本发明涉及测定中药退黄外洗液中柚皮苷含量的方法，尤其涉及一种HPLC测定中药退黄外洗液中柚皮苷含量的方法。
背景技术：
中药退黄外洗液是由栀子、茵陈、大黄、柴胡、枳壳等16种中药组成。具有行气解郁，利胆退黄功效，主要用于预防和治疗新生儿黄疸，黄疸性肝炎等疾病。该药用于临床疗效较好。
技术实现要素：
本发明的目的旨在提供一种HPLC测定中药退黄外洗液中柚皮苷含量的方法。
本发明的目的通过以下技术方案来实现：一种HPLC测定中药退黄外洗液中柚皮苷含量的方法，包括以下步骤：
(1)制备对照品溶液：取柚皮苷对照品与甲醇制成对照品溶液；
(2)制备待测样品溶液：精密取中药退黄外洗液样品加甲醇稀释，制得待测样品溶液；
(3)取对照品溶液注入高效液相色谱仪测定，建立柚皮苷标准曲线；
(4)取待测样品溶液注入高效液相色谱仪测定，获得柚皮苷的峰面积，从而根据标准曲线计算获得柚皮苷含量；
所述步骤(3)和(4)的色谱条件：250mm×4.6mm，5μm Agilent TC-C18柱；流动相：甲醇-水＝30:70；流速1.0ml·min-1；波长切换：0～14分钟238nm，14～30分钟280nm，柱温：30℃，进样量2μl。
所述步骤(1)中，精密称取柚皮苷12.30mg置50量瓶中加甲醇使溶解，并稀释至刻度，精密吸取对照品储备液1ml置10ml瓶中加甲醇稀释至刻度，作为对照品溶液。
所述步骤(2)中，精密量取中药退黄外洗液样品1ml，置10ml量瓶中，加甲醇至刻度,摇匀，摇匀，用0.45μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得待测样品溶液。
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
与现有技术相比，本发明提供的方法操作简单，高效省时，鉴定结果客观准确。
具体实施方式
实施例1
(1)制备对照品溶液：精密称取柚皮苷12.30mg置50量瓶中加甲醇使溶解，并稀释至刻度，精密吸取对照品储备液1ml置10ml瓶中加甲醇稀释至刻度，作为对照品溶液。
(2)制备待测样品溶液：精密量取中药退黄外洗液样品1ml，置10ml量瓶中，加甲醇至刻度,摇匀，摇匀，用0.45μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得待测样品溶液。
(3)精密吸取上述对照品溶液0.2、1、2、3、5μl注入安捷伦Agilent-1200高效液相色谱仪测定，以柚皮苷峰面积积分值为纵坐标(Y)，进样量(ng)为横坐标(X)绘制标准曲线，得柚皮苷的回归方程为：Y＝30.5X-8.26(r＝0.9999)。
色谱条件：250mm×4.6mm，5μm Agilent TC-C18柱；流动相：甲醇-水＝30:70；流速1.0ml·min-1；波长切换：0～14分钟238nm，14～30分钟280nm，柱温：30℃，进样量2μl。
(4)取待测样品溶液注入安捷伦Agilent-1200高效液相色谱仪对待测样品溶液中的柚皮苷进行测定，获得柚皮苷峰面积，根据回归方程计算得到柚皮苷的含量。取不同批号的中药退黄外洗液样品3批分别进行测定，柚皮苷含量分别为：0.245mg/ml、0.255mg/ml、0.245mg/ml。
本发明可用其他的不违背本发明的精神或主要特征的具体形式来概述。本发明的上述实施方案都只能认为是对本发明的说明而不是限制，因此凡是依据本发明的实质技术对以上实施例所作的任何细微修改、等同变化与修饰，均属于本发明技术方案的范围内。