本发明涉及分析化学领域，更具体的说是涉及一种磺丁基醚倍他环糊精钠中钠含量的检测方法。
背景技术：
：SBE-β-CD，化学名为磺丁基醚-β-环糊精钠，是一种新型药物制剂辅料，属于阴离子型高水溶性环糊精的一种磺酸基衍生物。它能很好地与药物分子包合形成非共价复合物，提高了药物的稳定性、水溶性、安全性并且有效的提高了药物分子的生物活性它的肾毒性小，能缓和药物溶血性，控制药物释放速率。目前它已经商业化，应用于注射药、口服药、鼻部用药、眼部用药等，对于含氮类药物具有特殊的亲和力和包合性。美国药典USP38中关于磺丁基醚倍他环糊精钠盐项明确指出，本品为倍他环糊精与1，4-丁烷磺内酯在碱性条件下的醚化物，反应如下：合成机理为倍他环糊精和1，4-丁烷磺内酯在氢氧化钠的催化作用下，以SN2机理进行亲核取代反应。1，4-丁烷磺内酯分子内酯键断裂同时以醚键链接环糊精。在氢氧化钠的催化下倍他环糊精上的羟基生成烷氧负离子，而后进攻1，4-丁烷磺内酯4号C，4号C磺酸酯键断裂，环糊精醚键生成。由此可见钠离子作为反应参与试剂是无可避免的，最终产物也为钠盐形式。钠离子是细胞外液主要阳离子，在维持细胞外液晶体渗透压中起重要作用，钠离子与水分子结合为水合离子，使水得以保存，防止流失。钠离子在维持神经、肌肉应激性和细胞膜通透性上起重要作用。如果体内钠盐积聚过多，会导致细胞渗透压变动，人体为了保持一定的渗透压就会吸收大量的水分，整个血液的容量也就增多，从而使心脏负荷过重，诱发或加重心力衰竭症状。此外钠过多还使血压升高，促使肾脏细小动脉硬化过程加快。磺丁基醚-β-环糊精钠，作为注射用药物制剂的辅料，其使用场景会直接进入血液。因此对磺丁基醚-β-环糊精钠中的钠离子含量进行控制，是关系到用药安全和用药效率的关键所在。虽然磺丁基醚-β-环糊精钠是中性或者接近中性的物质，可能通过负电荷部分磺丁基醚的量推算钠离子量。但由烷基磺酸为中强酸，而氢氧化钠为强碱，且有大量羟基存在的环糊精超分子包合现象存在，负电荷部分磺丁基醚的量并不能准确的推算出钠离子含量。因此确立准确的磺丁基醚倍他环糊精钠中钠含量的检测方法，对磺丁基醚-β-环糊精钠的安全用药十分必要。现有的测定钠含量的方法有火焰原子吸收光谱法、火焰原子发射光谱法、电感耦合等离子体发射光谱法、电感耦合等离子体质谱法等。其中火焰原子吸收光谱法测定元素不同，必须更换光源灯，精密度差，干扰严重，灵敏对低，并且标准工作曲线的线性范围窄(一般在一个数量级范围)，这给实际分析工作带来不便。火焰原子发射光谱法同样存在灵敏度低，标准工作曲线的线性范围窄等问题。而电感耦合等离子体发射光谱法与电感耦合等离子体质谱法，使用的仪器成本太高，维护费用也很高。因此有必要寻找一种检测灵敏度高、重现性高、结果可靠的磺丁基醚倍他环糊精钠中钠含量的检测方法。技术实现要素：本发明的目的是提供一种磺丁基醚倍他环糊精钠中钠含量的检测方法，该方法采用离子色谱法，以阳离子色谱柱为分离手段，以电导检测器为检测手段，以此来解决磺丁基醚倍他环糊精钠中钠含量检测的问题。磺丁基醚倍他环糊精钠中钠含量为磺丁基醚倍他环糊精钠的分子量分布提供检测数据，对磺丁基醚倍他环糊精钠平均取代度的检测数据的准确度进行更好的验证。本方法具检测灵敏度高、重现性高、结果可靠的优点。本发明所述的一种磺丁基醚倍他环糊精钠中钠含量的检测方法，包括以下步骤：(0)色谱条件：色谱柱为羧酸型弱酸阳离子色谱柱(赛默飞世尔公司)或极性相近的毛细管柱；柱温：35-40℃；检测器：电导检测器；检测器温度：35-37℃；流动相：25-30mmol/L甲烷磺酸溶液；流速：每分钟0.9-1.0ml；(1)供试品溶液的配制：取供试品，精密称定，加水溶解，定容，配置成供试品溶液；(2)对照品溶液的配制：取钠标准溶液(1000μg/ml)，用水稀释，定容，配置一系列不同浓度的对照品溶液；(3)样品测定：将对照品溶液利用离子色谱仪进样分析，并同时记录峰面积，采用外标法绘制钠的浓度-峰面积标准曲线，得出标准曲线回归方程；取供试品溶液，离子色谱仪进样分析，记录峰面积，根据标准曲线回归方程计算出供试品中钠的含量。优选的，所述的色谱柱为CS16色谱柱4mm×250mm。所述的柱温为35℃，所述的检测器温度为37℃。所述的流动相为25mmol/L甲烷磺酸溶液。所述的供试品溶液浓度为3μg/ml-0.59mg/ml。所述的对照品溶液浓度为0.2μg/ml-10μg/ml。每次进样分析的样品体积为25μl。采用本发明所述的方法，供试品中的钠可以有效准确的检测，并且检测灵敏度很高，钠的最低检测限可达到μg/ml的级别。附图说明图1为实施例2的空白溶剂图谱；图2为实施例3的线性回归曲线；具体实施方式本发明公开了一种磺丁基醚倍他环糊精钠中钠含量的检测方法。本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明内。本发明所述检测方法已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本
