血尿酸检测试纸的制作方法

本发明涉及体外诊断用检测试纸，特别涉及一种血尿酸检测试纸。

背景技术：

尿酸是嘌呤代谢过程中的产物，正常情况下70％的尿酸来自体内的新陈代谢，30％来自饮食，通过循环系统最终大部分由肾脏排出，该途径上任何环节出现问题，都可能导致高尿酸。研究发现，痛风与血尿酸水平的升高明确相关。在无痛风症状高尿酸血症(Hyperuricemia，HUA)人群中，血尿酸大于9mg/dl组痛风的年发病率为4.9％，7-9mg/dl组年发病率为0.5％，7mg/dl以下组仅为0.1％，将痛风患者血尿酸降至6mg/dl以下，痛风发作与关节内晶体的沉积均可减少。

近年的研究发现痛风与代谢综合征密切相关，痛风患者合并代谢综合征的比值是非痛风患者的3.05倍。痛风相关的HUA同时是糖尿病、慢性肾病、肥胖、高血压、肾结石、心梗、心衰和脑卒中等多种代谢相关疾病的危险因素。痛风是全因死亡和心血管死亡的独立危险因素，它显著降低了患者的生存质量。鉴于痛风沉重的疾病负担以及可能所致的严重危害，痛风和HUA的长期管理的重要性日益引起了广泛的关注。但是现阶段痛风病人的尿酸检测，大部分都还是在急性发作期时去医院进行检测，这样为时已晚，会给病人带来极大的痛苦，如果能够有一款让痛风病人能够实时监控自身尿酸含量的仪器，这将会给病人带来极大的方便。

目前，血液尿酸主要在大型生化分析仪上进行检测。该方法存在诸多问题，比如抽血量较多，等待时间较长。

技术实现要素：

针对现有技术中的不足之处，本案的目的在于提供一种能够方便快速检测血液尿酸含量的试纸，这种试纸与微型手持式仪器联用可以快速测出尿酸浓度；该试纸不需要抽取大量静脉血，只需微量指尖血，即可在几分钟内检测出血液中尿酸浓度。

为实现上述目的，本发明的技术方案概述如下：

一种血尿酸检测试纸，其通过将滤纸片依次浸入A液、烘干、浸入B液、再烘干制得；其中：

所述A液包括有：PBS缓冲液、尿酸氧化酶、过氧化物酶、4-氨基安替比林和表面活性剂；

所述B液包括有：2-(3,5-二甲氧基-4-羟苯基)-4-乙氧苯基-5-[4-(二甲氨基)苯基]-咪唑和醇类溶剂。

优选的是，所述的血尿酸检测试纸，其中，所述尿酸氧化酶的浓度为30000-50000U/L。

优选的是，所述的血尿酸检测试纸，其中，所述过氧化物酶的浓度为30000-50000U/L。

优选的是，所述的血尿酸检测试纸，其中，所述4-氨基安替比林的浓度为4-5g/L。

优选的是，所述的血尿酸检测试纸，其中，所述表面活性剂的浓度为15-30g/L。

优选的是，所述的血尿酸检测试纸，其中，所述2-(3,5-二甲氧基-4-羟苯基)-4-乙氧苯基-5-[4-(二甲氨基)苯基]-咪唑的浓度为4-5g/L。

优选的是，所述的血尿酸检测试纸，其中，所述A液的pH为8.0-9.0。

优选的是，所述的血尿酸检测试纸，其中，所述醇类溶剂选自甲醇或乙醇。

优选的是，所述的血尿酸检测试纸，其中，所述B液还包括有2,3-二氯-5-三氟甲基吡啶。

优选的是，所述的血尿酸检测试纸，其中，所述2,3-二氯-5-三氟甲基吡啶的浓度为1.5-2.0g/L。

本发明的有益效果是：与现有技术比较，现有技术检测血尿酸普遍采用全自动生化分析仪，该方法需要血量较大，等待时间较长，需要到大型医院检测。另外也有电化学法等，但所用试剂条的生产工艺较繁琐，成本较高，测试不够稳定等。本发明的优点是：本案的血尿酸检测试纸，在碱性条件下，尿酸氧化酶快速与尿酸发生反应产生过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶的作用下将无色的染料氧化为有色染料，试纸呈现从无色到深蓝色的明显色阶，易于目视分辨和机读，且不受血液中其他物质的干扰，试纸制备方法简单，易操作，性能稳定，测定结果准确。

