本发明涉及伤流液收集技术领域，具体涉及一种收集木质部伤流液的方法。
背景技术：
根系是植物吸收养分和水分的重要器官，在植物生长发育过程中，木质部是根系向地上部运输养分和水分的重要通道，当把植物地上部分切去时，从木质部流出的液体就称为伤流液。木质部伤流液的量及活性物质通常可以用来指示植物根系活力程度。所以，为了明确根系活力的大小，伤流液的收集方法至关重要。
目前常用的伤流液的收集方法主要有两种，第一种是体积法，用体积法收集伤流液时，由于伤流液经过橡皮管和玻璃管时遇到阻力，在植物生长后期，通常难以收集到足够的伤流液，具有一定的局限性；第二种是重量吸收法，此种方法需要在玻璃管内填满松紧适中的干燥脱脂棉，并且需要将玻璃管内的脱脂棉与植物地上部切口紧密接触，在操作上很难把控，脱脂棉吸收完全伤流液后，还需要在实验室内用离心机将脱脂棉离心，获取的上清液，即为伤流液，这种方法一方面需要配合室内离心机才能获取完整的伤流液，操作过程耗时长，不利于田间伤流液的收集，另一方面容易在收集的伤流液中留有脱脂棉，造成污染。除了以上两种方法以外，目前还有诸如微损伤韧皮部收集伤流液的方法以及加压和负压收集法等，微损伤韧皮部收集法仅适用于棉花等双子叶植物，而对于像玉米等单子叶植物并不适用，适用范围小；加压和负压收集法，一方面需要的装备比较繁琐，效率很低，另一方面，进行定量研究时，加压和负压的技术要求比较高。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种收集木质部伤流液的方法，该方法简单易操作，用以解决现有技术中木质部伤流液收集存在的局限性、复杂性、繁琐和易污染等问题。
为实现上述目的，本发明的技术方案为：
一种收集木质部伤流液的方法，所述方法包括如下步骤：
(1)制备伤流液收集装置：截取一段长30-35cm的透明硅胶软管，选用一副乳胶手套，用剪刀将乳胶手套的中指部分沿着中指指根处剪下，将剪下的乳胶手套中指部分距离指尖0.5-1cm的位置剪掉，然后将透明硅胶软管的一端插入剪掉指尖的乳胶手套中指部分窄的一端，插入长度为2-3cm，再用502胶水将其黏贴牢固，透明硅胶软管的另一端打结封闭；
(2)称取离心管重量：取离心管，用百分之一天平称取离心管的重量，并记录离心管的重量W1；
(3)安装伤流液收集装置：选取均匀具有代表性的植株，在离地面2-3cm处，用刀切去植物地上部，1-2min后用去离子水将切面冲洗干净，并用脱脂棉将水分吸干，然后迅速在切面处安装上已经制备好的伤流液收集装置，具体安装方法是将乳胶手套中指部分宽的一端套在植株切面处，并用橡皮筋绕圈固定到植株上，打结封闭的一端放置在地面上；
(4)收集伤流液：经过2-24小时的收集，确定收集装置中的伤流液不再增多，把注射器的针头插入透明硅胶软管中伤流液聚集的部分，将透明硅胶软管中的伤流液吸出，然后再把注射器的针头插入靠近植株切面处的乳胶手套中指部分中，将乳胶手套中残留的伤流液吸出，根据注射器上的刻度，获得伤流液的体积，然后将注射器中的伤流液转移到已经称重的离心管中；将橡皮筋去掉，取下收集装置，即完成了整个伤流液的收集过程；
(5)获取伤流液重量：在田间，用百分之一天平将装有伤流液的离心管称重，记录为W2，W2-W1即为伤流液的重量；
(6)伤流液储存：在田间称重后的伤流液迅速放到冰盒中，运回实验室后放入-20℃冰箱中储存，以备生理活性指标的测定。
优选地，所述透明硅胶软管的内径为10mm，外径为15mm。
其中所述离心管和注射器可以根据不同植物伤流液的量选择合适的量程，对于玉米伤流液的收集一般选用10ml离心管和10ml注射器。