发明内容、精神和范围内对本文所述的方法应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。本发明所述检测方法在实施方式中采用的离子色谱仪(美国赛默飞世尔)；色谱柱为以羧酸型弱酸阳离子色谱柱(或性能相近型号色谱柱)下面结合实施例，进一步阐述本发明。实施例1：一种磺丁基醚倍他环糊精钠中钠含量的检测方法，包括以下步骤：(0)本发明所述检测方法的色谱条件及色谱系统仪器：赛默飞世尔ICS-5000+离子色谱仪色谱柱：以羧酸型弱酸阳离子(CS16色谱柱4mm×250mm)色谱柱(赛默飞世尔公司)或极性相近的毛细管柱。柱温：35℃；检测器：电导检测器；检测器温度：37℃；流动相：以25mmol/L甲烷磺酸溶液为流动相；流速：每分钟1.0ml；(1)供试品溶液的配制：取磺丁基醚倍他环糊精钠供试品，精密称定，加水溶解，定容，配置成供试品溶液，浓度为0.15mg/ml；(2)对照品溶液的配制：取钠标准溶液(1000μg/ml)，用水稀释，定容，配置一系列不同浓度的对照品溶液；对照品溶液浓度为0.2μg/ml-10μg/ml；(3)样品测定：将对照品溶液利用离子色谱仪进样分析，并同时记录峰面积，采用外标法绘制钠的浓度-峰面积标准曲线，得出标准曲线回归方程；取供试品溶液，离子色谱仪进样分析，记录峰面积，根据标准曲线回归方程计算出供试品中钠的含量，最终测得供试品磺丁基醚醚倍他环糊精钠中钠含量为6.86％。其中根据供试品磺丁基醚倍他环糊精钠的平均取代度为6.5，计算出本供试品中钠的理论含量为6.91％。实施例2：一种磺丁基醚倍他环糊精钠中钠含量的检测方法，包括以下步骤：(0)本发明所述检测方法的色谱条件及色谱系统仪器：赛默飞世尔ICS-5000+离子色谱仪色谱柱：以羧酸型弱酸阳离子(CS16色谱柱4mm×250mm)色谱柱(赛默飞世尔公司)或极性相近的毛细管柱。柱温：35℃；检测器：电导检测器；检测器温度：37℃；流动相：以25mmol/L甲烷磺酸溶液为流动相；流速：每分钟1.0ml；(1)供试品溶液的配制：取磺丁基醚倍他环糊精钠供试品(不同于实例1批次)，精密称定，加水溶解，定容，配置成供试品溶液，浓度为0.15mg/ml；(2)对照品溶液的配制：取钠标准溶液(1000μg/ml)，用水稀释，定容，配置一系列不同浓度的对照品溶液；对照品溶液浓度为0.2μg/ml-10μg/ml；(3)样品测定：将对照品溶液利用离子色谱仪进样分析，并同时记录峰面积，采用外标法绘制钠的浓度-峰面积标准曲线，得出标准曲线回归方程；取供试品溶液，离子色谱仪进样分析，记录峰面积，根据标准曲线回归方程计算出供试品中钠的含量。最终测得供试品磺丁基醚醚倍他环糊精钠中钠含量为6.69％。其中根据供试品磺丁基醚倍他环糊精钠的平均取代度为6.2，计算出本供试品中钠的理论含量为6.74％。实施例3：一种磺丁基醚倍他环糊精钠中钠含量的检测方法，包括以下步骤：(0)本发明所述检测方法的色谱条件及色谱系统仪器：赛默飞世尔ICS-5000+离子色谱仪色谱柱：以羧酸型弱酸阳离子(CS16色谱柱4mm×250mm)色谱柱(赛默飞世尔公司)或极性相近的毛细管柱。柱温：35℃；检测器：电导检测器；检测器温度：37℃；流动相：以25mmol/L甲烷磺酸溶液为流动相；流速：每分钟1.0ml；(1)供试品溶液的配制：取磺丁基醚倍他环糊精钠供试品磺丁基醚倍他环糊精钠供试品(不同于实例1与实例2批次)，精密称定，加水溶解，定容，配置成供试品溶液，浓度为0.15mg/ml；(2)对照品溶液的配制：取钠标准溶液(1000μg/ml)，用水稀释，定容，配置一系列不同浓度的对照品溶液；对照品溶液浓度为0.2μg/ml-10μg/ml；(3)样品测定：将对照品溶液利用离子色谱仪进样分析，并同时记录峰面积，采用外标法绘制钠的浓度-峰面积标准曲线，得出标准曲线回归方程；取供试品溶液，离子色谱仪进样分析，记录峰面积，根据标准曲线回归方程计算出供试品中钠的含量。