本发明属于医学体外诊断技术领域，具体的涉及一种血清中α-淀粉酶的测定试剂盒。
背景技术
胰腺内含有多种大量的消化酶，在临床工作中，最主要的有3种胰酶，即胰蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶。胰腺功能障碍时，一方面分泌机能障碍，致酶向十二指肠排泄的量减少，而另一方面逸入血液内的酶量增多，使血液及尿液中的酶量增加。根据淀粉酶水解产物异构类型的不同可分为α-淀粉酶与β-淀粉酶，α-淀粉酶存在于动物和微生物中，β-淀粉酶主要见于高等植物中，但也有报告在细菌、牛乳、霉菌中存在。
在人体内α-淀粉酶不仅在胰腺疾患、非胰腺疾患、唾液腺疾患的诊断中有价值，而且是腹部疾患、巨淀粉酶血症等诊断上的重要指标。临床检验中比较常用的是血清α-淀粉酶测定。
迄今为止，测定α-淀粉酶的方法达200种以上，主要有：
1.以淀粉为底物的总α-淀粉酶活力测定法
分为粘度测定法、浊度测定法和碘-淀粉呈色法，其中粘度测定法由于技术上的困难，准确性和精密度差，早已停用。浊度测定法存在底物不稳定难以标化的缺点。碘-淀粉呈色法系半定量方法，不能精确反映酶活性的高低，敏感性低，易导致临床漏诊。该法已被我国卫生部明令淘汰。
2.α-淀粉酶干化学测定法
此方法由于具有快速床旁测定简便准确、精密、实用等特点适用于临床，但是由于认知程度低，仪器价格和试剂价格高等诸多因素，难以普及。
3.以麦芽寡糖为底物的α-淀粉酶活力测定法
包括直接测定法和以麦芽寡糖为底物的酶偶联测定法。其中直接测定法具有污染环境等缺点。以麦芽寡糖为底物的酶偶联测定法包括麦芽戊糖为底物、麦芽四糖为底物以及麦芽七糖为底物的酶偶联测定法，其中麦芽戊糖为底物法应用工具酶较多，且溶血对测定结果影响较大；麦芽四糖为底物法内源性麦芽糖和葡萄糖等中间产物对反应有干扰；麦芽七糖为底物法，其优点是其增加水解率且对α-淀粉酶同工酶的亲和力与淀粉最接近，这类方法存在着因化学修饰可能改变淀粉酶与底物的反应性问题，不能完全符合ifcc制定的参考方法标准，但是与其他方法相比较，该法最接近标准。
因此，本发明研究出一种改善麦芽七糖为底物法酶偶联测定法，解决淀粉酶与底物的反应性问题，使其尽量符合ifcc制定的参考方法的标准，是可以解决目前临床应用难题的。
技术实现要素：
为了克服现有技术的缺陷，虽然专利201410401270.3在试剂盒中加入了十二烷基苯磺酸钠，改善试剂盒性能，但是本发明的发明人经试验发现硝酸铈能更好的改善淀粉酶检测试剂盒的性能，提高检测灵敏度，更进一步地降低最低检测限浓度，因此本发明中加入硝酸铈进一步改善α-淀粉酶检测试剂盒的性能。
具体实施方案
具体而言，本发明涉及如下方面，更具体而言，本发明涉及一种血清中α-淀粉酶的测定试剂盒，该试剂盒为液体双试剂，由试剂1(r1)和试剂2(r2)组成，所述的r1包括以下组分：
所述的r2包括以下组分：
4，6-亚乙基-4-硝基酚-α-庚糖(e-pnp-g7)0.1～10mmol/l
硝酸铈0.1～1mmol/l
优选地，所述的r1包括以下组分：
所述的r2包括以下组分：
e-pnp-g75mmol/l
硝酸铈0.5mmol/l
具体实施方式
下面通过具体的实施例对本发明进行详细说明，但这些例举性实施方式的用途和目的仅用来例举本发明，并非对本发明的实际保护范围构成任何形式的任何限定，更非将本发明的保护范围局限于此。
实施例1
血清中α-淀粉酶的测定试剂盒，该试剂盒为液体双试剂，由试剂1(r1)和试剂2(r2)组成，r1组分为：
r2组分为：
e-pnp-g75mmol/l
硝酸铈0.5mmol/l
实施例2
血清中α-淀粉酶的测定试剂盒，该试剂盒为液体双试剂，由试剂1(r1)和试剂2(r2)组成，r1组分为：
r2组分为：
e-pnp-g710mmol/l
硝酸铈1.0mmol/l