进一步地，所选用的刀也是可以根据所需要收集伤流液的植物木质部的坚韧情况而定，对于玉米而言，可以选择壁纸刀。
更进一步地，为了方便起见，所述乳胶手套可以选择标准款乳白色L码一次性乳胶手套。
优选地，在实际操作过程中，可以在打结处用脱脂棉垫高1-2cm，以增加透明硅胶软管黏贴乳胶手套的一端与乳胶手套内伤流液的接触面积，从而更好的促进伤流液流出。
本发明方法具有如下优点：
本发明与现有技术相比，简单易操作，在田间就可以快速获取伤流液的体积、重量，突破了体积法中由于伤流液经过橡皮管和玻璃管时遇到阻力，难以收集到足够伤流液的瓶颈，避免了重量吸收法及加压和负压收集法需要在室内进行伤流液回收的繁琐，具有收集效率快，回收效率高的优点。
附图说明
图1是伤流液收集装置结构示意图；
图中，1-透明硅胶软管、2-乳胶手套中指部分、3-植株、4-橡皮筋、5-脱脂棉。
具体实施方式
以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。
实施例1
一种收集玉米木质部伤流液的方法，所述方法包括如下步骤：
(1)制备伤流液收集装置(如图1所示)：截取一段长30cm的透明硅胶软管1，所述透明硅胶软管1的内径为10mm，外径为15mm，选用一副标准款乳白色L码一次性乳胶手套，用剪刀将乳胶手套中指部分2沿着中指指根处剪下，将剪下的乳胶手套中指部分距离指尖0.5cm的位置剪掉，然后将透明硅胶软管1的一端插入剪掉指尖的乳胶手套中指部分窄的一端，插入长度为2cm，再用502胶水将其黏贴牢固，透明硅胶软管1的另一端打结封闭；
(2)称取离心管重量：取10ml离心管，用百分之一天平称取离心管的重量，并记录离心管的重量W1；
(3)安装伤流液收集装置：选取均匀具有代表性的植株3，在离地面2cm处，用壁纸刀切去植物地上部，1min后用去离子水将切面冲洗干净，并用脱脂棉将水分吸干，然后迅速在切面处安装上已经制备好的伤流液收集装置，具体安装方法是将乳胶手套中指部分宽的一端套在植株切面处，并用橡皮筋4绕圈固定到植株上，打结封闭的一端放置在地面上；在实际操作过程中，在打结处用脱脂棉5垫高1cm左右，以促进伤流液的流出；
(4)收集伤流液：经过2小时的收集，确定收集装置中的伤流液不再增多，把10ml注射器的针头插入透明硅胶软管中伤流液聚集的部分，将透明硅胶软管中的伤流液吸出，然后再把注射器的针头插入靠近植株切面处的乳胶手套中指部分中，将乳胶手套中残留的伤流液吸出，根据注射器上的刻度，获得伤流液的体积，然后将注射器中的伤流液转移到已经称重的离心管中，将橡皮筋去掉，取下收集装置，即完成了整个伤流液的收集过程；
(5)获取伤流液重量：在田间，用百分之一天平将装有伤流液的离心管称重，记录为W2，W2-W1即为伤流液的重量；
(6)伤流液储存：在田间称重后的伤流液迅速放到冰盒中，运回实验室后放入-20℃冰箱中储存，以备生理活性指标的测定。
实施例2
一种收集玉米木质部伤流液的方法，所述方法包括如下步骤：
(1)制备伤流液收集装置(如图1所示)：截取一段长35cm的透明硅胶软管1，所述透明硅胶软管1的内径为10mm，外径为15mm，选用一副标准款乳白色L码一次性乳胶手套，用剪刀将乳胶手套中指部分2沿着中指指根处剪下，然后将透明硅胶软管的一端插入剪掉指尖的乳胶手套中指部分窄的一端，插入长度为3cm，再用502胶水将其黏贴牢固，透明硅胶软管的另一端打结封闭；
(2)称取离心管重量：取10ml离心管，用百分之一天平称取离心管的重量，并记录离心管的重量W1；
