催化反应的化学发光底物，含有3,6-(二甲胺基)吖啶、9-（3’-乙氧苯基硫代磷酸氧亚甲基）-10-甲基-9,10-二氢化吖啶二钾盐、碱性蓝54、表面活性剂、还原剂等，本发明的化学发光底物液配方简单、价格比国外产品便宜、到达平台期时间短（＜2sec）、灵敏度高（≥10-19moL）。附图说明图1为4种不同发光底物到达平台期时间对比图。具体实施方式下面结合实例进一步说明本发明，本发明的优点和特点将被描述的更清楚。但是，应该可以理解，本实例仅仅是本发明的一种范例，并不会对本发明的范围做任何限制。实施例1YJAPS的配方1（PH8.0），具体见表1：表1物料浓度Tris50mM/L化合物Ⅰ25mg/L化合物Ⅱ200mg/LTritonX-1000.01%DTT0.1%氯化镁1mM/L实施例2YJAPS的配方2（PH8.5），具体见表2：表2物料浓度Tris200mM/L化合物Ⅰ50mg/L化合物Ⅱ500mg/LTritonX-1000.05%DTT0.5%氯化镁5mM/L实施例3YJAPS的配方3（PH8.0），具体见表3：表3物料浓度Tris50mM/L化合物Ⅰ25mg/L化合物Ⅱ200mg/LTritonX-1000.05%DTT0.5%氯化镁5mM/L实施例4YJAPS的配方4（PH8.5），具体见表4：表4物料浓度Tris200mM/L化合物Ⅰ50mg/L化合物Ⅱ500mg/LTritonX-1000.01%DTT0.1%氯化镁1mM/L按照上述表格中不同配方进行化学发光底物（YJAPS）的制备，分别按照各表中物料的量进行称量，溶解在纯化水中，充分搅拌溶解后调节PH，定容。灵敏度测试：配制不同浓度梯度的碱性磷酸酶（10-15moL～10-19moL），分别取20uL加入检测反应管中，然后加入200uL配方1化学发光底物（YJAPS-1），在化学发光测定仪上测定发光强度（RLU）,记录测试结果。配方2、3、4操作同上。结果见表5。表5灵敏度测试结果到达平台期时间测试：取4只检测反应管，各取20uL浓度为10-15moL的碱性磷酸酶加入检测反应管中，然后分别加入不同配方的200uL化学发光底物，分别隔2s、15s、25s、35s、1min在化学发光测定仪上测定发光强度（RLU）,测试结果见图1和表6。表6到达平台期时间测试结果时间YJAPS-1YJAPS-2YJAPS-3YJAPS-41(2s)363801133704760533361752299716892(15s)351661393794673932670946298205503(25s)351702643731416332470332282676104(35s)362443143785394632365233298349835(1min)36094126388501183376512429725517当前第1页1 2 3