实施例1-2所述的试剂盒，适用于具备相应波长405nm、37℃恒温装置的半自动或全自动生化分析仪。
实施例3
一、改进配方可以改善淀粉酶与底物的反应性验证试验
最低检测限：最低检测限的确定使用同批号试剂对零浓度校准品(或样品稀释液)进行至少20次重复检测，平均值减2倍的sd在零点平均值加2倍sd以上的即试剂的最低检测限。
1、将实施例1所述配方的自研α-淀粉酶测定试剂盒与专利201410401270.3所述配方的α-淀粉酶测定试剂盒进行最低检测限验证试验，对比两发明中试剂盒中淀粉酶的反应性。结果如下：
2、将实施例2所述配方的自研α-淀粉酶测定试剂盒与专利201410401270.3所述配方的α-淀粉酶测定试剂盒进行最低检测限验证试验，对比两发明中试剂盒中淀粉酶的反应性。结果如下：
综上可以看出，本发明自配实施例1-2检测限分别为5.061u/l和5.105u/l，而专利201410401270.3所述改进配方的α-淀粉酶测定试剂盒检测限11.026u/l，本发明较专利201410401270.3所述改进配方对淀粉酶反应性有更佳的改善效果，能更进一步的提高检测试剂盒的灵敏度，因此本发明改进配方的淀粉酶测定试剂盒，淀粉酶反应性效果增强，灵敏度进一步得到提高。从而使得，本发明的血清中α-淀粉酶的测定试剂盒检测方法更加的符合ifcc制定的参考方法的标准，解决目前临床应用难题，将会更具有实际的临床应用价值。
实施例4
二、测定准确性验证试验
1、使用本发明实施例1试剂盒与上海科华生物工程股份有限公司生产的α-淀粉酶试剂盒，采用贝克曼dxc600全自动生化分析仪进行两者的相关性验证试验，取50位患者血清进行试验，对比两者检测结果的相关性。
结果显示，自配实施例1的自研α-淀粉酶测定试剂盒与上海科华生物工程股份有限公司生产的金标试剂盒性能一致性良好。
2、使用本发明实施例2试剂盒与上海科华生物工程股份有限公司生产的α-淀粉酶试剂盒，采用贝克曼dxc600全自动生化分析仪进行两者的相关性验证试验，取50位患者血清进行试验，对比两者检测结果的相关性。
结果显示，自配实施例2的自研α-淀粉酶测定试剂盒与上海科华生物工程股份有限公司生产的金标试剂盒性能一致性良好。
实施例5
三、本试剂盒的稳定性验证试验
1、考察实施例1组分的试剂盒的稳定性
将实施例1所述配方的α-淀粉酶测定试剂盒在2～8℃储存条件下进行稳定性考核，检测测定值的变化情况，每三个月检测一次，至13个月。
2、考察实施例2组分的试剂盒的稳定性
将实施例2所述配方的α-淀粉酶测定试剂盒在2～8℃储存条件下进行稳定性考核，检测测定值的变化情况，每三个月检测一次，至13个月。
以上结果表明2℃～8℃贮存13个月，测定值在靶值的允差范围之内(测定值与靶值的偏差应在±10％)，本发明α-淀粉酶测定试剂盒稳定性良好。
综合以上信息，本发明的自研血清中α-淀粉酶测定试剂盒在改进配方的基础上，能保持与金标试剂盒检测结果一致性良好，检测结果准确可靠，试剂盒在储存条件下储存13个月，性能稳定，并且对淀粉酶反应性有更佳的改善效果，能更进一步的提高检测试剂盒的灵敏度，因此本发明的改进配方的淀粉酶测定试剂盒，淀粉酶反应性效果增强，灵敏度进一步得到提高。从而使得，本发明的血清中α-淀粉酶的测定试剂盒检测方法更加的符合ifcc制定的参考方法的标准，解决目前临床应用难题。将会更具有实际的临床应用价值。
应当理解，这些实施例的用途仅用于说明本发明而非意欲限制本发明的保护范围。此外，也应理解，在阅读了本发明的技术内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动、修改和/或变型，所有的这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的保护范围之内。