(3)安装伤流液收集装置：选取均匀具有代表性的植株3，在离地面3cm处，用壁纸刀切去植物地上部，2min后用去离子水将切面冲洗干净，并用脱脂棉将水分吸干，然后迅速在切面处安装上已经制备好的伤流液收集装置，具体安装方法是将乳胶手套中指部分宽的一端套在植株切面处，并用橡皮筋4绕圈固定到植株上，打结封闭的一端放置在地面上；在实际操作过程中，在打结处用脱脂棉5垫高2cm左右，以促进伤流液的流出；
(4)收集伤流液：经过3小时的收集，确定收集装置中的伤流液不再增多，把10ml注射器的针头插入透明硅胶软管中伤流液聚集的部分，将透明硅胶软管中的伤流液吸出，然后再把注射器的针头插入靠近植株切面处的乳胶手套中指部分中，将乳胶手套中残留的伤流液吸出，根据注射器上的刻度，获得伤流液的体积，然后将注射器中的伤流液转移到已经称重的离心管中；将橡皮筋去掉，取下收集装置，即完成了整个伤流液的收集过程；
(5)获取伤流液重量：在田间，用百分之一天平将装有伤流液的离心管称重，记录为W2，W2-W1即为伤流液的重量；
(6)伤流液储存：在田间称重后的伤流液迅速放到冰盒中，运回实验室后放入-20℃冰箱中储存，以备生理活性指标的测定。
为了进一步验证本发明的有效性，发明人还进行了如下试验，具体如下：
一、本发明方法与重量吸收法比较
在玉米苗期，在田间选取有均匀代表性的植株12株，6株玉米采用重量吸收法收集伤流液，在离地面2cm处，用壁纸刀切去植物地上部，1-2min后用去离子水将切面冲洗干净，并用脱脂棉将水分吸干，随即套上玻璃管，务必使脱脂棉与地上部切口紧密接触，玻璃管要求一端封闭，一端开口，管内填满松紧适中的干燥脱脂棉，并且事先在天平上称重(W1)，经过2小时的收集，取下玻璃管，擦净玻璃管外壁上的污染物和湿气，在天平上称重(W2)，两次重量只差(W1-W2)即为伤流液的重量。然后将装有脱脂棉的玻璃管带回实验室进行伤流液的回收，将脱脂棉放入10ml的离心管中，将离心管放入离心机，设定10000r/min，定时为3分钟，离心完毕后，取上清液即为伤流液。剩余的6株玉米用本发明实施例1的方法收集伤流液。然后比较两者的伤流液回收率，具体见表1。
表1重量吸收法与本发明方法伤流液回收率对比表
从表1可以看出，采用本发明方法玉米伤流液的回收率明显高于用重量吸收法离心后所得到的伤流液回收率，并且在植物伤流液较少时，重量吸收法的回收率大大降低，而本发明方法不需要经过室内离心机离心就可以直接回收伤流液，不但减少了操作步骤，而且明显提高了伤流液的回收率。
二、本发明方法与体积法比较
在玉米吐丝后20天和吐丝后40天，分别在田间选取有均匀代表性的植株12株，6株采用体积法收集伤流液，在离地面3cm处，用壁纸刀切去植物地上部，1-2min后用去离子水将切面冲洗干净，并用脱脂棉将水分吸干，迅速套上直径适合的短橡皮管，管内事先装满水分，连接到有精确刻度的玻璃管上，收集3小时，根据玻璃管内液面的差，可以获得伤流液的体积。其余6株玉米用本发明实施例2的方法收集伤流液，然后比较伤流液收集量。
表2体积法与本发明方法收集伤流液量对比表
从表2可以看出，不管是在玉米吐丝后20天还是吐丝后40天，本发明方法收集的伤流液量都明显高于用体积法收集的伤流液量，尤其是在吐丝后40天，玉米生长发育进入快速衰老的阶段，用体积法已经很难再收集到伤流液，而本发明方法还可以继续收集一定量的伤流液，用于判断这个时期植株的根系活力状态。
虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施例对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。