附图说明

图1为采用单一色原的试纸所获得的血尿酸浓度与吸光度的标准曲线图。

图2为采用单一色原+辅助色原的试纸所获得的血尿酸浓度与吸光度的标准曲线图。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。

本案列出一实施例的血尿酸检测试纸，其通过将滤纸片依次浸入A液、烘干、浸入B液、再烘干制得；其中：

A液包括有：PBS缓冲液、尿酸氧化酶、过氧化物酶、4-氨基安替比林和表面活性剂；

B液包括有：2-(3,5-二甲氧基-4-羟苯基)-4-乙氧苯基-5-[4-(二甲氨基)苯基]-咪唑和醇类溶剂。2-(3,5-二甲氧基-4-羟苯基)-4-乙氧苯基-5-[4-(二甲氨基)苯基]-咪唑是色原。

其中，尿酸氧化酶的浓度优选为30000-50000U/L。

其中，过氧化物酶的浓度优选为30000-50000U/L。

其中，4-氨基安替比林的浓度优选为4-5g/L。

其中，表面活性剂的浓度优选为15-30g/L。

其中，2-(3,5-二甲氧基-4-羟苯基)-4-乙氧苯基-5-[4-(二甲氨基)苯基]-咪唑的浓度优选为4-5g/L。

其中，A液的pH优选为8.0-9.0。

其中，醇类溶剂优选选自甲醇或乙醇。

作为本案另一实施例，其中，B液还包括有2,3-二氯-5-三氟甲基吡啶。

其中，2,3-二氯-5-三氟甲基吡啶的浓度优选为1.5-2.0g/L。

本试纸的制作过程如下：

将滤纸(whatman滤纸、杭州双圈滤纸等)在A液中充分浸泡后取出，50-90℃干燥10-20分钟；然后在B液中浸泡，30-60℃干燥10-20分钟；然后将滤纸粘贴于塑料基材上，切割成试剂条，保存备用。

2-(3,5-二甲氧基-4-羟苯基)-4-乙氧苯基-5-[4-(二甲氨基)苯基]-咪唑的合成路径如下：

本案检测试纸显色原理为：

以2-(3,5-二甲氧基-4-羟苯基)-4-乙氧苯基-5-[4-(二甲氨基)苯基]-咪唑做色原，在检测时，试纸颜色由无色变为蓝色。且使用2-(3,5-二甲氧基-4-羟苯基)-4-乙氧苯基-5-[4-(二甲氨基)苯基]-咪唑做色原时，在定量检测时所做的标准曲线的线性拟合度高(如图1所示)，这说明使用该色原可以提高对血液尿酸的检测精度。而若采用常规的2,4,6-三溴-3-羟基苯甲酸作色原，首先变色不明显，虽然由无色变为红色，红色显色较为混沌模糊，色阶差异小；并且，配置出标准样品进行标准曲线制作时，获得的曲线的线性拟合度较低(R²＜0.95)。

作为本案另一方案，在B液中引入了另一个辅助色原2,3-二氯-5-三氟甲基吡啶，它可以放大尿酸浓度对色阶的差异度，并能够提高血尿酸浓度与吸光度之间的线性关联度，从而进一步增加试纸的检测精度，具体如图2所示，图2中的线性拟合度R²＝0.9996要略优于图1中的R²＝0.9987。

图1和图2中的吸光度是在680nm可见光光源下，采用分光光度计或手持式的吸光度检测设备测试获得，通过实验可以发现，本试纸具备准备检测血尿酸浓度的能力，它与微型手持式仪器联用可以快速测出尿酸浓度，从而实现检测的便捷化。

尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用，它完全可以被适用于各种适合本发明的领域，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实现另外的修改，因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限于特定的细节。