最终测得供试品磺丁基醚醚倍他环糊精钠中钠含量为7.10％。其中根据供试品磺丁基醚倍他环糊精钠的平均取代度为6.9，计算出本供试品中钠的理论含量为7.13％。试验例1、本发明所述检测方法系统专属性检测取空白溶剂照实施例1中磺丁基醚倍他环糊精钠中钠含量方法检测，试验图谱见图1。取空白溶剂进样，空白溶剂在钠出峰位置无检出峰，表明空白溶剂对样品中钠的测定无干扰。2、本发明所述检测方法进样线性和范围试验的检测照实施例1中磺丁基醚倍他环糊精钠中钠含量方法检测。取钠标准溶液(1000μg/ml)，用水稀释，定容，配置一系列不同浓度的对照品溶液(2.5μg/ml-40μg/ml)进样测定。以钠标准溶液浓度为纵坐标，峰面积为横坐标，进行线性回归，回归曲线见图2。测定结果见表2。表2钠的线性试验结果浓度(μg/ml)2.55102040峰面积0.59091.20022.45055.067010.1467线性方程为：y＝3.9523xr＝0.9998结果表明，钠浓度在0～40μg/ml范围内，浓度与峰面积之间线性关系良好。3、本发明所述检测方法定量限和检出限的检测照实施例1中磺丁基醚倍他环糊精钠中钠含量方法检测。取钠标准溶液(1000μg/ml)，用水稀释，定容，配置浓度0.1μg/ml为对照品溶液，进样25μl，s/n＝5.9，取钠标准溶液(1000μg/ml)，用水稀释，定容，配置浓度0.2μg/ml为对照品溶液，进样25μl，s/n＝10.2。检出限为0.1μg/ml，定量限为0.2μg/ml。4、本发明所述检测方法精密度的检测。照实施例1中磺丁基醚倍他环糊精钠中钠含量方法检测。取钠标准溶液(1000μg/ml)，用水稀释，定容，配置浓度10μg/ml为对照品溶液，(10μg/ml)连续测定6次，结果见下表3。表3精密度试验结果连续6次测定的峰面积RSD为1.3％，表明仪器的精密度良好。5、本发明所述检测方法的重复性检测。照实施例1中磺丁基醚倍他环糊精钠中钠含量方法检测。取磺丁基醚倍他环糊精钠供试品，分别精密称取6份，各约15mg，用水溶解稀释至刻度，摇匀进样，分别计算含量，含量结果RSD＝0.7％，说明重复性良好。6、本发明所述检测方法的回收率检测。照实施例1中磺丁基醚倍他环糊精钠中钠含量方法检测。取磺丁基醚倍他环糊精钠供试品79.03mg，置250ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，作为供试品储备液。取9个50ml容量瓶分为3组，每组3个，分别向每个量瓶中精密加入供试品储备液25ml，三组容量瓶再分别加入钠标准贮备液(500μg/ml)0.4ml、0.5ml、0.6ml，用水稀释至刻度，摇匀，制成3组不同浓度的溶液，依法测定，计算钠的回收率，结果见下表4。表4钠的回收率试验结果平均回收率为100.0％，RSD为2.6％，表明回收率良好。7、本发明所述检测方法的溶液稳定性检测照实施例1中磺丁基醚倍他环糊精钠中钠含量方法检测。取供试品溶液(钠浓度约为10μg/ml)，分别于配制后0、3、5、24小时进样，记录峰面积。结果见下表5。表5钠溶液的稳定性试验结果结果表明，供试品水溶液室温放置24小时的稳定性良好。8、本发明所述检测方法的耐用性检测。照实施例1中磺丁基醚倍他环糊精钠中钠含量方法检测。取钠标准溶液(1000μg/ml)，用水稀释，定容，配置浓度10μg/ml为对照品溶液，，分别在不同的柱温、不同的流速、以及不同的流动相成分浓度的条件下进行试验，记录色谱图。结果见下表。表6耐用性试验结果考察项目钠理论板数标准条件：40℃柱温，1.0ml/min流速，流动相：30mmol/L甲烷磺酸溶液815535℃柱温74190.9ml/min流速7744流动相：28.5mmol/L甲烷磺酸溶液8108结果表明，改变柱温、流速和流动相组分比例后仍能满足系统适用性要求，说明此方法耐用性良好。以上所述仅是本发明的优选实施方式应当指出，对于本
技术领域：
的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。当前第1页1 2 3